检索结果-南通市图书馆

大豆蛋白-葡萄糖复合物的抗原性及结构特性研究

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现代食品科技 2014年第11期30卷 28-33页

作者：布冠好朱婷伟陈复生河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001

大豆是优质的植物蛋白资源,同时也是八大食物过敏原之一;糖基化改性是降低蛋白质过敏原的有效方法之一。本文以大豆分离蛋白和葡萄糖为原料,在蛋白与糖不同质量比、不同温度、不同时间条件下进行美拉德反应,制取糖基化复合物;并以β-伴... 详细信息

大豆是优质的植物蛋白资源,同时也是八大食物过敏原之一;糖基化改性是降低蛋白质过敏原的有效方法之一。本文以大豆分离蛋白和葡萄糖为原料,在蛋白与糖不同质量比、不同温度、不同时间条件下进行美拉德反应,制取糖基化复合物;并以β-伴大豆球蛋白抗原抑制率为指标,采用间接竞争ELISA方法检测糖基化复合物抗原性的变化。发现在温度55℃、蛋白与糖比例为3:1时,制备的糖基化复合物抗原性较低;当反应时间为72 h时,抗原抑制率从93.54%降低到22.58%。同时,通过三硝基苯磺酸(TNBS)法、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证明了美拉德反应的发生;紫外光扫描、傅里叶红外光谱分析等方法研究了蛋白质结构的变化。这些基础研究可能为探究糖基化修饰对抗原性影响的作用机理、开发低敏性大豆蛋白制品提供研究方法和理论依据。

关键词：大豆分离蛋白葡萄糖糖基化抗原性结构特性

具抗原性和简化Holling-Ⅳ型发生率肿瘤与免疫系统的定性分析

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南华大学学报（自然科学版） 2022年第5期36卷 64-70页

作者：贺芳芳朱惠延林晋章南华大学数理学院湖南衡阳421001

对一类具抗原性和简化Holling-Ⅳ型肿瘤与免疫系统的动力学模型进行了研究,得到了模型有瘤平衡点的存在性,并分析了各平衡点的局部动力学性质。研究表明,该模型在一定条件下会出现双稳定现象,即肿瘤增长的最终结果依赖于其初始状态。

关键词：抗原性简化Holling-Ⅳ型肿瘤与免疫系统双稳定

幽门螺杆菌CagA基因的原核表达及抗原性测定

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中南大学学报（医学版） 2010年第8期35卷 847-853页

作者：陈雄徐灿霞王芬沈守荣贾燕中南大学湘雅三医院消化内科长沙410013

目的:合成胃癌相关幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)的CagA基因片段,建立原核表达系统,鉴定重组表达产物的抗原性。方法:选取前期研究确定的与胃癌相关的*** CagA基因片段,优化设计并合成CagA基因,将合成的CagA基因从pUC57-CagA质... 详细信息

目的:合成胃癌相关幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)的CagA基因片段,建立原核表达系统,鉴定重组表达产物的抗原性。方法:选取前期研究确定的与胃癌相关的*** CagA基因片段,优化设计并合成CagA基因,将合成的CagA基因从pUC57-CagA质粒中切出,用表达载体pET32a携带该基因转化宿主菌BL21(DE3),通过氨苄青霉素抗性筛选和菌落PCR挑选出阳性克隆pET32a-Ca-gA;以IPTG诱导含pET32a-CagA的宿主菌表达融合蛋白,经SDS-PAGE凝胶电泳分析CagA蛋白表达情况,用Western印迹鉴定融合蛋白的抗原性。结果:设计并人工合成了CagA基因片段,序列测定结果显示,合成的CagA基因序列与设计的序列(AF289435)基本一致;成功构建pET32a-CagA原核表达质粒,对应蛋白序列与AAG09884同源性为100%;含pET32a-CagA的BL21(DE3)宿主菌经IPTG诱导后能表达CagA融合蛋白,经SDS-PAGE凝胶电泳分析结果表明,融合蛋白相对分子质量大小与预期一致(45 kD);Western印迹检测结果显示该融合蛋白可与抗***全菌抗体结合反应。结论:本实验构建的原核表达系统表达的CagA融合蛋白具有良好的抗原性,为临床胃癌相关***菌株的筛选和针对性治疗奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌 CagA基因原核表达抗原性

兔多杀性巴氏杆菌C51-3株黏附蛋白的表达、纯化及其抗原性检测

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生物工程学报 2008年第8期24卷 1446-1453页

作者：吾鲁木汗.那孜尔别克严芳何翠张磊恩特马克.布拉提白吉首大学生物资源与环境科学学院省部共建生物工程实验室吉首416000

应用PCR从兔多杀性巴氏杆菌C51-3株基因组DNA中扩增出编码36kD黏附蛋白的cp36基因，将其克隆到pMD18-T载体并对插入片段进行测序。以重组质粒pMD18-cp36为模板，用PCR扩增得到编码信号肽除外的成熟黏附蛋白基因cpm36，并克隆到原核表达... 详细信息

