检索结果-南通市图书馆

刺苋花粉泛过敏原Profilin的抗原性评估与三级结构分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2008年第7期28卷 616-620页

作者：陶爱林刘林川王永飞邹泽红马三梅赖荷于陆伍秋容广州医学院第二附属医院变态反应科 510260 暨南大学生命科学技术学院工程学系

目的克隆刺苋花粉中Profilin蛋白基因，分析同源序列中不同性质氨基酸对抗原性及三级结构的贡献。方法基于生物信息学分析已知泛过敏原Profilin的氨基酸序列并获得核心代表序列，以之为基础设计合成引物，采用Touchdown PCR技术从刺苋... 详细信息

目的克隆刺苋花粉中Profilin蛋白基因，分析同源序列中不同性质氨基酸对抗原性及三级结构的贡献。方法基于生物信息学分析已知泛过敏原Profilin的氨基酸序列并获得核心代表序列，以之为基础设计合成引物，采用Touchdown PCR技术从刺苋花粉的eDNA池中进行基因克隆，并经菌落PCR和双酶切验证；采用生物信息学软件MULTIPRED及SWISS-MODEL在线软件对所得基因编码蛋白进行抗原性评估及三级结构模拟。结果从刺苋中获得两个序列不同的泛过敏原基因，分别命名为PRF7和PRF23。蛋白质三级结构显示：PRF7与已知的泛过敏原Profilin存在少数氨基酸的差异，其空间结构与抗原性没有明显变化；而PRF23与北方豚草花粉泛过敏原Q64LH0之间相似程度较低，而空间结构也呈现明显的差异；尽管Q64LH0与PRF23的全序列抗原性均值差异无统计学意义，受一些区段上不同性质的氨基酸改变的影响，PRF23在这些区段上的抗原性显著低于Q64LH0的抗原性。结论基于Q64LH0和PRF23同源氨基酸序列的抗原性评估及三级结构分析，获得了不同性质氨基酸对抗原性及三级结构的贡献等信息，映射了南方花粉过敏症发生率较低的原因所在，也为过敏原遗传改良过程中进行氨基酸置换指明了方向。

关键词：刺苋泛过敏原三级结构抗原性氨基酸置换

4型戊型肝炎病毒ORF2多肽的二聚体特性和抗原性特征

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2008年第11期28卷 993-997页

作者：潘金顺庄辉吴超周锦勇唐勤周乙华南京大学医学院附属鼓楼医院检验科 210008 南京大学医学院附属鼓楼医院感染科 210008 北京大学医学部病原生物学系南京大学江苏省医学分子技术重点实验室

目的研究4型戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）开放阅读框架2（open reading frame2，ORF2）编码的多肽二聚体特性和抗原性特征。方法从患者血清克隆HEV ORF2基因，在大肠杆菌中表达不同长度的ORF2多肽，并表达点突变多肽，纯化后... 详细信息

目的研究4型戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）开放阅读框架2（open reading frame2，ORF2）编码的多肽二聚体特性和抗原性特征。方法从患者血清克隆HEV ORF2基因，在大肠杆菌中表达不同长度的ORF2多肽，并表达点突变多肽，纯化后在SDS—PAGE不同条件下分析二聚体特性，同时用Western blot分析其抗原性特征。结果由459～607位氨基酸构成的ORF2多肽能形成二聚体，而在氨基端截短13个氨基酸或在羧基端截短13个氨基酸均不形成二聚体，562位天冬酰胺、595位异亮氨酸分别突变后在SDS作用下仅以单体存在。Western blot显示，抗-HEV仅与二聚体的ORF2多肽反应，而不与单体ORF2多肽或截短肽反应。结论4型HEV ORF2多肽形成二聚体必须含有459—607位氨基酸，其中562位和595位氨基酸突变能影响二聚体的稳定性。该多肽的抗原性取决于二聚体结构。

