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肿瘤相关抗原CHP2促进HEK293细胞在裸鼠腹腔内的转移

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北京大学学报（医学版） 2009年第5期41卷 521-524页

作者：钱晓萍孙秀媛李国栋张毓陈慰峰北京大学基础医学院免疫学系T细胞研究室北京100191

目的:研究肿瘤相关抗原CHP2对HEK293细胞在裸鼠腹腔内转移能力的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:通过Boyden小室法检测CHP2转染细胞和对照细胞的体外转移能力。对BALB/c裸鼠进行腹腔接种,观察裸鼠体内的成瘤与组织浸润情况并进... 详细信息

目的:研究肿瘤相关抗原CHP2对HEK293细胞在裸鼠腹腔内转移能力的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:通过Boyden小室法检测CHP2转染细胞和对照细胞的体外转移能力。对BALB/c裸鼠进行腹腔接种,观察裸鼠体内的成瘤与组织浸润情况并进行HE染色。利用RT-PCR方法检测HEK293细胞中部分转移相关分子的基因表达水平。结果:CHP2增强HEK293细胞在体外穿过Matrigel胶的侵袭能力,同时显著加速HEK293细胞在裸鼠腹腔内的成瘤速度并促进肿瘤对腹腔主要脏器的浸润。CHP2上调转移相关分子骨桥蛋白(osteopon-tin,OPN)在HEK293细胞中的表达,但对基质金属蛋白酶MMP2的表达没有明显影响。结论:CHP2显著增强HEK293细胞在体外及裸鼠腹腔内的转移能力,OPN表达上调可能参与CHP2对HEK293细胞的转移促进作用。

关键词：抗原,肿瘤肿瘤转移模型,动物

膀胱肿瘤抗原联合尿脱落细胞学检查在膀胱肿瘤诊断中的价值

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国际泌尿系统杂志 2021年第2期41卷 238-241页

作者：凌生涛邓春雷黄力龚小新陈从波十堰市太和医院泌尿外科(湖北医药学院附属医院) 442000

目的探讨膀胱肿瘤抗原(BTA)联合尿脱落细胞学检查在膀胱肿瘤诊断中的应用价值。方法收集2018年9月至2019年9月本院经膀胱镜检查或手术后病检确诊的膀胱肿瘤(37例)及非膀胱肿瘤(32例)患者的尿液标本.分别行尿脱落细胞学及BTA检测并进行... 详细信息

目的探讨膀胱肿瘤抗原(BTA)联合尿脱落细胞学检查在膀胱肿瘤诊断中的应用价值。方法收集2018年9月至2019年9月本院经膀胱镜检查或手术后病检确诊的膀胱肿瘤(37例)及非膀胱肿瘤(32例)患者的尿液标本.分别行尿脱落细胞学及BTA检测并进行相关分析。结果①尿BTA诊断前列腺肿瘤的灵敏度(81.08%)高于尿脱落细胞学(59.46%),但其特异度(62.50%)和阳性预测值(71.43%)均低于尿脱落细胞学的特异性(96.87%)和阳性预测值(95.65%),差异均有统计学意义(P肿瘤病理分级、分期无明显相关性(P>0.05)。结论BTA联合尿脱落细胞学检测可提高对膀胱肿瘤的检出率.具有较高的临床应用价值。

关键词：膀胱肿瘤抗原,肿瘤尿

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浙江大学学报（医学版） 2006年第4期35卷 377-383页

作者：洪学军沈芬平王青青浙江大学医学院免疫研究所浙江杭州310031

目的:构建RCA S1的重组质粒、表达GST-RCA S1融合蛋白并进行纯化和生物学活性鉴定。方法:从M CF-7细胞提取总RNA,通过RT-PCR得到RCA S1的扩增产物,纯化后用E coRⅠ和BamHⅠ双酶切。选择pGEX-2T作为载体,用E coRⅠ和BamHⅠ双酶切后与上... 详细信息

目的:构建RCA S1的重组质粒、表达GST-RCA S1融合蛋白并进行纯化和生物学活性鉴定。方法:从M CF-7细胞提取总RNA,通过RT-PCR得到RCA S1的扩增产物,纯化后用E coRⅠ和BamHⅠ双酶切。选择pGEX-2T作为载体,用E coRⅠ和BamHⅠ双酶切后与上述酶切后DNA连接,转化感受态JM 109大肠杆菌,挑单个菌落提取质粒进行双酶切和测序鉴定。选择测序正确的质粒重新转化BL 21大肠杆菌,用终浓度0.1 mm o l/L的IPTG诱导表达GST-RCA S1蛋白,用GST亲和层析纯化并通过SDS-PAGE电泳和W estern印迹试验证实。利用特异性抗RCA S1多抗(N-18和C-20)鉴定所表达的融合蛋白,通过流式细胞仪检测GST-RCA S1融合蛋白诱导活化T细胞凋亡的作用。结果:通过RT-PCR得到大小为642bp的产物,重组质粒通过双酶切和测序鉴定正确。通过IPTG诱导在BL 21大肠杆菌中表达并纯化得到GST-RCA S1蛋白,通过SDS-PAGE电泳鉴定分子量为52 kM r,与预测一致,并由W estern印迹试验证明为GST融合蛋白。该融合蛋白能被特异性抗RCA S1(N-18和C-20)多抗识别。GST-RCA S1对诱导活化的T细胞凋亡有一定的作用。结论:成功构建RCA S1的重组质粒,并表达GST-RCA S1融合蛋白,对其生物学活性作了初步研究。

