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中国饲料 2024年第11期 39-46页

作者：王广慧杨志雨孟涓涓郑晓宇徐丽晶韩昊霖绥化学院食品与制药工程学院黑龙江绥化152061

为获取抗氧性更强的金针菇肽,本试验对超声波预处理辅助酶解法制备金针菇抗氧肽的最佳工艺条件进行了优化。以金针菇肽对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)的清除率作为指标,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白... 详细信息

为获取抗氧性更强的金针菇肽,本试验对超声波预处理辅助酶解法制备金针菇抗氧肽的最佳工艺条件进行了优化。以金针菇肽对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)的清除率作为指标,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶进行了筛选,又对等电点沉淀法分离抗氧肽的最适pH进行了优化,然后在确定胰蛋白酶为最佳蛋白酶,6为沉淀抗氧肽的最佳pH的基础上进行单因素试验,再在固定液料比为40:1(mL/g),酶解温度为37℃,酶解pH为8的前提下进行四因素三水平的响应面试验,以探讨超声功率、超声时间、酶添加量、酶解时间对制备工艺的影响。最后通过超滤分离法对抗氧肽进行了分级和活性比较。结果显示:金针菇抗氧肽的最佳制备条件为:超声时间6 min,超声功率296 W,酶添加量为金针菇样品量的1.1%(g/g),酶解时间75 min,在此条件下,金针菇抗氧肽对ABTS·的清除率为(76.63±1.24)%;截留分子质量肽对ABTS·的清除率最高。说明金针菇肽具有一定的抗氧性,为金针菇抗氧肽的开发提供了依据。

关键词：超声波预处理辅助酶解金针菇抗氧肽响应面设计超滤

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葵花籽粕抗氧肽的制备及其抗氧化活性研究

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河北农业 2023年第11期 59-61页

作者：孙立巴音郭楞职业技术学院

本研究旨在制备葵花籽粕抗氧肽并研究其抗氧化活性。首先,通过提取葵花籽粕蛋白,并经过酶解和纯化过程得到抗氧肽。接着,采用多种方法评估抗氧肽的抗氧化活性,包括DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、过氧化氢清除能力和还原力。... 详细信息

本研究旨在制备葵花籽粕抗氧肽并研究其抗氧化活性。首先,通过提取葵花籽粕蛋白,并经过酶解和纯化过程得到抗氧肽。接着,采用多种方法评估抗氧肽的抗氧化活性,包括DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、过氧化氢清除能力和还原力。通过分析实验结果,探讨了葵花籽粕抗氧肽的结构与抗氧化活性之间的关系。

关键词：葵花籽粕抗氧肽 DPPH自由基 ABTS自由基过氧化氢

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海鞘脂质和蛋白质组学分析及抗氧化肽的研究

海鞘脂质和蛋白质组学分析及抗氧化肽的研究

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作者：侯青四川大学

学位级别：硕士

海鞘(Ascidian)属于脊索动物门,现已报道3000多种海鞘类型,其中比较常见的有玻璃海鞘(Ciona intestinalis)、真海鞘(Halocynthia roretzi)和柄海鞘(Styela clava)等。真海鞘在韩国、日本等地是很受欢迎的食用海鲜,近年来我国沿海地区已... 详细信息