关键词：戊型肝炎病毒 ORF2多肽二聚体抗原性点突变

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

1型与4型戊型肝炎病毒ORF2抗原性比较

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第3期26卷 210-214页

作者：何鹏张华远王佑春李卓中国药品生物制品检定所北京100050

目的比较1型和4型HEVORF2抗原性的差异。方法对1型和4型ORF2同样位置各3个抗原片段分别进行表达,1型ORF2的3个重叠抗原以从N端到C端的顺序编号为1pET1、1pET2和1pET3;同样4型3个片段的编号为4pET1、4pET2和4pET3。用纯化后的各抗原片段... 详细信息

目的比较1型和4型HEVORF2抗原性的差异。方法对1型和4型ORF2同样位置各3个抗原片段分别进行表达,1型ORF2的3个重叠抗原以从N端到C端的顺序编号为1pET1、1pET2和1pET3;同样4型3个片段的编号为4pET1、4pET2和4pET3。用纯化后的各抗原片段分别建立酶联免疫检测方法检测临床肝炎病人血清136份,对检测结果进行统计分析。结果对6个抗原片段成功地进行了表达,纯化后6个抗原片段的纯度在95%以上。通过检测136份临床肝炎病人血清,显示1型抗原中3个抗原片段均存在抗原性差异,4型病毒ORF2中间的抗原片段与C端和N端抗原片段存在抗原性差异,1型和4型病毒之间N端抗原存在抗原性差异,具有统计学意义。结论1型和4型HEVORF2N端重组蛋白之间存在抗原性差异。

关键词：戊型肝炎病毒克隆表达抗原性

乙型肝炎病毒表面抗原突变体稳定表达细胞系的建立和抗原性鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验和临床病毒学杂志 2004年第1期18卷 47-50页

作者：王战会齐义鹏林裕龙骆抗先侯金林武汉大学生命科学学院同和南方医院感染内科

目的　探讨乙型肝炎 (乙肝 )病毒 (HBV)表面抗原 (HBsAg)阴性HBV感染的分子机制。方法　在对 4 6例HBsAg阴性但血清HBVDNA阳性感染者的S基因序列进行分析的基础上 ,构建了 6株新的HBsAg变异株 (4株联合点突变株 ,2株插入变异株 )的EBO p... 详细信息

目的　探讨乙型肝炎 (乙肝 )病毒 (HBV)表面抗原 (HBsAg)阴性HBV感染的分子机制。方法　在对 4 6例HBsAg阴性但血清HBVDNA阳性感染者的S基因序列进行分析的基础上 ,构建了 6株新的HBsAg变异株 (4株联合点突变株 ,2株插入变异株 )的EBO plpp真核表达载体 ,并转染了COS7细胞 ,建立了这 6株HBsAg变异株的稳定表达细胞系。分别用酶联免疫法 (ELISA)和放射免疫法(RIA)对细胞表达的HBsAg抗原性进行检测。结果　除 1例插入变异株可检测到较弱的阳性外 ,其余5株均检测不到HBsAg的存在。结论　新发现的HBsAg联合点突变和氨基酸插入变异 ,均对HBsAg的抗原性有负面的影响 ,是造成HBsAg阴性HBV感染的直接原因。

关键词：乙型肝炎病毒表面抗原基因突变细胞系抗原性鉴定分子机制

卡波济肉瘤相关疱疹病毒包膜糖蛋白gpK8．1的抗原性与免疫原性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2007年第10期27卷 934-937页

作者：姚水洪卢春张玲汤巧衢州学院医学系 324000 南京医科大学微生物学与免疫学系 210029

目的表达并纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白gpK8.1,分析其抗原性和免疫原性。方法异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组大肠杆菌表达KSHV gpK8.1,用KSHV病人阳性血清作为抗体,经EL... 详细信息