关键词：抗原,肿瘤 RCAS1 重组质粒 GST—RCAS1融合蛋白细胞凋亡

彩色多普勒超声联合血清肿瘤抗原125、甲胎蛋白检测对胎盘早剥的早期诊断价值

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中国基层医药 2019年第12期26卷 1467-1471页

作者：陈建国芦金飞陈文艳陈萍舟山市妇幼保健院超声科浙江省316000 舟山市妇幼保健院检验科浙江省316000

目的探讨彩色多普勒超声联合血清中肿瘤抗原125(CA125)、甲胎蛋白(AFP)检测对胎盘早剥的早期诊断价值.方法选取2015年1月至2017年12月舟山市妇幼保健院诊治的胎盘早剥患者120例作为观察组,正常妊娠分娩产妇120例为对照组,两组均进行彩... 详细信息

目的探讨彩色多普勒超声联合血清中肿瘤抗原125(CA125)、甲胎蛋白(AFP)检测对胎盘早剥的早期诊断价值.方法选取2015年1月至2017年12月舟山市妇幼保健院诊治的胎盘早剥患者120例作为观察组,正常妊娠分娩产妇120例为对照组,两组均进行彩色多普勒超声检查,同时检测其外周血清中CA125、AFP水平,并在分娩后检查胎盘表面是否附着陈旧血块或血块压迹,对胎盘早剥的程度进行分类,比较不同检测方法对胎盘早剥检出率,并对胎盘早剥发生程度与血清CA125、AFP水的相关性进行统计学分析.结果胎盘早剥组孕妇血清中CA125和AFP水平较对照组明显升高,胎盘早剥Ⅲ度CA125和AFP水平[(69.1±8.9)U/mL、(279.8±41.3)μg/L]均明显高于Ⅱ度[(61.6±9.4)U/mL、(234.9±46.2)μg/L]和Ⅰ度[(52.2±8.9)U/mL、(205.7±43.1)μg/L]的水平,差异均有统计学意义(均P<0.01).单一彩色多普勒超声检查对胎盘早剥检出率仅为46.7%;超声联合血清CA125水平检测对胎盘早剥检出率为81.7%;超声联合血清AFP水平检测对胎盘早剥检出率为78.3%;超声检查联合血清CA125、AFP水平检查对胎盘早剥检出率为90.8%;三种联合检测方案对胎盘早剥的检出率明显高于彩色多普勒超声检查(χ2=11.67,P<0.01),其中彩色多普勒超声联合血清CA125、AFP水平检查对胎盘早剥检出率较其余两组更高(χ2=12.56、12.64,均P<0.01).结论血清CA125、AFP水平与胎盘早剥的发生及严重程度有关,彩色多普勒超声检查联合血清CA125、AFP检测可明显提高胎盘早剥的检出率,孕妇血清中CA125、AFP的检测值可以作为胎盘早剥早期诊断的指标之一.

关键词：胎盘早剥超声检查,多普勒,彩色诊断抗原,肿瘤甲胎蛋白类

CD 40激发肿瘤抗原特异性DCs对CIK细胞生物学活性的影响

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肿瘤 2007年第12期27卷 953-956页

作者：杨新静黄建安穆传勇陈成张学光苏州大学附属第一医院呼吸内科江苏省临床免疫学重点实验室苏州215006 苏州大学生物技术研究所苏州215006

目的:研究CD40激发凋亡肿瘤细胞致敏的树突状细胞(dendritic cells,DCs)对细胞因子诱导杀伤(cytokine-inducedkiller,CIK)细胞的细胞表型、增殖活性及细胞毒活性的影响。方法:常规方法从健康人外周血单个核细胞中诱导DCs和CIK细胞,采用... 详细信息