应用PCR从兔多杀性巴氏杆菌C51-3株基因组DNA中扩增出编码36kD黏附蛋白的cp36基因，将其克隆到pMD18-T载体并对插入片段进行测序。以重组质粒pMD18-cp36为模板，用PCR扩增得到编码信号肽除外的成熟黏附蛋白基因cpm36，并克隆到原核表达质粒pQE30中，得到重组质粒pQE30-cpm36，转化大肠杆菌M15，在IPTG诱导下表达融合蛋白CPM36，经Ni^2＋-NTA亲和层析纯化。DNA测序结果表明cp36基因片段大小为1032bp，与已报道的16个血清型多杀性巴氏杆菌cp36基因的核苷酸序列比较，同源性在76．9％～100％之间。SDS-PAGE结果显示，表达分子量约为37kD的带有6xHis标签的CPM36蛋白，与预期分子量相符。Western blotting结果表明，抗重组蛋白抗体分别能与CPM36蛋白和多杀性巴氏杆菌36kD蛋白发生特异性反应，证明原核表达蛋白具有抗原性，为进一步开展多杀性巴氏杆菌免疫保护性抗原的研究奠定了基础。

关键词：兔多杀性巴氏杆菌黏附蛋白 CPM36 原核表达抗原性

茶多酚对牛乳过敏原α_(s1)-酪蛋白构象和抗原性的影响

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乳业科学与技术 2022年第4期45卷 7-13页

作者：郭红蕾周胜云丛艳君闫文杰北京工商大学食品与健康学院北京食品营养与人类健康高精尖创新中心北京市食品添加剂工程技术研究中心北京100048 北京联合大学生物化学工程学院北京100023

为探明茶多酚对α_(s1)-酪蛋白构象和抗原性的影响,选用茶多酚中活性较强的表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC)接枝α_(s1)-酪蛋白。通过荧光光谱、同步荧光光谱和圆二色... 详细信息

为探明茶多酚对α_(s1)-酪蛋白构象和抗原性的影响,选用茶多酚中活性较强的表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC)接枝α_(s1)-酪蛋白。通过荧光光谱、同步荧光光谱和圆二色谱研究α_(s1)-酪蛋白构象变化,通过间接竞争酶联免疫方法、免疫印迹实验分析α_(s1)-酪蛋白抗原性变化。结果表明:EGC、EGCG均对α_(s1)-酪蛋白内部荧光有猝灭作用,对α_(s1)-酪蛋白的酪氨酸(tyrosine,Tyr)和色氨酸(tryptophan,Trp)残基均有影响,α_(s1)-酪蛋白的α-螺旋和β-折叠含量略有增加,无规卷曲含量略有降低;α_(s1)-酪蛋白构象的变化导致其抗原性显著降低,EGCG对α_(s1)-酪蛋白构象和抗原性的影响显著强于EGC。

关键词： α_(s1)-酪蛋白表没食子儿茶素没食子酸酯表没食子儿茶素构象抗原性

庚型肝炎病毒E2区cDNA在毕赤酵母中的表达及抗原性鉴定

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生物工程学报 2002年第2期18卷 187-192页

作者：王卓华叶凯徐洪马辉文童立恒彭习亮武汉大学药学院生物技术药学系武汉430072 武汉市生物技术研究开发中心武汉430030

利用PCR技术 ,从含有庚型肝炎病毒 (GBV C HGV)包膜蛋白E2cDNA(5 5 9bp)的质粒pGEX E2中 ,扩增得到能够编码日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶 (GST)和GBV C HGV包膜蛋白E2的融合基因片段。将此长度为 132 4bp的DNA片段插入到酵母表达载体pPI... 详细信息

利用PCR技术 ,从含有庚型肝炎病毒 (GBV C HGV)包膜蛋白E2cDNA(5 5 9bp)的质粒pGEX E2中 ,扩增得到能够编码日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶 (GST)和GBV C HGV包膜蛋白E2的融合基因片段。将此长度为 132 4bp的DNA片段插入到酵母表达载体pPIC9K中 ,使之位于α 因子信号肽下游 ,且与之同框。通过电激转化将构建的重组表达质粒pPIC9K GST E2插入到PichiapastorisGS115菌株染色体中。筛选His+Muts 表型的转化子 ,震荡培养 ,用0 5 %甲醇诱导表达 5d后 ,在培养液中得到表达的GST E2融合蛋白。经过表达条件的优化 ,GST E2蛋白可占培养液中总蛋白的 5 0 %。通过谷胱甘肽亲和层析柱纯化 ,GST E2融合蛋白的纯度可达 95 %左右。以庚型肝炎病人血清为探针 ,进行免疫印迹及ELISA实验。

