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中国饲料添加剂 2018年第7期 25-31页

作者：解玉怀王丽雪孙越肖传丕张本盛杨维仁(译) 山东农业大学动物科技学院山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室山东泰安271018 北京市畜牧业环境监测站北京市100000 河北滦平华都食品有限公司河北承德068250 龙口市畜牧兽医工作站山东烟台265700

为描述几种低剂量的抗生素组合对粪便微生物丰度和多样性的影响．选取400头断奶仔猪，随机分配到8组，连续喂养不同抗生素组合28天。随机选取48头猪采集粪便样本进行DNA提取和16SrRNA高通量测序。与未添加抗生素的猪相比，饲喂金霉素（... 详细信息

为描述几种低剂量的抗生素组合对粪便微生物丰度和多样性的影响．选取400头断奶仔猪，随机分配到8组，连续喂养不同抗生素组合28天。随机选取48头猪采集粪便样本进行DNA提取和16SrRNA高通量测序。与未添加抗生素的猪相比，饲喂金霉素（CTC），喹乙醇（OLA）和恩拉霉素（ER）或维吉霉素（VIR）的猪粪便微生物多样性降低，Bacteroidetes和Prevotella属的相对丰度增加。与未添加抗生素的猪相比，饲喂CTC、杆菌肽锌（ZB）＋硫酸粘杆菌素（COL）混合物、CTC＋ZB＋COL、CTC＋OLA4-ER的猪，其变形杆菌门和琥珀酸弧菌的相对丰度降低。饲喂ZB＋COL、CTC4-OLA＋ER或CTC＋OLA＋VIR混合物的猪，α-多样性和β-多样性降低（P〈0．05）。这项研究为加深我们对抗生素组合对肠道微生物影响的理解提供了实验数据。

关键词： 16S rRNA基因抗生素组合粪便微生物 Illumina 猪

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反式翻译介导的肺炎克雷伯菌的生物学表型变化及靶向反式翻译的抗生素联用策略研究

反式翻译介导的肺炎克雷伯菌的生物学表型变化及靶向反式翻译的抗...

引用

作者：方文东安徽医科大学

学位级别：硕士

目的在我国,肺炎克雷伯菌(KP)引起的感染仅次于大肠杆菌,位列第二。不仅如此,耐药菌株和高毒力菌株的逐渐兴起给KP的治疗带来了极大的挑战。反式翻译作为细菌体内特有的一种核糖体拯救途径,被认为是一种新的抗生素作用的靶点。此外,反... 详细信息

目的在我国,肺炎克雷伯菌(KP)引起的感染仅次于大肠杆菌,位列第二。不仅如此,耐药菌株和高毒力菌株的逐渐兴起给KP的治疗带来了极大的挑战。反式翻译作为细菌体内特有的一种核糖体拯救途径,被认为是一种新的抗生素作用的靶点。此外,反式翻译在多种细菌的生物学表型方面也有很大的作用。所以,探究反式翻译对KP中的生物学表型的变化以及靶向反式翻译的抗生素和其他抗生素联用是解决KP引起感染的关键一步。方法本研究通过缺失反式翻译途径中的关键组分tmRNA,构建缺失反式翻译过程的缺失株P4325/Δssr A。利用野生型P4325和缺失型P4325/Δssr A,探究反式翻译过程在KP的生物学表型方面的影响。利用比浊法和平板涂布稀释法,评价野生型P4325和缺失型P4325/Δssr A在生长方面的变化;利用紫外线杀菌实验、健康人血清抵抗实验、过氧化氢敏感性实验和高渗实验,评价野生型P4325和缺失型P4325/Δssr A的极端环境的抵抗能力;利用结晶紫染色法,评价tmRNA缺失对KP的生物被膜形成的影响;利用溴化乙锭,评价tmRNA对KP物质吸收和外排的影响。利用7种不同的治疗KP的抗生素,探究野生型P4325和缺失型P4325/Δssr A在抗生素敏感性方面的差异。探究氨基糖苷类抗生素和喹诺酮类抗生素在P4325和P4325/Δssr A中的杀菌作用。收集11株来自不同临床科室的KP,评价靶向反式翻译的抗生素和喹诺酮类抗生素在临床株中的杀菌效果。结果tmRNA介导的反式翻译途径的缺失并不影响KP的生长和生物被膜的形成。在极端环境抵抗实验中,紫外线杀菌实验和健康人血清抵抗实验对野生型P4325和缺失型P4325/Δssr A的杀菌效果一致;过氧化氢敏感性实验和高渗实验均对缺失型P4325/Δssr A更具有杀菌效果。在溴化乙锭吸收和外排实验中,缺失株P4325/Δssr A对溴化乙锭吸收速率更快,但tmRNA的缺失并不影响对溴化乙锭的外排。CCCP对KP的促进吸收最强。维拉帕米可以促进KP吸收EtBr。利血平对KP的吸收没有影响。tmRNA介导的反式翻译缺失降低了KP对氨基糖苷类抗生素的MIC值。妥布霉素和环丙沙星组合可以杀灭对妥布霉素和环丙沙星均敏感和单一耐药的菌株,且在高度耐药菌株中比单用抗生素杀菌效果更加优良。结论tmRNA的缺失并不影响KP的生长和生物被膜的形成。tmRNA介导的反式翻译过程是KP体内的一种保护性机制,失去tmRNA可以增加KP对高渗透压和过氧化氢的敏感性,加快了物质吸收的速率。CCCP是KP一种强有力的吸收促进剂。反式翻译过程缺失会导致KP对氨基糖苷类抗生素MIC降低。基于靶向反式翻译的抗生素(妥布霉素)和环丙沙星的组合可以有效杀灭野生型P4325和缺失型P4325/Δssr A菌株且对KP的临床菌株具有协同杀菌活性,为解决KP的耐药菌株治疗提供参考。

关键词：肺炎克雷波菌 tmRNA 反式翻译核糖体拯救系统抗生素组合

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