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电针预处理对小鼠脑缺血再灌注时海马Nrf2/HO-1信号通路的影响

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中华麻醉学杂志 2019年第12期39卷 1445-1449页

作者：孙晓鹏张春光王彬李秋杰陈怀龙张高峰毕燕琳王明山青岛大学医学院附属青岛市市立医院麻醉手术科 266071 青岛市北区妇幼保健计划生育服务中心 266021

目的评价电针预处理对小鼠脑缺血再灌注时海马核转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法选择健康雄性C57BL/6小鼠120只,10~12周龄,体重25~30 g,采用随机数字表法分为4组(n=30):对照组(C组)、脑缺血再... 详细信息

目的评价电针预处理对小鼠脑缺血再灌注时海马核转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法选择健康雄性C57BL/6小鼠120只,10~12周龄,体重25~30 g,采用随机数字表法分为4组(n=30):对照组(C组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、电针无关穴位预处理+脑缺血再灌注组(S+I/R组)和电针百会穴预处理+脑缺血再灌注组(E+I/R组)。采用双侧颈总动脉阻闭法制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型。E+I/R组电针刺激百会穴30 min,选取疏密波,强度1 mA,频率2/15 Hz,1次/d,连续5 d,最后1次电针刺激结束后24 h时建立脑缺血再灌注损伤模型。S+I/R组针刺百会穴旁2 mm,其余处理同E+I/R组。于再灌注24和48 h时行神经行为学评分,然后处死小鼠,取海马组织,HE染色后观察海马CA1区病理学结果,分别采用Western blot法和RT-PCR法测定核蛋白Nrf2及其mRNA及总蛋白HO-1、醌氧化还原酶1(NQO-1)及其mRNA的表达水平。结果与C组相比,I/R组、S+I/R组和E+I/R组神经行为学评分升高,核蛋白Nrf2及其mRNA和总蛋白HO-1、NQO1及其mRNA表达上调(P0.05)。与S+I/R组比较,E+I/R组神经行为学评分降低,核蛋白Nrf2及其mRNA和总蛋白HO-1、NQO1及其mRNA表达上调(P<0.05)。结论电针预处理减轻小鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与激活海马Nrf2/HO-1信号通路有关。

关键词：电刺激疗法缺血预处理脑再灌注损伤 NF-E2相关因子2 抗氧化反应元件海马

温肾醒脑方对血管性痴呆大鼠脑组织Nrf2-ARE信号通路的影响

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科学技术与工程 2020年第9期20卷 3533-3539页

作者：胡久略商健侯紫君臧文华卞华王军王三沆樊赟张瓅方河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室南阳473004 南阳理工学院张仲景国医国药学院南阳473004 河南中医药大学基础医学院郑州450046

为探讨温肾醒脑方(WXD)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠认知功能的改善作用及对Nrf2-ARE信号通路的影响,将70只雄性SD大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组、脑复康组(0.15 g/kg)、温肾醒脑方给药组(高剂量组5 g/kg、中剂量组2... 详细信息

为探讨温肾醒脑方(WXD)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠认知功能的改善作用及对Nrf2-ARE信号通路的影响,将70只雄性SD大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组、脑复康组(0.15 g/kg)、温肾醒脑方给药组(高剂量组5 g/kg、中剂量组2.5 g/kg、低剂量组1.25 g/kg),每组10只动物,采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD模型,给予温肾醒脑方灌胃治疗后,Morris水迷宫测试治疗后VD大鼠认知功能的改善情况,检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS),RT-PCR检测大鼠脑组织醌NADH脱氢酶(NQO1)、血红素氧合酶1(HO-1)的mRNA水平,运用Western Blot检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、NQO1、HO-1蛋白水平的表达情况以及EMSA检测Nrf2与抗氧化反应元件(ARE)结合力。结果表明:与正常组比较,VD模型组大鼠逃避潜伏期明显较长,游泳总距离明显缩短,穿越站台总数明显减少(P抗氧化应激信号通路相关。

关键词：温肾醒脑方血管性痴呆氧化应激 Nrf2 抗氧化反应元件

Nrf2-Keap1-ARE信号通路在燃煤型砷中毒大鼠肝损伤中的作用

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环境与健康杂志 2020年第2期37卷 100-105,91页

