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卵巢癌抗独特型微抗体疫苗诱导BALB/c小鼠体内抗肿瘤免疫应答的实验研究

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癌症 2004年第7期23卷 777-781页

作者：昌晓红崔恒冯捷杨文兰李艺付天云北京大学人民医院妇科肿瘤中心北京100044

背景与目的6B11抗独特型微抗体由模拟人卵巢癌抗原的抗独特型单链抗体(6B11ScFv)融合人IgG1铰链区和CH3区所构成,它具有6B11ScFv和人IgGFc的双重免疫学活性。本研究观察6B11抗独特型微抗体在BALB/c小鼠体内诱导抗肿瘤免疫反应情况,探讨... 详细信息

背景与目的6B11抗独特型微抗体由模拟人卵巢癌抗原的抗独特型单链抗体(6B11ScFv)融合人IgG1铰链区和CH3区所构成,它具有6B11ScFv和人IgGFc的双重免疫学活性。本研究观察6B11抗独特型微抗体在BALB/c小鼠体内诱导抗肿瘤免疫反应情况,探讨其作为卵巢癌疫苗的可能性。方法用卵巢癌6B11抗独特型微抗体免疫BALB/c小鼠。采用间接ELISA、竞争抑制实验和流式细胞术检测免疫鼠血清。结果6B11抗独特型微抗体免疫小鼠后,在不用佐剂的情况下可诱导小鼠产生较高的Ab3,末次免疫后30天仍持续在较高的水平。分别在末次免疫后4天、14天、24天和30天可刺激小鼠脾脏淋巴细胞CD4+T细胞和CD8+T细胞明显升高。结论6B11抗独特型微抗体可诱导机体产生特异体液免疫和细胞免疫反应,这为抗独特型微抗体疫苗的临床应用提供了一定的实验依据。

关键词：人卵巢癌抗独特型微抗体肿瘤疫苗 BALB/c小鼠

卵巢癌抗独特型单链抗体的人源化——抗独特型微抗体的构建与表达

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第4期18卷 490-494页

作者：崔恒昌晓红冯捷刘蓓曹善津北京大学人民医院妇科肿瘤中心北京100044

为了降低人抗鼠抗体反应 ,获得满意的免疫原性 ,将模拟人卵巢癌抗原的抗独特型单链抗体人源化 .采用重叠PCR和基因工程的技术 ,将 6B11ScFv基因的轻链和重链颠倒 ,成为 6B11VL VH.再与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合 (VL VH CH3) ,... 详细信息

为了降低人抗鼠抗体反应 ,获得满意的免疫原性 ,将模拟人卵巢癌抗原的抗独特型单链抗体人源化 .采用重叠PCR和基因工程的技术 ,将 6B11ScFv基因的轻链和重链颠倒 ,成为 6B11VL VH.再与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合 (VL VH CH3) ,构建抗独特型微抗体的原核表达载体 .转化E .coliBL2 1(DE3)后用IPTG诱导表达 .经SDS PAGE分离显示 ,在 5 0kD左右处有一诱导蛋白带 .不连续非变性凝胶电泳显示 ,表达产物分子量为 10 0kD左右 .采用ELISA、竞争抑制实验、West ern印迹对其进行活性测定 .结果表明 ,人源化的抗独特型微抗体具有特异性双价结合卵巢癌单克隆抗体COC16 6 9和识别人免疫球蛋白IgG1的活性。

关键词：卵巢癌抗独特型单链抗体人源化抗独特型微抗体构建表达人IgG1 重组融合基因

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卵巢癌特异性免疫细胞治疗的体内外实验研究

癌症 2008年第12期27卷 1244-1250页

作者：昌晓红程洪艳成夜霞叶雪郭慧方付天云张丽张果崔恒北京大学人民医院妇科肿瘤中心北京100044

背景与目的:卵巢癌抗独特型微抗体(6B11mini)是部分人源化的抗独特型卵巢癌疫苗,体内外实验研究证明,它可以诱导出特异的抗卵巢癌体液免疫和细胞免疫。本研究评价将6B11mini作为抗原,采用免疫细胞的方法处理卵巢癌时的安全性和有效性。... 详细信息

背景与目的:卵巢癌抗独特型微抗体(6B11mini)是部分人源化的抗独特型卵巢癌疫苗,体内外实验研究证明,它可以诱导出特异的抗卵巢癌体液免疫和细胞免疫。本研究评价将6B11mini作为抗原,采用免疫细胞的方法处理卵巢癌时的安全性和有效性。方法:用纯化的6B11mini负载树突细胞(dendritic cell,DC),与外周血单个核细胞(peripheral blood mononucleocyte,PBMNC)混合培养,在多种细胞因子共同作用下获得效应细胞6B11-OCIK。通过软琼脂克隆形成实验及接种裸鼠皮下瘤实验,观察6B11-OCIK在体内和体外的成瘤能力;将6B11-OCIK静脉注射BALB/c小鼠,观察急性毒性反应;体外Cr释放实验检测6B11-OCIK对靶细胞的杀伤作用。51用人卵巢癌细胞株SKOV3构建严重联合免疫缺陷(severe combined immune deficieney,SCID)小鼠卵巢癌移植瘤模型,注射6B11-OCIK,并以CIK、PBMNC细胞以及生理盐水作为对照组,分别观察各组肿瘤生长情况。结果:软琼脂培养14d,卵巢癌SKOV3细胞克隆形成良好,克隆形成率50%;皮下接种裸鼠后14d,阳性对照的宫颈癌HeLa细胞组全部成瘤,6B11-OCIK、CIK、WI-38组和新鲜PBMNC组持续观察13周没有成瘤。6B11-OCIK静脉注射BALB/c小鼠,30min内各剂量实验组和生理盐水对照组动物都无任何明显的不良反应;输注后第13天处死小鼠,解剖小鼠观察其各主要脏器无明显异常。在体外杀伤实验中6B11-OCIK对抗原阳性的肿瘤细胞具有特异性杀伤作用,并且与MHC限制性相关;在荷瘤SCID小鼠中6B11-OCIK治疗组肿瘤重量与生理盐水对照组相比差异有统计学意义(P=0.023),与CIK组、新鲜单采组相比差异无统计学意义(P=0.540,P=0.285)。结论:6B11-OCIK在动物体内应用时符合安全性指标,并对卵巢癌的生长有一定的抑制作用。

关键词：抗独特型微抗体卵巢肿瘤 SKOV3细胞移植瘤 CIK 免疫细胞治疗小鼠

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免疫学

中国医学文摘（计划生育妇产科学） 2006年第3期25卷 169-171页