检索结果-南通市图书馆

中国生物制品学杂志 2001年第2期14卷 116-117页

作者：祝玉桃严家新方志正何春辉徐葛林武汉生物制品研究所武汉430060

目的应用改良抗体结合试验（ＡＢＴ）方法在体外快速测定狂大病疫苗效力。方法将定量的狂犬病毒中和抗体与疫苗样品进行结合，将剩余的中和抗体的滴度用快速荧光灶抑制试验（ＲＦＦＩＴ）进行测定，然后计算待测疫苗的效价，并与传... 详细信息

目的应用改良抗体结合试验（ＡＢＴ）方法在体外快速测定狂大病疫苗效力。方法将定量的狂犬病毒中和抗体与疫苗样品进行结合，将剩余的中和抗体的滴度用快速荧光灶抑制试验（ＲＦＦＩＴ）进行测定，然后计算待测疫苗的效价，并与传统的ＮＩＨ效力试验结果进行比较。结果ＡＢＴ与传统的ＮＩＨ效力试验的结果有良好的相关性，而且快速、经济，重复性高。结论该方法在大多数情况下可取代ＮＩＨ效力试验。

关键词：狂犬病疫苗快速荧光灶抑制试验抗体结合试验效价检测

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改良抗体结合试验检测人用狂犬病疫苗效价方法的初步建立

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中国疫苗和免疫 2014年第3期20卷 250-253页

作者：吕新军申辛欣唐青梁国栋中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206

目的建立改良抗体结合试验(Modified Antibody Binding Test,MABT)的检测流程,并试用于人用狂犬病疫苗(Rabies Vaccine for Human Use,RabV)的效价检测。方法由省级疾病预防控制中心(Center for Disease Control and Prevention,CDC)提供RabV样品,采用制订的MABT流程测定RabV样品效价。结果 MABT检测可以显示RabV样品效价的相对高低,A和B两个RabV样品经MABT测定效价均为4.4国际单位(International Unit,IU)/毫升(ml)(>2.5IU/ml)。结论制订的MABT检测流程工作稳定,MABT可以用于RabV效价的辅助检测。

关键词：狂犬病暴露后预防处置人用狂犬病疫苗抗体结合试验效价

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改良抗体结合试验的建立和在灭活狂犬病疫苗效价检测中的应用

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国际检验医学杂志 2011年第9期32卷 923-924,926页

作者：李云云徐文超李勇裴秋玲吕新军山西医科大学公共卫生学院太原030001 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的对抗体结合试验(ABT)进行改进并将其用于灭活狂犬病疫苗效力的测定。方法将快速荧光灶抑制试验(RFFIT)与ABT方案融合,在疫苗样品稀释、剩余中和抗体检测、结果计算方面进行改进,形成改良抗体结合试验(M-ABT);应用M-ABT对10种灭活狂... 详细信息

目的对抗体结合试验(ABT)进行改进并将其用于灭活狂犬病疫苗效力的测定。方法将快速荧光灶抑制试验(RFFIT)与ABT方案融合,在疫苗样品稀释、剩余中和抗体检测、结果计算方面进行改进,形成改良抗体结合试验(M-ABT);应用M-ABT对10种灭活狂犬病疫苗随库存时间增加疫苗效力改变的情况进行检测。结果 M-ABT可以在28 h内完成,比ABT节省2 d,检测结果与人用狂犬病疫苗效价测定法(NIH)基本等效;10种疫苗随着库存时间增加疫苗效力下降。结论 M-ABT法能够成功建立,并用于灭活狂犬病疫苗效力检测效果较满意。

关键词：狂犬病疫苗抗体结合试验快速荧光灶抑制试验疫苗效力

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RFFIT检测体系的改进和效果评估

RFFIT检测体系的改进和效果评估

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作者：李云云山西医科大学

学位级别：硕士

目的: 1.对快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test, RFFIT)检测体系进行本土化改进,以适应国内实验室条件和检测需求;2.对改进后的RFFIT体系进行效果评估;3.将本室已经应用成熟的RFFIT体系与狂犬病疫苗抗原检测... 详细信息