作者：胡勇王蕾王胜利姚茂琳于春张爱华贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州医科大学公共卫生学院卫生毒理学系贵州贵阳550025

目的探讨核因子E2相关因子2-Kelch样ECH联合蛋白1-抗氧化反应元件(Nrf2-Keap1-ARE)信号通路在燃煤型砷中毒大鼠肝损伤中的作用。方法将30只健康清洁级Wistar大鼠按体重随机分为5组,分别为对照(去离子水,无砷标准饲料)组、饮水型砷中毒(1... 详细信息

目的探讨核因子E2相关因子2-Kelch样ECH联合蛋白1-抗氧化反应元件(Nrf2-Keap1-ARE)信号通路在燃煤型砷中毒大鼠肝损伤中的作用。方法将30只健康清洁级Wistar大鼠按体重随机分为5组,分别为对照(去离子水,无砷标准饲料)组、饮水型砷中毒(100 mg/L)组和25、50、100 mg/kg砷粮食污染组,每组6只,雌雄各半。采用自由摄食和饮水方式进行染毒,连续染毒90 d,采用实时荧光定量PCR法检测肝组织中铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx1)m RNA的表达水平,采用免疫组化法检测肝组织中Nrf2、pNrf2、Keap1、SOD1和GPx1蛋白表达,采用Western blot法检测肝细胞浆和细胞核中Nrf2和pNrf2的蛋白表达水平;采用化学法检测SOD1和GPx的活力。结果与对照组比较,各染砷组肝组织SOD1、GPx1 mRNA表达量及Nrf2、pNrf2蛋白表达阳性率均增加(P<0.05);Keap1蛋白表达阳性率无明显改变;50、100 mg/kg砷粮食污染组肝组织SOD1蛋白表达阳性率降低(P<0.05);各砷粮食污染组GPx1蛋白表达阳性率均降低(P<0.05)。与饮水型砷中毒组比较,100 mg/kg砷粮食污染组GPx1蛋白表达阳性率降低(P<0.05)。与对照组比较,各染砷组肝组织细胞浆、细胞核中Nrf2和pNrf2蛋白表达量增加(P<0.05)。与饮水型砷中毒组比较,100 mg/kg砷粮食污染组肝细胞核Nrf2和50、100 mg/kg砷粮食污染组肝细胞核pNrf2蛋白表达量均增加(P<0.05)。与对照组比较,各砷染毒组大鼠肝组织SOD1和GPx活力均较低,除25 mg/kg砷粮食污染组SOD1活力外,差异均有统计学意义(P<0.05)。与饮水型砷中毒组比较,25 mg/kg砷粮食污染组大鼠肝组织GPx的活力较高,而50、100 mg/kg砷粮食污染组大鼠肝组织GPx的活力较低,差异均有统计学意义(P<0.05);而各剂量砷粮食污染组大鼠肝组织SOD1的活力均无明显改变。相关性分析显示,大鼠肝组织细胞核Nrf2、pNrf2蛋白的表达水平与SOD1、GPx1 mRNA的表达水平均呈正相关(P<0.05);大鼠肝组织SOD1、GPx1蛋白的表达水平与其酶活力也呈正相关(P<0.05)。结论砷可增加Nrf2蛋白表达和磷酸化,促进Nrf2核转位,从而诱导SOD1和GPx1 mRNA表达上调;同时,砷可能通过影响基因的转录后调控机制,使SOD1和GPx1蛋白表达及其酶活力降低,导致砷中毒肝损伤的发生发展。

关键词：砷中毒肝损伤核因子E2相关因子2 Kelch样ECH联合蛋白1 氧化应激抗氧化反应元件

Nrf2抑制氧化应激对放射性组织纤维化的作用研究进展

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河北医药 2023年第4期45卷 585-590页

作者：郎家婵张霓霓黄桂林龙远铸遵义医科大学附属口腔医院口腔颌面外科贵州省遵义市563000 遵义医科大学贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室

放射性组织纤维化是放射治疗的严重长期不良反应。研究表明,核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2 related factor 2,Nrf2)通过增强内源性抗氧化防御机制,对放射性组织纤维化有一定减轻和预防作用。近年来的研究发现,放射性组织纤维化... 详细信息