海鞘(Ascidian)属于脊索动物门,现已报道3000多种海鞘类型,其中比较常见的有玻璃海鞘(Ciona intestinalis)、真海鞘(Halocynthia roretzi)和柄海鞘(Styela clava)等。真海鞘在韩国、日本等地是很受欢迎的食用海鲜,近年来我国沿海地区已成功实现人工养殖。随着海鞘资源的不断增加,如何更好的开发利用海鞘资源成为亟待解决的问题。由于海鞘中富含蛋白质、脂质、生物碱等营养物质,目前研究主要集中在活性肽的开发、不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)的生物利用等。本文以三种海鞘(玻璃海鞘、真海鞘和柄海鞘)为主,将它们分为内囊和被囊两部分,利用脂质组学的分析方法,评价其不同海鞘的不同部位的脂质构成和含量。此外,通过对真海鞘和柄海鞘内囊的蛋白质组学的研究,分析其蛋白质的特征及涉及的相关的生物学功能。最后采用复合蛋白酶水解制备真海鞘内囊的多肽,评价其体外抗氧化活性,进一步分离纯化抗氧化肽并鉴定其氨基酸序列,主要研究成果如下。(1)利用脂质组学的分析方法对玻璃海鞘、真海鞘和柄海鞘的内囊和被囊进行脂质分析。结果表明,三种海鞘中的脂质类型一共包括六大类,分别是甘油磷脂(Glycerophospholipids,GP)、甘油酯(Glycerolipids,GL)、萜类、脂肪酸、鞘脂、甾醇类(除了内囊中几乎不含有)。其中GP是海鞘中最主要的脂质,三种海鞘被囊的GP为53.573.82%,内囊为51.043.17%。GL仅次于GP,三种海鞘被囊的GL为12.737.01%,内囊为14.165.41%。(2)分析海鞘中最主要的GP和GL。在玻璃海鞘中检测到43种磷脂酰胆碱(Phosphatidylcholine,PC)、26种磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)、19种磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine,PE)、11种磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol,PI)、9种磷脂酰甘油(Phosphatidylglycerol,PG)、8种磷脂酸(Phosphatidic acid,PA)、7种溶血性磷脂酰胆碱(Lysophosphatidylcholine,Lyso PC)、27种甘油二酯(Diacylglycerol,DG)及44种甘油三酯(Triglyceride,TG);在真海鞘中检测到39种PC、24种PS、22种PE、19种PI、12种PG、8种PA、3种Lyso PC、27种DG及70种TG;在柄海鞘中检测到45种PC、23种PS、22种PE、15种PI、12种PG、9种PA、9种Lyso PC、27种DG及44种TG。(3)分析PUFA在海鞘中的分布情况。结果表明,三种海鞘中都富含GPPUFA,且二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)含量丰富,它们以GP结合的方式主要位于海鞘的内囊组织(20.942.47%),在柄海鞘中最为丰富。(4)蛋白质组学的结果表明,真海鞘内囊和柄海鞘内囊中共鉴定出499种蛋白质,其中有293种相同蛋白质,84种蛋白质为真海鞘中的特异性蛋白质,48种蛋白质为柄海鞘中的特异性蛋白质;共发现22种显著性差异蛋白质,其中有15种蛋白质在柄海鞘中上调,7种蛋白质在真海鞘中上调。(5)真海鞘内囊中特异性高丰度蛋白质主要为体壁肌肉蛋白、肌钙蛋白、超氧化物歧化酶、铁传递蛋白、卵黄蛋白原等;柄海鞘内囊中特异性高丰度蛋白质主要为原肌动蛋白、肌球蛋白、中间丝蛋白、肌钙蛋白及细胞色素b5;对差异表达蛋白质进行Gene Ontology(GO)功能富集分析,主要涉及细胞成分的形态发生、DNA构象变化、染色体组织、分子功能调节剂、钙离子结合、异构酶活性、呼吸链等;进一步对真海鞘内囊中高丰度蛋白质进行GO分析,主要涉及细胞过程、代谢过程及生物调节、结合蛋白活性、催化活性、结构分子活性、运输活性及抗氧化活性、细胞、细胞部分及细胞器等。(6)与胃蛋白酶和中性蛋白酶相比,复合蛋白酶能更好的水解真海鞘内囊蛋白质,释放出活性肽,其水解液自由基清除率为83.1%(ABTS)和71.6%(DPPH),故本实验选择复合蛋白酶为酶解真海鞘内囊的最适酶。利用超滤对真海鞘酶解液进行分级分离,得到四个组分:P-1(抗氧化能力最强,浓度为5 mg/m L时,自由基清除能力为58.99%(DPPH)和66.76%(ABTS)。(7)通过G-25凝胶色谱柱对P-1组分进行分离纯化,得到了2个纯化后的组分F-1和F-2。其中F-2的自由基清除能力最强,浓度为5 mg/m L时自由基清除能力为94.24%(DPPH)和91.80%(ABTS)。采用LC-MS/MS对F-2组分进行质谱鉴定,通过DPPH消去法,鉴

关键词：海鞘脂质组学蛋白组学抗氧肽纯化

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