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新生小鼠肺微血管内皮细胞的培养和抗原制备

第四军医大学学报 2008年第20期29卷 1903-1906页

作者：赵军路静赵继敏杨洪艳翟景明李珊张曦董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南郑州450052 长治医学院附属和济医院呼吸科山西长治046000 郑州大学第三附属医院妇产科河南郑州450052

目的:建立简单有效的新生小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)的培养和抗原制备的方法.方法:用1wk龄内BALB/c小鼠的肺组织进行PMVEC的原代培养并传代,通过倒置显微镜、免疫组织化学鉴定,并用冻融、煮沸、超声等方法比较制备抗原.结果:体外培... 详细信息

目的:建立简单有效的新生小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)的培养和抗原制备的方法.方法:用1wk龄内BALB/c小鼠的肺组织进行PMVEC的原代培养并传代,通过倒置显微镜、免疫组织化学鉴定,并用冻融、煮沸、超声等方法比较制备抗原.结果:体外培养的新生小鼠PMVEC呈梭形或多角形,形成单层后呈典型的铺路石样排列,并可见管腔形成,获得的血管内皮细胞纯度较高,第Ⅷ因子相关抗原(ⅧF-Ag)和CD31表达阳性,成功建立了PMVEC的原代培养方法.通过几种方法比较出超声破碎法制备抗原方法简单浓度高.结论:PMVEC的原代培养方法简便、可靠,保持了血管内皮细胞的结构和功能,且运用超声破碎法获得纯度较高的抗原,为进一步研究PMVEC在抗肿瘤血管治疗中奠定了基础.

关键词：肺微血管内皮细胞细胞培养技术抗原制备

抗仔猪腹泻重组复合多价疫苗的抗原制备及其条件优化

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现代畜牧兽医 2021年第4期 14-20页

作者：张恒慧尤建嵩贺东亮邹栋良赵肖琼李晓宇李淑英徐永平太原工业学院环境与安全工程系山西太原030008 大连理工大学生物工程学院辽宁大连116024 大连赛姆生物工程技术有限公司辽宁大连116023

研究旨在探究重组复合多价抗腹泻疫苗主要抗原的制备工艺条件并进行优化。结果表明,采用优化后的提取和纯化方法能够有效提高疫苗抗原之一重组三价肠毒素的纯度和产率;使用改良Minca培养基能够使菌毛抗原产肠毒素大肠杆菌F4和F5菌毛蛋... 详细信息

研究旨在探究重组复合多价抗腹泻疫苗主要抗原的制备工艺条件并进行优化。结果表明,采用优化后的提取和纯化方法能够有效提高疫苗抗原之一重组三价肠毒素的纯度和产率;使用改良Minca培养基能够使菌毛抗原产肠毒素大肠杆菌F4和F5菌毛蛋白表达量更高,等电点沉淀法可将菌毛蛋白纯度提至约100%。通过上述优化方法制备复合多价疫苗所需的重组肠毒素蛋白抗原和菌毛蛋白抗原纯度较高,可用于后期疫苗的制备。

关键词：仔猪腹泻疫苗重组三价肠毒素菌毛抗原制备

影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究

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中兽医学杂志 2003年第3期 4-10页

作者：舒黛廉赵余放杨增歧康佐文河南省郑州牧业工程高等专科学校河南郑州450008 西北农林科技大学河南省平顶山市环境监测中心

选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株 (M41、Gray、T株 )和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株〔X、Fu、W和H株 (有自然血凝性 )〕 ,在非免疫鸡胚上增殖后 ,用蔗糖透析法浓缩 10倍 ,再分别采用三种方法处理 ,制备IBV -HA抗原 ... 详细信息

选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株 (M41、Gray、T株 )和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株〔X、Fu、W和H株 (有自然血凝性 )〕 ,在非免疫鸡胚上增殖后 ,用蔗糖透析法浓缩 10倍 ,再分别采用三种方法处理 ,制备IBV -HA抗原 :1)用浓缩 4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液 (R .W .F .C4)处理IBV ;2 )用 2 .5U/mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV ;3)用 1%胰酶处理IBV。结果显示 ,除T株仍不具有血凝性外 ,其余毒株都有了较高的血凝价。IBVM41株、X株HA效价株高达 2 8,Fu、Gray、W、H株的HA效价也达 2 7- 2 9。但是 ,用方法 3)来制备HA抗原没有任何实用价值。因为 1%胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用 ,非特异性HA价高达 8log2 。而采用R .W .F .C4和2 .5U/mlPLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV -HA抗原 ,除T株外 ,均能凝集鸡红细胞 ,且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制 ,而不能被ND、EDS - 76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制 ,说明该抗原具有较强的特异性。本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究。比较了用R .W .F .C4和用 2 .5U/mlPLC1处理IBV制备HA抗原血凝价 ,结果显示二者的血凝价是一致的 ,所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒传染性支气管炎 HA抗原 HI效价血凝特性抗原制备 HI试验