放射性组织纤维化是放射治疗的严重长期不良反应。研究表明,核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2 related factor 2,Nrf2)通过增强内源性抗氧化防御机制,对放射性组织纤维化有一定减轻和预防作用。近年来的研究发现,放射性组织纤维化不仅与电离辐射诱导的直接DNA损伤有关,而且与组织中水分子产生的活性氧类物质(ROS)引起的间接损伤有关。Nrf2通过与抗氧化反应元件ARE结合以启动下游靶基因及相关抗氧化酶表达,中和放射产生的ROS,促进DNA修复以及抑制炎性因子的激活来减轻放射诱导的氧化应激和细胞凋亡及衰老,从而发挥了抗纤维化作用。诱导Nrf2对抗放射性损伤中的氧化应激有望成为降低随后的组织纤维化程度的一个很好策略。但能否安全运用于临床治疗,还需进一步的深入研究。文章综述Nrf2通过抑制氧化应激在放射性组织纤维化中的作用及研究进展,为放射治疗所致的组织纤维化预防以及患者放射治疗后的组织修复相关研究提供新思路。

关键词： Nrf2 放射损伤放射诱导纤维化氧化应激抗氧化反应元件

红景天苷对1-甲基-4-苯基-1-2-3-6-四氢吡啶诱导帕金森病小鼠的作用及机制

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实用临床医药杂志 2023年第22期27卷 55-61,66页

作者：孙梓旭董霞赵宝民贾海丽马晓瑞谷伟河北北方学院附属第一医院全科医学科河北张家口075000

目的探讨红景天苷对1-甲基-4-苯基-1-2-3-6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病(PD)小鼠的作用及机制。方法通过MPTP诱导C57BL/6J小鼠建立PD小鼠模型,通过旷场实验记录小鼠行动轨迹;采用免疫组织化学法检测小鼠脑组织酪氨酸羟化酶(TH)、α-突... 详细信息

目的探讨红景天苷对1-甲基-4-苯基-1-2-3-6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病(PD)小鼠的作用及机制。方法通过MPTP诱导C57BL/6J小鼠建立PD小鼠模型,通过旷场实验记录小鼠行动轨迹;采用免疫组织化学法检测小鼠脑组织酪氨酸羟化酶(TH)、α-突触核蛋白(α-syn)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和醌氧化还原酶1(NQO1)表达变化。通过MPTP刺激SN4741细胞建立PD体外细胞模型,红景天苷预处理后,采用TUNEL实验检测各组细胞凋亡情况;采用免疫荧光法检测各组细胞TH、α-syn、Nrf2和NQO1表达变化情况;转染si-RNA敲减Nrf2表达,采用TUNEL实验检测各组细胞凋亡情况。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑组织提取液和细胞培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)蛋白表达水平。结果旷场实验结果显示,红景天苷能够改善PD小鼠3 min活动总距离、平均速度和活动轨迹,差异有统计学意义(P<0.05);与PD模型小鼠相比,红景天苷处理的PD小鼠大脑TH、Nrf2、NQO1表达增加,α-syn、IL-1β、IL-18表达减少,差异有统计学意义(P<0.05);与MPTP刺激细胞相比,红景天苷预处理组细胞凋亡减少,TH、Nrf2和NQO1表达增高,α-syn、IL-1β和IL-18表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);敲减Nrf2表达后,红景天苷对MPTP刺激细胞的保护作用减弱甚至消失。结论红景天苷可能通过激活Nrf2-ARE信号通路而减轻神经元细胞凋亡情况,有望成为一种新的PD治疗药物。

关键词：红景天苷核因子E2相关因子2 抗氧化反应元件帕金森病细胞凋亡

急性脑梗死患者外周血Keap1⁃Nrf2/ARE信号通路变化与预后的相关性分析

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疑难病杂志 2023年第6期22卷 607-612,619页

作者：张欢祝善尧葛伟洪斌刘爽安徽医科大学附属巢湖医院神经内科安徽省合肥市238000

目的分析急性脑梗死(ACI)患者外周血Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白⁃1(Keap1)⁃核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路变化与预后的相关性。方法选取2020年6月—2022年3月安徽医科大学附属巢湖医院神经内科诊治ACI患者110例... 详细信息

