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过表达LaeA激活海洋土曲霉中isoflavipucine类化合物的合成及其抗弧菌活性研究

菌物学报 2023年第2期42卷 562-569页

作者：章冰心温帅秦雪怡王宗华姚光山闽江学院地理与海洋学院福建福州350108 福州海洋研究院福建福州350108

丝状真菌土曲霉因产生结构独特且药理活性强烈的次级代谢产物而受到真菌学家和药学家的广泛关注。然而,在丝状真菌中,大部分次级代谢基因在常规实验室培养条件下表达量较低甚至沉默。本研究通过过表达全局性调控因子LaeA试图激活一株海... 详细信息

丝状真菌土曲霉因产生结构独特且药理活性强烈的次级代谢产物而受到真菌学家和药学家的广泛关注。然而,在丝状真菌中,大部分次级代谢基因在常规实验室培养条件下表达量较低甚至沉默。本研究通过过表达全局性调控因子LaeA试图激活一株海洋来源土曲霉中的沉默基因簇以发现新次级代谢产物。结果表明,laeA基因过表达突变中未知产物基因簇被激活,指纹图谱分析发现了2个在野生菌株不存在的化合物吸收峰。质谱和核磁共振波谱分析确证了这2个化合物为dihydroisoflavipucine类小分子,特别是化合物1的产量在突变体中高达183 mg/L。此外,抗菌活性测试发现,这2个化合物对4种病原弧菌显示了强烈的活性,特别是化合物1抗弧菌活性更强,MIC低至16μg/mL。本研究提供了一条大量合成dihydroisoflavipucine类抗生素的新路线,并证明了次级代谢调控因子LaeA在丝状真菌中的功能是高度保守的,过表达LaeA是激活丝状真菌中沉默基因簇的有效手段。

关键词：海洋真菌土曲霉次级代谢调控因子LaeA dihydroisoflavipucine 抗弧菌活性

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蜡样芽孢杆菌BWL-001代谢产物及抗弧菌活性研究

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广西科学 2023年第4期30卷 713-718页

作者：何佳利甘雨满白猛高程海张文飞王锐萍海南师范大学生命科学学院海南海口571158 海南师范大学热带岛屿生态学教育部重点实验室海南海口571158 广西中医药大学海洋药物研究院广西南宁530200 广西中医药大学广西海洋药物重点实验室广西南宁530200

本研究旨在从1株海南霸王岭热带雨林土壤来源的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus) BWL-001中挖掘抗海洋弧菌(Vibrio)的活性代谢产物,采用多种现代色谱分离方法对菌株提取物进行分离纯化,通过核磁共振波谱解析确定单体化合物结构,并结合96... 详细信息

本研究旨在从1株海南霸王岭热带雨林土壤来源的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus) BWL-001中挖掘抗海洋弧菌(Vibrio)的活性代谢产物,采用多种现代色谱分离方法对菌株提取物进行分离纯化,通过核磁共振波谱解析确定单体化合物结构,并结合96孔板微量稀释法进行抗弧菌活性测试。结果显示,从该菌株LB培养基发酵产物中分离鉴定出10个单体化合物,包括4个二酮哌嗪类化合物(1-4)、3个吲哚生物碱衍生物(6-8)以及3个其他类化合物(5、9和10),分别命名为3-异丁基吡咯并哌嗪-2,5-二酮(1)、cyclo-(Pro-lle)(2)、maculosin (3)、trans-cyclo-(Pro-Phe)(4)、anthranilic acid (5)、indole-3-meth-ylethanoate (6)、indole-3-acetic acid (7),nb-acetyltryptamine (8)、thymine (9)、acetamide (10)。其中,化合物6-8对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)有弱的抑制活性,其最小抑菌浓度(Minimal Inhibit Concentration, MIC)值均为12.5μg/mL。本研究丰富了海南霸王岭热带雨林土壤来源的蜡样芽孢杆菌代谢产物多样性,并为抗弧菌活性先导化合物的发现提供理论基础。