目的表达并纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白gpK8.1,分析其抗原性和免疫原性。方法异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组大肠杆菌表达KSHV gpK8.1,用KSHV病人阳性血清作为抗体,经ELISA和Western blot检测其抗原性;用纯化的gpK8.1蛋白免疫新西兰兔,观察诱发抗体产生的时间及其效价,并用Western blot检测兔抗gpK8.1多克隆抗体特异性识别重组与天然gpK8.1抗原的能力,评价其免疫原性。结果ELISA和Western blot证实3份KSHV阳性血清均能识别重组gpK8.1蛋白;重组gpK8.1蛋白免疫动物6周后,兔血清多克隆抗体效价达到105。结论高效表达并纯化的gpK8.1蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,为KSHV检测试剂和疫苗研究提供了基础资料。

关键词：卡波济肉瘤相关疱疹病毒包膜糖蛋白gpK8.1 抗原性免疫原性

丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶抗原性分析及特异性抗体制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2002年第4期22卷 393-397页

作者：杜桂鑫刘树玲侯利华陈万荣王海涛军事医学科学院微生物流行病研究所应用分子生物学实验室北京100071

目的　分析丙型肝炎病毒 (HCV)丝氨酸蛋白酶的抗原性并制备特异性抗体。方法　构建表达质粒并且在大肠杆菌中可溶性表达单链型丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶 ;以纯化后的重组蛋白包被酶联板对 86份献血员和 12份健康人血清中的特异性抗体进... 详细信息

目的　分析丙型肝炎病毒 (HCV)丝氨酸蛋白酶的抗原性并制备特异性抗体。方法　构建表达质粒并且在大肠杆菌中可溶性表达单链型丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶 ;以纯化后的重组蛋白包被酶联板对 86份献血员和 12份健康人血清中的特异性抗体进行检测 ;将纯化蛋白偶联到Sepha rose 4B上制备亲和纯化柱 ,对丙肝病毒感染者血清中的特异性抗体进行亲和纯化 ;以纯化蛋白免疫小鼠 ,制备特异性单克隆抗体 ,对纯化后的人多抗和鼠单抗进行鉴定。结果　以纯化的重组单链丝氨酸蛋白酶为抗原检测 98份血清 ,结果阳性率为 73.9%,商品试剂盒漏检的 1份血清中也检测出特异性抗体。用重组蛋白从 2 0 0mlHCV感染者血清中亲和纯化到 4.5 7mg多克隆抗体 ,效价达 10 7,特异性很好。制备的 4株IgG类鼠单抗 ,无交叉反应 ,能够被人血清抗体竞争性抑制。结论　表达的HCV丝氨酸蛋白酶具有良好的抗原性 ,在HCV感染人群中该区域抗体的阳性率较高 ,制备了特异性很好的多克隆抗体和单克隆抗体。

关键词：抗体制备丙型肝炎病毒抗原性单克隆抗体丝氨酸蛋白酶 HCV 丙型肝炎

我国登革2型病毒43株包膜E蛋白MBP-B165抗原性的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2001年第3期21卷 321-323页

作者：仝莉莉秦鄂德杨佩英李同据于曼欧武军事医学科学院微生物学流行病学研究所北京100071

目的　通过对我国登革 2型病毒株包膜E蛋白包括B区在内的第 2 6 7～ 432氨基酸编码基因片段的表达 ,研究MBP B16 5蛋白的抗原性。方法　首先采用PCR方法扩增了编码B16 5蛋白的基因片段 ,并将其插入到pMal C2原核载体进行融合表达。采用... 详细信息

目的　通过对我国登革 2型病毒株包膜E蛋白包括B区在内的第 2 6 7～ 432氨基酸编码基因片段的表达 ,研究MBP B16 5蛋白的抗原性。方法　首先采用PCR方法扩增了编码B16 5蛋白的基因片段 ,并将其插入到pMal C2原核载体进行融合表达。采用蛋白印迹和ELISA法对表达产物进行特异性鉴定。用表达的融合蛋白MBP B16 5免疫大白兔 ,并通过ELISA法检测兔免疫血清中登革2型病毒特异的抗体。结果　表达的融合蛋白MBP B16 5可与我国登革 2型病毒株抗体特异结合 ,而且与登革 1、3和 4型病毒参考株的多克隆抗体均具有较高的反应性。用表达蛋白免疫大白兔可产生针对我国登革 2型病毒株E蛋白的特异抗体 ,并且该抗体与其他 3个型病毒参考株有交叉反应。结论　我国登革 2型病毒 43株E蛋白包括B区在内的第 2 6 7～ 432氨基酸序列具有一定的抗原性 ,而且具有黄病毒亚组特异的反应性表位 ,即 4个型登革病毒的结构保守性表位。