目的分析急性脑梗死(ACI)患者外周血Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白⁃1(Keap1)⁃核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路变化与预后的相关性。方法选取2020年6月—2022年3月安徽医科大学附属巢湖医院神经内科诊治ACI患者110例作为研究对象,根据溶栓后3个月的改良Rankin量表(mRs)评分分为近期预后良好组与近期预后不良组,随访1年ACI是否复发分为远期预后良好组与远期预后不良组,比较不同近远期预后组溶栓前、溶栓后7 d、溶栓后3个月外周血Keap1、醌氧化还原酶1(NQO1)、Nrf2、ARE蛋白相对表达量、神经功能缺损(NIHSS)评分,分析各蛋白与NIHSS评分的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)评价各蛋白对预后的预测价值。结果110例ACI患者,近期预后良好患者78例,近期预后不良患者32例;随访1年,失访6例,远期预后良好患者83例,远期预后不良患者21例。近远期预后不良组溶栓后7 d、3个月Keap1蛋白相对表达量、NIHSS评分高于近远期预后良好组,NQO1、Nrf2、ARE蛋白相对表达量低于近远期预后良好组(P均<0.001);溶栓后7 d、3个月Keap1蛋白相对表达量与NIHSS评分呈正相关(r=0.684、0.702,P均<0.001),NQO1、Nrf2、ARE蛋白相对表达量与NIHSS评分呈负相关(7 d:r=-0.615、-0.628、-0.609,3个月:r=-0.631、-0.657、-0.629,P均<0.001);溶栓后7 d的Keap1、NQO1、Nrf2、ARE蛋白相对表达量及四者联合预测近期预后的AUC为0.803、0.717、0.800、0.765、0.907,四者联合优于各蛋白单独预测(Z/P=2.105/0.026、2.413/0.004、2.113/0.021、2.205/0.016);溶栓后3个月的Keap1、NQO1、Nrf2、ARE蛋白相对表达量及四者联合预测远期预后不良的AUC为0.766、0.765、0.812、0.767、0.927,四者联合优于各蛋白单独预测(Z/P=2.238/0.010、2.241/0.008、2.115/0.019、2.231/0.012);溶栓后3个月的外周血Keap1⁃Nrf2/ARE蛋白预测远期预后的AUC与溶栓后7 d的外周血Keap1⁃Nrf2/ARE蛋白预测近期预后的AUC比较,差异无统计学意义(Z/P=0.102/0.563)。结论ACI患者外周血Keap1⁃Nrf2/ARE信号通路变化与神经功能缺损程度、近远期预后显著相关,可从相关蛋白含量变化的角度有效预测近远期预后情况。

关键词：脑梗死,急性 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白⁃1 核因子E2相关因子2 抗氧化反应元件预后

苦菊提取物对HepG2细胞的抗氧化作用及其机制研究

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中国中药杂志 2014年第14期39卷 2716-2720页

作者：陈超杰展丽娟魏金锋靳洪涛秦海林王爱平福建医科大学福建省新药安全性评价中心福建福州350108 中国医学科学院北京协和医学院新药安全评价研究中心北京100050 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心、阜外心血管病医院、中国牛津国际医学研究中心心血管疾病国家重点实验室北京100037 北京协和建昊医药技术开发有限责任公司北京100176 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100050

目的:考察苦菊提取物(CEE)对H2O2致HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用,并探讨苦菊提取物在HepG2细胞中抗氧化作用机制。方法:通过MTT法和DCFH-DA荧光染色,检测H2O2处理HepG2细胞的活性和胞内ROS水平;在抗氧化反应元件(ARE)报告基因转染... 详细信息