马来酰亚胺苯甲氨酯聚乙二醇修饰膜蛋白掩盖AB和RhD抗原制备通用血型红细胞

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国际输血及血液学杂志 2007年第1期30卷 88-89页

作者： Nacharaju P Boctor FN Nanjula BN 李执如

聚乙二醇(PEG)上的活性基团结合在红细胞表面掩盖血型抗原是制备通用血型红细胞的途径之一,这些PEG链有很强的水合作用,能覆盖红细胞表面的大片区域,阻断血型抗原与抗体结合.甲基氧PEG-5000(mPEG-5000)是常用的红细胞修饰剂,主要修饰蛋... 详细信息

聚乙二醇(PEG)上的活性基团结合在红细胞表面掩盖血型抗原是制备通用血型红细胞的途径之一,这些PEG链有很强的水合作用,能覆盖红细胞表面的大片区域,阻断血型抗原与抗体结合.甲基氧PEG-5000(mPEG-5000)是常用的红细胞修饰剂,主要修饰蛋白上的氨基基团.在氯化氰脲酸(CnCl)催化下,mPEG-5000与红细胞膜上氨基形成共价键连接,掩盖Rh抗原和A或B抗原.

关键词：马来酰亚胺苯甲氨酯聚乙二醇修饰膜蛋白抗原制备通用血型抗原红细胞细胞表面修饰蛋白水合作用抗体结合活性基团氨基修饰剂氰脲酸键连接甲基氧区域

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猪支原间接血凝诊断抗原制备

现代农业科技 2013年第5期 280-280,284页

作者：付兴祥伍秀兵邓洪星孔卓郭志刚杨贵树云南省禄劝县九龙镇畜牧兽医服务中心云南禄劝651500 四川省南充市高坪区畜牧局动物疫病预防控制中心四川省南充市高坪区畜牧局畜禽品种改良站四川省宁南县葫芦口镇兽医站云南农业大学

通过对猪肺炎支原体的扩大繁殖,在培养基颜色变黄时收集菌液,通过浓缩、裂解、致敏、醛化鞣酸化绵羊红细胞而制备出猪肺炎支原体间接血凝诊断抗原,并应用微量间接血凝试验对所制备的抗原进行灵敏度和特异性检测。结果表明,所制备的猪肺... 详细信息

通过对猪肺炎支原体的扩大繁殖,在培养基颜色变黄时收集菌液,通过浓缩、裂解、致敏、醛化鞣酸化绵羊红细胞而制备出猪肺炎支原体间接血凝诊断抗原,并应用微量间接血凝试验对所制备的抗原进行灵敏度和特异性检测。结果表明,所制备的猪肺炎支原体间接血凝诊断抗原灵敏度高、特异性强,可以为猪支原体肺炎的血清学诊断提供材料。

关键词：猪肺炎支原体间接血凝诊断抗原制备灵敏度

常用基因表达系统的特点及其在寄生虫抗原制备中的应用

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寄生虫与医学昆虫学报 2003年第2期10卷 118-122页

作者：言慧陈晓光第一军医大学寄生虫学教研室广州510515

寄生虫病仍然是威胁人类健康的重要疾病.与细菌及病毒不同,大多数寄生虫为多细胞生物,其抗原成分复杂,抗原结构随着寄生虫的生长发育而不断变化.即使是单细胞寄生虫如原虫,抗原结构也随着虫期的转换而发生变异.由于寄生虫抗原构成的复... 详细信息

寄生虫病仍然是威胁人类健康的重要疾病.与细菌及病毒不同,大多数寄生虫为多细胞生物,其抗原成分复杂,抗原结构随着寄生虫的生长发育而不断变化.即使是单细胞寄生虫如原虫,抗原结构也随着虫期的转换而发生变异.由于寄生虫抗原构成的复杂性、多变性及大多数寄生虫尚未建立人工体外培养技术,通过基因工程技术大量制备寄生虫重组抗原对寄生虫病的诊断与防治就显得尤为重要.如何根据基因表达系统的特点选择合适的体系获得高效表达,是研究中常常面临的重要问题.