关键词：登革病毒 E基因B区基因表达抗原性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人造血液基质聚合牛血红蛋白的抗原性研究

中华微生物学和免疫学杂志 2001年第2期21卷 138-142页

作者：王鹤尧郑文婕陈琳卜凤荣马立人首都医科大学附属北京朝阳医院药剂科首都医科大学附属北京朝阳医院基础中心首都医科大学军事医学科学院野战输血研究所

目的　通过动物实验 ,推导人造血液基质聚合牛血红蛋白 (poly BHb)输入人体后可能引起的免疫反应。方法　制备兔抗人Hb、兔Hb和poly BHb的抗体 ,研究对兔而言这 3种Hb的抗原性的强弱和它们之间抗原性的交叉程度。将大量poly BHb溶液输... 详细信息

目的　通过动物实验 ,推导人造血液基质聚合牛血红蛋白 (poly BHb)输入人体后可能引起的免疫反应。方法　制备兔抗人Hb、兔Hb和poly BHb的抗体 ,研究对兔而言这 3种Hb的抗原性的强弱和它们之间抗原性的交叉程度。将大量poly BHb溶液输入家兔体内 ,观察家兔的免疫反应。通过计算机模拟 ,比较天然人、兔、牛Hb之间氨基酸序列、空间结构和抗原位点的差异。结果　天然牛Hb与人Hb分子的构象几乎一致 ,poly BHb与人Hb有高度相似的抗原性。poly BHb反复大量输入家兔体内未能测出抗体。结论　从结果初步推论 ,poly BHb溶液有限次数输入人体 ,引起免疫反应的可能性较小 ,但尚需要更多的试验及人体安全性试验加以证实。

关键词：血液替代品聚合牛血红蛋白抗原性免疫反应人造血液

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高静压协同酶法处理对白果蛋白抗原性的影响

现代食品科技 2016年第8期32卷 219-224,283页

作者：周昊王成章曹福亮叶建中李文君陈虹霞陶冉中国林业科学研究院林产化学工业研究所江苏南京210042 南京林业大学林学院江苏南京210037

本文研究了高静压结合酶解处理对白果蛋白抗原性的影响,分别采用4种蛋白酶水解白果蛋白,水解前分别采用不同压力的高静压对白果蛋白进行预处理,酶解产物水解率和分子量采用OPA法和SDS-PAGE测定,致敏性采用western-blotting和ELISA法测... 详细信息

本文研究了高静压结合酶解处理对白果蛋白抗原性的影响,分别采用4种蛋白酶水解白果蛋白,水解前分别采用不同压力的高静压对白果蛋白进行预处理,酶解产物水解率和分子量采用OPA法和SDS-PAGE测定,致敏性采用western-blotting和ELISA法测定。结果表明,木瓜蛋白酶,碱性蛋白酶或胃蛋白酶为水解酶时,高静压能显著提高白果蛋白的水解率和降低其致敏性;而中性蛋白酶为水解酶时,白果蛋白的水解和脱敏效果很差,即使高压处理也未见明显提高。木瓜蛋白酶或碱性蛋白酶在处理压力为300 MPa时,而胃蛋白酶在400 MPa时,其水解和脱敏效果最好,在此条件下白果蛋白能被水解为分子量小于15 ku的多肽,95%以上的白果蛋白致敏性能被消除,酶解产物中致敏蛋白条带全部消失。因此,高静压处理能明显提高蛋白酶对白果蛋白的水解效率和脱敏效果,但是取决于选择的蛋白酶种类和处理压力的大小。

关键词：白果蛋白酶解高静压处理抗原性