目的:考察苦菊提取物(CEE)对H2O2致HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用,并探讨苦菊提取物在HepG2细胞中抗氧化作用机制。方法:通过MTT法和DCFH-DA荧光染色,检测H2O2处理HepG2细胞的活性和胞内ROS水平;在抗氧化反应元件(ARE)报告基因转染稳定的HepG2细胞内检测ARE-Luciferase活性;并通过荧光定量RT-PCR测定HepG2细胞内含有ARE序列相关基因的mRNA表达水平。结果:H2O2处理HepG2细胞后,细胞存活率下降,胞内ROS水平上升,而加入不同浓度的CEE则可明显改善上述结果。不同浓度的CEE处理转染ARE报告基因的HepG2细胞,可使细胞内的ARE活性呈浓度依赖性增强。此外,CEE可使HepG2细胞中含ARE序列的调控基因GCLC,GCLM和HMOX-1的mRNA表达水平上调,并呈浓度依赖性。结论:CEE通过降低ROS水平,抑制H2O2诱导的HepG2细胞损伤,而CEE对HepG2细胞的抗氧化保护作用机制可能与其激活HepG2细胞内Nrf2-ARE通路相关的抗氧化防御系统密切相关。

关键词：苦菊活性氧抗氧化反应元件肝保护

雷公藤内酯醇调控Nrf2/ARE通路对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响

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新疆医科大学学报 2022年第11期45卷 1274-1282页

作者：熊纭辉邓海华王娟深圳市宝安区福永人民医院心血管内科广东深圳518101 桂林医学院药学院广西桂林541199

目的探究雷公藤内酯醇(TPL)调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌纤维化的影响。方法取Wistar大鼠采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立AMI大鼠模型,分为假手术组、模型组、TPL低剂量(25... 详细信息

目的探究雷公藤内酯醇(TPL)调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌纤维化的影响。方法取Wistar大鼠采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立AMI大鼠模型,分为假手术组、模型组、TPL低剂量(25μg/kg)组、TPL高剂量(50μg/kg)组、Nrf2抑制剂(7 mg/kg)组、TPL(50μg/kg)+Nrf2抑制剂(7 mg/kg)组,每组12只。给予相应的药物干预4周后,超声检测大鼠左心室功能;试剂盒法测血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;TTC法检测心肌梗死面积;透射电子显微镜观察心肌细胞结构损伤;Masson染色观察心肌组织纤维化变化;免疫组织化学法检测心肌组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性表达;DHE荧光探针法检测心肌组织活性氧(ROS)水平;Western Blon检测心肌组织Nrf2及下游炎症、氧化应激、纤维化相关蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠LVESD、LVEDd、血清CK-MB、GOT、LDH、cTnI水平、心肌梗死面积、胶原容积分数、α-SMA阳性表达、ROS荧光强度、HO-1、SOD2、GPx、NLRP3、IL-6、IL-1β、Nrf2、TGF-β1、(p-Smad2/3)/(Smad2/3)、COL-Ⅰ蛋白表达升高,FS降低,差异有统计学意义(P抗氧化、抗炎反应途径,改善AMI大鼠心肌坏死及纤维化。

关键词：雷公藤内酯醇心肌梗死核因子E2相关因子2 抗氧化反应元件纤维化

运动训练对缺血性脑卒中大鼠认知障碍的改善作用及机制研究

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中西医结合心脑血管病杂志 2022年第9期20卷 1583-1587,1593页

作者：赵幸娜李和平郭景花郑州大学第一附属医院郑州450000

目的观察运动训练对缺血性脑卒中大鼠认知障碍的改善作用,并探讨其作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和运动组,每组10只。除假手术组外,其余两组采用线栓法构建大鼠缺血性脑卒中模型。术后24 h,运动组大鼠进行跑台... 详细信息

目的观察运动训练对缺血性脑卒中大鼠认知障碍的改善作用,并探讨其作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和运动组,每组10只。除假手术组外,其余两组采用线栓法构建大鼠缺血性脑卒中模型。术后24 h,运动组大鼠进行跑台训练,每天30 min,假手术组和模型组大鼠不进行跑台训练。8周后,采用Morris水迷宫实验检测运动训练对大鼠空间学习记忆能力的影响;腹主动脉取血,检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测大鼠海马中NF-E2相关因子2(Nrf2)、抗氧化反应元件(ARE)、乙二醛酶(Glo-1)表达水平。结果 Morris水迷宫实验结果显示,模型组逃避潜伏期明显长于假手术组(P0.05),ARE、Glo-1蛋白表达水平降低(P抗氧化能力,其作用机制与增加Nrf2、ARE和Glo-1蛋白表达有关。

关键词：脑卒中运动训练认知障碍 NF-E2相关因子2 抗氧化反应元件乙二醛酶实验研究