目的:研究CD40激发凋亡肿瘤细胞致敏的树突状细胞(dendritic cells,DCs)对细胞因子诱导杀伤(cytokine-inducedkiller,CIK)细胞的细胞表型、增殖活性及细胞毒活性的影响。方法:常规方法从健康人外周血单个核细胞中诱导DCs和CIK细胞,采用凋亡肿瘤细胞负载DCs,并用或不用激发型CD40单克隆抗体(CD40mAb)激活DCs成熟;成熟DCs与同源的CIK细胞共育5d,分别获得DC40Ag-CIK细胞及DCAg-CIK细胞;观察细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞表型;酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)法检测细胞培养上清液中IFN-γ的含量;[3H]-TdR掺入法测定细胞杀伤活性。结果:凋亡肿瘤细胞负载激发可使DCs上调表达CD1a、CD80、CD86、CD83、HLR-DR,联合CD40mAb激发可进一步促进DCs成熟;培养至第14天时,DC40Ag-CIK细胞、DCAg-CIK细胞、CIK细胞分别扩增(18.2±1.7)倍、(15.0±1.2)倍、(9.3±1.8)倍;DC40Ag-CIK细胞中的CD3+CD56+比例较DCAg-CIK细胞和CIK细胞明显上调(P肿瘤细胞负载的DCs相比,CD40激发的凋亡肿瘤细胞负载的DCs可进一步提高CIK细胞的增殖活性及细胞毒活性。

关键词：抗原,肿瘤树突细胞细胞因子杀伤细胞细胞凋亡抗原,CD40

肿瘤相关抗原与自身抗体检测对食管癌早期发现和高危人群预警的意义

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中华肿瘤防治杂志 2007年第9期14卷 645-649页

作者：刘保池王立东杜芳冯常炜张延瑞刘宾杨孟选郭涛宋昕王苒何欣范宗民杜娴娟张建营张梅吴爱群河南省食管癌重点开放实验室郑州大学基础医学院郑州大学第二附属医院消化内科河南郑州450003 河南省人民医院消化内科河南郑州450003 首都医科大学同仁医院消化内科北京100730 郑州大学公共卫生学院

目的:探讨检测食管癌相关抗原与自身抗体对食管癌早期发现和高危人群预警的意义。方法:应用间接酶联免疫反应法和肿瘤相关抗原微阵列(包含8个重组的癌抗原蛋白C-myc、p53、cyclinB1、p16、p62、Koc、Imp1和Survivin)检测河南食管癌高发... 详细信息

目的:探讨检测食管癌相关抗原与自身抗体对食管癌早期发现和高危人群预警的意义。方法:应用间接酶联免疫反应法和肿瘤相关抗原微阵列(包含8个重组的癌抗原蛋白C-myc、p53、cyclinB1、p16、p62、Koc、Imp1和Survivin)检测河南食管癌高发区无症状居民血清自身抗体。根据自身抗体变化对部分居民进一步作食管内镜检查和黏膜活检及免疫组织化学检测,了解血清自身抗体阳性和阴性居民食管上皮组织病理学变化特征及组织中相应肿瘤相关抗原变化的关系。结果:391例无症状居民中,79例(20%)至少呈现1种自身抗体阳性。对64例自身抗体阳性组和67例自身抗体阴性组居民进行内镜检查和黏膜活检组织病理学检查,发现2例早期食管癌,且均在抗体阳性组。血清自身抗体阳性组食管癌前病变发生率明显高于自身抗体阴性组,P肿瘤相关抗原表达与血清中相应自身抗体有明显相关性,P肿瘤相关自身抗体检测有助于提高食管癌高发区无症状居民食管癌前癌变和早期食管癌的检出率。血清自身抗体与食管上皮组织中相应肿瘤抗原的表达变化明显相关。血清肿瘤相关自身抗体检测结合黏膜活检可能是食管癌早期发现和高危人群预警的重要手段。

关键词：食管肿瘤/流行病学癌前状态抗原,肿瘤自身抗体多相筛查

肿瘤相关抗原及其自身抗体在肝细胞癌早期诊断中的应用

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临床肝胆病杂志 2016年第7期32卷 1418-1421页

作者：王婷刘梅董蕾段钟平首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心北京100069 西安交通大学第二附属医院消化内科西安710004

肝细胞癌(HCC)的早期发现、早期诊断是提高HCC患者生存率的必要手段。研究发现,一种由肿瘤细胞释放的异常蛋白即肿瘤相关抗原刺激产生的自身抗体在HCC患者临床诊断前就已存在,因此可能成为HCC早期诊断的新型潜在标志物。简述了几种新型... 详细信息

肝细胞癌(HCC)的早期发现、早期诊断是提高HCC患者生存率的必要手段。研究发现,一种由肿瘤细胞释放的异常蛋白即肿瘤相关抗原刺激产生的自身抗体在HCC患者临床诊断前就已存在,因此可能成为HCC早期诊断的新型潜在标志物。简述了几种新型肿瘤相关抗原抗体在HCC诊断中的应用现状,认为肿瘤相关抗原抗体在HCC诊断中具有较大的前景及临床应用价值。