关键词：霸王岭热带雨林土壤蜡样芽孢杆菌代谢产物抗弧菌活性

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南海土著抗菌乳酸菌的筛选及其在水产养殖中的应用潜力评估

南海土著抗菌乳酸菌的筛选及其在水产养殖中的应用潜力评估

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作者：许伟华华南农业大学

学位级别：硕士

乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)具有防控疾病、改善水产动物肠道环境等多种作用,是当前在水产养殖业中应用最广泛的益生菌种属之一。但目前在水产养殖中,乳酸菌面临着水生来源乳酸菌资源短缺等问题。我国南海海洋微生物资源丰富,是... 详细信息

乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)具有防控疾病、改善水产动物肠道环境等多种作用,是当前在水产养殖业中应用最广泛的益生菌种属之一。但目前在水产养殖中,乳酸菌面临着水生来源乳酸菌资源短缺等问题。我国南海海洋微生物资源丰富,是寻找乳酸菌新种的重要来源。因此本研究拟从南海水域环境及其水生动物中分离鉴定乳酸菌,测定其生物学活性、安全有效性和抗弧菌效果,旨在为今后开发适用于水产养殖的乳酸菌微生态调节剂提供实验依据。主要研究结果如下:1.从江门市、珠海市和广州市海鸥岛水域环境以及水生动物的鳃、肌肉、肝胰脏和肠道中分离、鉴定和筛选得到62株乳酸菌,通过菌株分类和来源不同选出28株乳酸菌开展生物学活性测试,并从中筛选出具有较强活性以及进化分支上具有代表性的3株菌株L43(Weissella hellenica)、L75a(Lactiplantibacillus plantarum)和L80(Lactococcus lactis)。2.安全有效性评估结果显示:菌株L43、L75a和L80均无溶血性,且具备形成生物膜能力;菌株L43对红霉素、四环素表现出耐药性和对青霉素、万古霉素表现出敏感性,菌株L75a对红霉素、青霉素、四环素表现出敏感性以及对万古霉素表现出耐药性,菌株L80对上述四种抗生素均无耐药性;菌株L43、L75a对胆盐的耐受能力为0%～3%,而菌株L80为0%～1.5%;菌株L43、L75a并未对鲤鱼上皮细胞产生毒性,而菌株L80在细胞浓度为10～8cells/m L时对鲤鱼上皮细胞产生毒性;添加0.1‰、1‰的L43、L75a和L80发酵液浸泡凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)对其存活率无显著影响(P>0.05),但L80使对虾存活率有下降趋势。由此可得,菌株L80的使用存在安全隐患,菌株L43、L75a具备成为益生菌的潜能。3.含量为1%、2%的L75a发酵液上清液以及1%的L80发酵液上清液对Vibrio campbellii BB120生物发光有显著的抑制效果(P弧菌能够利用饲料中营养成分快速增殖,植物乳杆菌L75a发酵液能够显著抑制饲料中哈维氏弧菌的增殖(P弧菌处理饲料、哈维氏弧菌和植物乳杆菌混合饲料分别饲喂凡纳滨对虾,4天后,饲喂哈维氏弧菌处理饲料组的对虾出现肌肉白浊坏死,而饲喂混合饲料组无此现象,通过细菌群落组成分析发现,饲喂混合饲料组的对虾肌肉中霍乱弧菌(***)、创伤弧菌(***)、食油假单胞菌(Pseudomonas oleovorans)丰度低于处理组。综上所述,1)本研究分离筛选出62株南海土著乳酸菌,并测定了具有代表性的28株乳酸菌的生物学活性,对确定南海水域乳酸菌的地域分布、物种类型和生物学活性具备重要的意义;2)筛选出了一株生物活性强、安全有效、对*** BB120生物发光及生长有显著抑制作用和对哈维氏弧菌感染凡纳滨对虾具有防治作用的植物乳杆菌L75a,为今后开发适用于水产养殖的南海土著乳酸菌微生态调节剂奠定了重要基础。

关键词：乳酸菌分离鉴定生物学活性安全有效性抗弧菌活性

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