关键词：基因表达系统特点寄生虫抗原制备

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鸡新城疫诊断抗原制备方法的研究

中国动物保健 2018年第4期20卷 36-39页

作者：詹丽娥陆冰洋刘华栋李婷婷唐娟王彩先丁树荣山西省农业科学院畜牧兽医研究所太原030032

将疑似新城疫病料无菌采集后进行RT-PCR鉴定,将阳性病料研磨后接种SPF鸡胚,收获的阳性尿囊液进行血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)检测病毒效价,病毒效价达到2~7~2~8,病毒凝集效价达到10log2。使用10%蔗糖溶液及18-25k Da透析袋对阳性尿... 详细信息

将疑似新城疫病料无菌采集后进行RT-PCR鉴定,将阳性病料研磨后接种SPF鸡胚,收获的阳性尿囊液进行血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)检测病毒效价,病毒效价达到2~7~2~8,病毒凝集效价达到10log2。使用10%蔗糖溶液及18-25k Da透析袋对阳性尿囊液进行浓缩,浓缩至原体积的1/5;10%福尔马林灭活诊断抗原,经过6h后灭活达100%;诊断抗原效价测定:血凝效价为2^(10);血凝抑制效价为10log2。利用制备的鸡新城疫诊断抗原和鸡新城疫标准诊断抗原与鸡新城疫标准检测抗体进行血凝试验(HA)与血凝抑制试验(HI),对比结果:鸡新城疫诊断抗原病毒效价为2^(10),高于鸡新城疫标准诊断抗原的2~9,鸡新城疫诊断抗原凝集效价为10log2,等同于鸡新城疫标准诊断抗原,证明所制备鸡新城疫诊断抗原符合要求,可以应用到生产实践中。

关键词：新城疫 RT-PCR 抗原检测抗原制备抗体检测

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合胞病毒补体结合抗原制备的研究

广州医药 1988年第2期 49-50页

作者：常汝虚关启鸿张绿野广州市儿童医院病毒室广州市儿童医院病毒室

补体结合(CF)试验是诊断病毒学中最常用的方法之一,适用于能满意地制备补结抗原的各种病毒。在呼吸道合胞病毒(RSV)感染的诊断上,比病毒分离率高,与中和试验阳性率相仿,但节省时间和材料,容易操作,只要能取到高效价抗原,一般能作血清... 详细信息

补体结合(CF)试验是诊断病毒学中最常用的方法之一,适用于能满意地制备补结抗原的各种病毒。在呼吸道合胞病毒(RSV)感染的诊断上,比病毒分离率高,与中和试验阳性率相仿,但节省时间和材料,容易操作,只要能取到高效价抗原,一般能作血清学试验的实验室都可以用此法作合胞病毒感染的病原学诊断。为取得稳定高效的补体结合抗原以配合日益广泛开展的小儿呼吸道疾病防治的研究,本室参照有关实验,经改良后,试制成冻干合胞病毒补结抗原。现将研究结果报道如下。

关键词：合胞呼吸道合胞病毒补体结合小儿呼吸道诊断病毒学抗原制备中和试验细胞病变血清学试验病原学诊断

牛结核杆菌ESAT-6靶抗原制备及ELISA检测方法建立

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食品科技 2004年第Z1期29卷 342-页

作者：罗家琴李富祥刘旭川张以芳云南农业大学动物科技学院昆明·650201 云南农业大学动物科技学院昆明·650201 云南农业大学动物科技学院昆明·650201 云南农业大学动物科技学院昆明·650201

　　牛结核病是由结核分支杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病.1989年,Smith首次将牛结核分枝杆菌(***)和其他的分枝杆菌明显区分开来,从此开始了人们对牛结核病的研究.牛结核病可以传染给人,人饮用未经消毒或消毒不完全的患病牛的牛... 详细信息

　　牛结核病是由结核分支杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病.1989年,Smith首次将牛结核分枝杆菌(***)和其他的分枝杆菌明显区分开来,从此开始了人们对牛结核病的研究.牛结核病可以传染给人,人饮用未经消毒或消毒不完全的患病牛的牛奶就可能被传染,引起结核病的流行.据有关资料报道,世界上结核病中有15%饮用了结核病牛的奶而生病的.在经济体制改革逐步深化的今天,城市人民生活普遍进一步提高,人们不但要求得到营养价值特别高的牛奶和乳制品,而且也越来越关心这些产品的公共卫生问题,因此监测与消灭奶牛结核病具有重大意义.……

关键词：牛结核杆菌抗原制备奶牛结核病牛结核分枝杆菌经济体制改革结核分支杆菌慢性传染病营养价值饮用消毒卫生问题人畜共患人民生活牛奶结核病牛乳制品资料生病监测公共