目的: 1.对快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test, RFFIT)检测体系进行本土化改进,以适应国内实验室条件和检测需求;2.对改进后的RFFIT体系进行效果评估;3.将本室已经应用成熟的RFFIT体系与狂犬病疫苗抗原检测方法进行融合,形成改良抗体结合试验(modified antibody binding test, M-ABT)。方法: 1.将BSR(BHK-21小克隆)、BHK-21(金黄地鼠肾细胞)、MNA(小鼠成神经纤维瘤细胞)三种细胞以及CVS-11、CTN-181两株狂犬病病毒分别引入RFFIT检测体系,以不同组合方式检测10份标本,初步鉴定检测结果的一致性;继而检测10份人血清样品,系统比较不同组合方式下RFFIT检测结果的差异。 2.对1011份人血清样品进行RFFIT检测,评估经过本土化改进的RFFIT检测体系的检测效能。 3.利用自行制备的Alexa 488标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体对200份标本进行RFFIT检测,评估自主制备的抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体进行RFFIT检测的效果。 4.将RFFIT与抗体结合试验(antibody binding test, ABT)方案融合,在疫苗样品稀释、剩余中和抗体检测、结果计算方面进行改进,形成改良抗体结合试验(M-ABT)。应用M-ABT对10种灭活狂犬病疫苗在不同库存时间的疫苗效力进行检测,观察疫苗效力随时间改变的情况。结果: 1.细胞培养:BSR、BHK-21、MNA细胞生长状况良好,建立了这3种细胞的细胞种子库;2.病毒培养:狂犬病病毒CVS-11和CTN-181株对BSR、BHK-21、MNA细胞适应良好,各代次病毒滴度均高于10 FFU/ml,符合RFFIT检测体系对毒种的要求;3.改变细胞系和毒种后RFFIT检测体系的检测效能评估:10份小批量样本检测:分别引进BHK-21和MNA细胞系以及CTN-181病毒株后,RFFIT检测结果与采用BSR和CVS-11组合进行检测所得结果间差别无统计学意义,P值均大于0.05;106份大批量样本的检测结果也表明引入新的细胞系和毒株后RFFIT检测体系与国际标准体系检测结果间差别无统计学意义,并且有很好的相关关系,相关系数(r)大于0.75。 4.改进RFFIT检测体系应用效果评估: ⑴不同细胞系对RFFIT检测结果的影响:以CVS-11病毒株作为攻击病毒,分别应用BSR、BHK-21、MNA细胞系,对1011份人血清样品进行RFFIT检测,不同检测体系的阳性检出率差别无统计学意义,P值均大于0.05;不同检测体系下阳性标本检测结果几何均值(geometric mean titer, GMT)差别无统计学意义,P值均大于0.05;不同检测体系下检测结果相关性较好,相关系数r大于0.75;⑵不同操作环境对RFFIT检测结果的影响:在不同地理位置、操作环境迥异的实验室,由相同的操作人员应用CVS-11毒株和BHK-21细胞系对上述阳性人血清标本再次进行RFFIT检测,检测结果与原实验室环境下进行检测所得结果间差别无统计学意义,P值均大于0.05。 5.采用自主制备Alexa 488标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体后RFFIT检测体系检测效能评估:对200份血清样品的检测显示采用自主制备Alexa 488标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体与进口单抗Millipore DFA 5100检测结果差别无统计学意义,相关系数r =0.980。 6. M-ABT法的建立和初步应用效果分析:10种待测狂犬病疫苗经M-ABT法检测,结果显示疫苗中抗原含量与NIH法测定结果差别没有统计学意义,并且具有很好的相关关系,相关系数r=0.927,提示M-ABT法可用于监测狂犬病疫苗抗原的效价变化情况。结论: 1.实现了应用不同细胞系和狂犬病病毒株进行RFFIT检测:将致病性更弱的CTN-181毒株应用于狂犬病病毒中和抗体的实验室检测,增加了检测安全性;使用常见的BHK-21、MNA细胞系使更多实验室建立和应用该检测技术成为可能;2.不同操作环境对RFFIT检测结果的影响不明显,因此,同一批操作人员使用相同的检测体系在不同实验室进行RFFIT检测的结果均衡可比并可信;3.自主制备的Alexa488标记抗狂犬病核蛋白单克隆抗体可以用于国内RFFIT检测;4. M-ABT法已经建立,用于灭活狂犬病疫苗效力检测时与NIH法检测结果高度一致,是一种合适的灭活狂犬病疫苗效力监测技术手段。

关键词：快速荧光灶抑制试验狂犬病病毒中和抗体狂犬病疫苗抗体结合试验

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