关键词：庚型肝炎病毒 E2膜蛋白巴斯德毕赤氏酵母表达抗原性鉴定

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乙型肝炎表面抗原主要亲水区Ⅱ的抗原性

中华肝脏病杂志 2007年第2期15卷 92-97页

作者：田拥军张正茂夏昶刘慎沛余源黄红平杨燕陆蒙吉杨东亮华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心武汉430030 华中科技大学同济医学院病原生物系武汉430030

目的研究HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸变异对HBsAg抗原性的影响。方法定点突变HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸对应的s基因（P120T、C121S、K122I和T123N），构建4个真核表达重组质粒。用重组质粒和表达G145RHBsAg质粒体外瞬时转染HepG2... 详细信息

目的研究HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸变异对HBsAg抗原性的影响。方法定点突变HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸对应的s基因（P120T、C121S、K122I和T123N），构建4个真核表达重组质粒。用重组质粒和表达G145RHBsAg质粒体外瞬时转染HepG2细胞。4种抗体和7种国产HBsAgELISA诊断试剂盒检测转染细胞上清液和细胞裂解液中变异HBsAg的免疫反应性，免疫荧光检测单克隆抗体与转染细胞内变异HBsAg的免疫反应性。结果成功构建了表达HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸变异的重组质粒，P120T、C121S、K122I和T123N变异HBsAg的免疫反应性比野生HBsAg低，T123N变异导致HBsAg存在分泌障碍。结论HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸对维持HBsAg的空间构象和抗原性具有重要作用。

关键词：肝炎表面抗原乙型变异抗原性

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酶解对脱脂牛乳蛋白抗原性及感官特性的影响

乳业科学与技术 2022年第4期45卷 14-21页

作者：李敏刘爱成朱晴陈馨萍刘微梁肖娜郑艳岳喜庆沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110866

以脱脂牛乳为原料,采用间接竞争酶联免疫吸附测定法和三(羟甲基)甲基-甘氨酸-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法研究碱性蛋白酶(Alcalase,AT)、复合蛋白酶(Protamex,PT)和风味蛋白酶(Flavorzyme,FT)处理对脱脂牛乳的抗原性、分子质量分布、滋味... 详细信息

以脱脂牛乳为原料,采用间接竞争酶联免疫吸附测定法和三(羟甲基)甲基-甘氨酸-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法研究碱性蛋白酶(Alcalase,AT)、复合蛋白酶(Protamex,PT)和风味蛋白酶(Flavorzyme,FT)处理对脱脂牛乳的抗原性、分子质量分布、滋味和色泽的影响。结果表明:AT对主要致敏乳蛋白的脱敏效果显著优于PT和FT(P抗原抑制率分别达到64.01%、76.00%和69.10%;AT、PT和FT处理后脱脂牛乳中低分子质量肽段明显增加,且苦味、涩味、苦后味、涩后味随酶解时间延长、酶底比的增加而升高,FT处理脱脂牛乳的滋味优于AT和PT;酶解脱脂牛乳的亮度值显著降低,红度值显著升高(P<0.05),透光性增加,AT处理脱脂牛乳的色泽更接近于牛乳。

关键词：脱脂牛乳酶解抗原性滋味色泽

8型肺炎球菌荚膜多糖分子大小对结合效果及结合物抗原性的影响

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国际生物制品学杂志 2023年第4期46卷 186-191页

作者：苏璇李硕题靖梁阳赵硕韩伟陈鸣徐磊任涛杨朝晖北京民海生物科技有限公司研发中心结合疫苗新技术研究北京市重点实验室江南大学-北京民海生物糖类疫苗联合研发中心北京102600

目的评价8型肺炎球菌荚膜多糖(capsular polysaccharide of Streptococcus pneumoniae type 8,CPS8)分子大小对多糖蛋白结合物物理化学(理化)性质的影响,并对结合效果最优的多糖蛋白结合物进行抗原一致性评价。方法采用高压均质法制备... 详细信息

目的评价8型肺炎球菌荚膜多糖(capsular polysaccharide of Streptococcus pneumoniae type 8,CPS8)分子大小对多糖蛋白结合物物理化学(理化)性质的影响,并对结合效果最优的多糖蛋白结合物进行抗原一致性评价。方法采用高压均质法制备不同分子大小的CPS8;采用1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸酯活化法,制备以白喉类毒素无毒突变体CRM197为载体的CPS8蛋白结合物CPS8-CRM197,并检定其理化性质;采用核磁共振氢谱及核磁共振碳谱分析降解前后多糖糖链结构的变化情况,同时采用抑制ELISA评价CPS8-CRM197结合物的抗原一致性。结果高压均质法制备的CPS8相对分子质量在69000~268000;CPS8相对分子质量>200000时会过度交联,抗原性具有一致性。结论多糖结合疫苗制备工艺中,应将CPS8分子大小控制在相对分子质量100000~200000之间,该范围内多糖所制备的多糖蛋白结合物理化性质较优、抗原一致性较好。

关键词： 8型肺炎球菌荚膜多糖分子大小 CRM197结合物抗原性