关键词：癌,肝细胞抗原,肿瘤抗体,肿瘤早期诊断综述

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肿瘤相关抗原及抗体在肝癌诊断中的研究进展

临床肝胆病杂志 2014年第6期30卷 573-576页

作者：王戊辰周永宁兰州大学第一医院消化内科兰州730000

肝癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,虽然其治疗手段不断进步,但病死率仍居高不下。早期诊断可提高患者的生存时间,因此,亟须探索新的生物标志物以便及时诊断肝癌。当前研究的热点集中于肿瘤相关抗原(TAA)及对应的自身抗体来作为肿瘤血... 详细信息

肝癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,虽然其治疗手段不断进步,但病死率仍居高不下。早期诊断可提高患者的生存时间,因此,亟须探索新的生物标志物以便及时诊断肝癌。当前研究的热点集中于肿瘤相关抗原(TAA)及对应的自身抗体来作为肿瘤血清学生物学标志,介绍了自身抗体的产生过程以及当前在肝癌组织中所发现的TAA组和抗-TAAs。此外,指出了这些新发现的自身抗体具有较高敏感性和特异性,将有助于肝癌的早期诊断。

关键词：肝肿瘤抗原,肿瘤自身抗体综述

诱导性多能干细胞来源的抗MSLN-iCAR-NK细胞对卵巢上皮性癌细胞的杀伤作用

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中华妇产科杂志 2023年第12期58卷 922-929页

作者：樊茹佳张云凤王轶英王悦 Wenxin Zheng 河南省人民医院郑州大学人民医院河南大学人民医院妇产科郑州450003 Department of Pathology University of Texas Southwestern Medical CenterDallasTX 75019USA

目的探讨诱导性多能干细胞(iPS)来源的抗间皮素(MSLN)-嵌合抗原受体自然杀伤(CAR-NK)细胞(即抗MSLN-iCAR-NK细胞)对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞的杀伤作用。方法收集2020年9月至2021年9月就诊于河南省人民医院行手术治疗的20例卵巢癌患者... 详细信息

目的探讨诱导性多能干细胞(iPS)来源的抗间皮素(MSLN)-嵌合抗原受体自然杀伤(CAR-NK)细胞(即抗MSLN-iCAR-NK细胞)对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞的杀伤作用。方法收集2020年9月至2021年9月就诊于河南省人民医院行手术治疗的20例卵巢癌患者的癌组织,并收集20例同期因其他良性疾病行手术切除的正常卵巢组织。(1)采用免疫组化和免疫荧光法检测卵巢癌组织中MSLN蛋白的表达。(2)对新鲜卵巢癌组织进行原代卵巢癌细胞的提取和培养。构建抗MSLN-CAR-CD244重组慢病毒载体,并与iPS混匀进行扩增培养,获得抗MSLN-iCAR细胞,使用细胞因子诱导分化法分化为抗MSLN-iCAR-NK细胞。细胞实验分为3组,抗MSLN-iCAR-NK细胞组、自然杀伤(NK)细胞组和对照组。(3)采用流式细胞仪、活细胞染色实验检测3组卵巢癌细胞的凋亡情况。(4)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组卵巢癌细胞中γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、颗粒酶B(GZMB)、穿孔素1(PRF1)、白细胞介素(IL)6、IL-10的表达水平。结果(1)免疫组化法检测显示,卵巢癌组织中MSLN蛋白的阳性表达率为65%(13/20),正常卵巢组织为30%(6/20),两者比较,差异有统计学意义(χ^(2)=4.912,P=0.027)。免疫荧光法检测显示,卵巢癌组织中MSLN蛋白的阳性表达率为70%(14/20),正常卵巢组织为30%(6/20),两者比较,差异有统计学意义(χ^(2)=6.400,P=0.011)。(2)流式细胞仪检测显示,抗MSLN-iCAR-NK细胞组卵巢癌细胞的凋亡率为(29.27±0.85)%,NK细胞组、对照组分别为(8.44±0.34)%、(6.83±0.26)%,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。活细胞染色实验结果显示,抗MSLN-iCAR-NK细胞组卵巢癌细胞的死亡细胞数/活细胞数为(36.3±8.3)%,NK细胞组和对照组分别为(5.4±1.4)%、(2.0±1.3)%,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P均<0.001)。(3)ELISA法检测显示,抗MSLN-iCAR-NK细胞组卵巢癌细胞中IFN-γ、TNF-α、GZMB、PRF1、IL-6、IL-10的表达水平均显著高于NK细胞组和对照组(P均<0.05)。结论抗MSLN-iCAR-NK细胞对卵巢癌细胞具有较强的杀伤能力,有望成为卵巢癌细胞免疫治疗的新方法。

关键词：卵巢肿瘤免疫疗法间皮素抗原,肿瘤嵌合抗原受体杀伤细胞,天然诱导多能干细胞