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北京市麻疹、风疹疑似病例IgG抗体亲和力水平检测

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中华微生物学和免疫学杂志 2020年第6期40卷 465-469页

作者：高翔高洁张萍周景林邹林张冲佟玲张国峰王艳春王建国陈萌北京市通州区疾病预防控制中心中心实验室 101100 北京市疾病预防控制中心北京市预防医学研究中心免疫预防所100013

目的通过检测麻疹、风疹疑似病例的IgG抗体亲和力水平,研究北京市麻疹、风疹疫苗高接种率人群中病例发病的原因。方法采用酶联免疫吸附试验对276例麻疹、风疹疑似病例血清分别进行麻疹、风疹IgG抗体检测,并测定IgG抗体亲和力,计算相对... 详细信息

目的通过检测麻疹、风疹疑似病例的IgG抗体亲和力水平,研究北京市麻疹、风疹疫苗高接种率人群中病例发病的原因。方法采用酶联免疫吸附试验对276例麻疹、风疹疑似病例血清分别进行麻疹、风疹IgG抗体检测,并测定IgG抗体亲和力,计算相对亲和力指数。结果麻疹、风疹疑似病例中,麻疹确诊病例104例,风疹确诊病例108例,麻疹、风疹排除病例64例。麻疹确诊病例中6例有免疫史,麻疹原发性免疫失败3例,继发性免疫失败3例。风疹确诊病例中12例有免疫史,风疹原发性免疫失败4例,继发性免疫失败8例。在无免疫史的确诊病例中,9例麻疹病例抗体为高亲和力,7例风疹病例抗体为高亲和力,提示为再次感染。在麻疹、风疹排除病例中,存在其他病原感染,以EB病毒为主,并存在混合感染。结论有疫苗接种史的病例中,原发性免疫失败和继发性免疫失败都存在。在无免疫史的麻疹、风疹成人病例中都存在再次感染的现象。排除病例中存在其他病原感染。其他病原感染可误诊为麻疹、风疹,这也是近年来麻疹、风疹疑似病例中有免疫史病例比例增多的原因。全程接种疫苗有助于产生麻疹、风疹高亲和力抗体。为阻断麻疹病毒循环,并且实现消除麻疹的目标,应建立完善的接种服务机制,对成人重点人群或高风险群体提供补充接种,巩固人群的免疫屏障。

关键词：麻疹风疹抗体亲和力免疫失败

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抗体亲和力试验的研究进展

广西医学 2016年第12期38卷 1744-1747页

作者：蓝翊文秦月中华人民共和国凭祥出入境检验检疫局凭祥市532600 广西壮族自治区疾病预防控制中心南宁市530028

近年来,不少学者应用快速、准确、敏感的抗体亲和力试验鉴别病原体的原发感染和既往感染,解决相关疾病由于免疫等原因出现不典型症状的难题,为临床制定预防和治疗措施提供科学依据。抗体亲和力检测技术的日益成熟,为疾病检测开启了新篇... 详细信息

近年来,不少学者应用快速、准确、敏感的抗体亲和力试验鉴别病原体的原发感染和既往感染,解决相关疾病由于免疫等原因出现不典型症状的难题,为临床制定预防和治疗措施提供科学依据。抗体亲和力检测技术的日益成熟,为疾病检测开启了新篇章。本文对近年来该技术的实验研究及应用作一综述。

关键词：抗体亲和力抗原感染免疫综述

打造抗体“部队”DNA柔软度成为关键——上海科学家发现基因DNA柔性在抗体亲和力成熟中的功能

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科技视界 2023年第27期13卷 7-8页

作者：孟飞龙中国科学院分子细胞科学卓越创新中心

人类的日常生存环境中存在着无穷无尽的病原体,而抗体是人体免疫系统对抗外界病原体入侵的主要分子“士兵”。这些人类的抗体分子由B淋巴细胞分泌的免疫球蛋白构成。当病原体入侵我们的免疫系统时,淋巴细胞通过基因突变等方法,利用甚至... 详细信息

人类的日常生存环境中存在着无穷无尽的病原体,而抗体是人体免疫系统对抗外界病原体入侵的主要分子“士兵”。这些人类的抗体分子由B淋巴细胞分泌的免疫球蛋白构成。当病原体入侵我们的免疫系统时,淋巴细胞通过基因突变等方法,利用甚至不足100纳米的DNA编码多种多样的抗体分子,“以万变应万变”,产生能够针对性结合入侵病原体的抗体分子,这个过程被称为抗体亲和力成熟。

关键词：抗体分子人体免疫系统免疫球蛋白基因突变 DNA编码抗体亲和力 B淋巴细胞柔软度

基于在线微透析采样与流动注射化学发光分析的抗体亲和力测定新方法

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基于在线微透析采样与流动注射化学发光分析的抗体亲和力测定新方...

作者：周娅莉西南大学

学位级别：硕士

随着生物学和医学的不断发展,单克隆抗体技术在免疫治疗、免疫分析、免疫纯化等领域得到广泛应用。在单克隆抗体的制备和筛选中,最重要的工作之一是对不同细胞株分泌的抗体的亲和力这一关键指标进行评价。因此,研究快速、简单、准确的... 详细信息

随着生物学和医学的不断发展,单克隆抗体技术在免疫治疗、免疫分析、免疫纯化等领域得到广泛应用。在单克隆抗体的制备和筛选中,最重要的工作之一是对不同细胞株分泌的抗体的亲和力这一关键指标进行评价。因此,研究快速、简单、准确的抗体亲和力测定新方法对于单克隆抗体的应用具有非常重要的指导意义。微透析(microdialysis,MD)是一种微量采样技术,具有可原位、活体采样和在线、实时检测等特点。其工作原理是外部介质中的小分子物质在浓度梯度差的作用下,被动扩散通过透析膜到达探针腔中,而蛋白质和细胞等大分子物质则被阻挡在外,从而实现对小分子物质的采样。流动注射化学发光(flow injectionchemiluminescence,FI-CL)法是将微量、高速和自动化的进样技术与高灵敏度的化学发光检测技术结合而提出的一种痕量分析方法。其原理是待测物浓度与化学发光强度在一定范围内呈线性定量关系,利用仪器对反应体系化学发光强度的测定,来确定待测物含量。本文将MD应用于小分子半抗原采样,结合高灵敏度的FI-CL分析,以β-激动剂这一不宜直接标记的小分子半抗原为例,在均相条件下研究这些小分子半抗原与抗体间的亲和力,建立了MD-FI-CL的在线联用方法,用于测定抗体亲和力,为小分子半抗原的抗体性能评价提供了一个新型的分析方法平台:(1)在线微透析采样结合化学发光法测定特布他林单克隆抗体亲和力本研究利用在线MD采样方法,结合高灵敏度的FI-CL分析法,在均相体系中研究特布他林与其单克隆抗体之间的亲和力,提出了用于测定单克隆抗体亲和力的免标记型新方法。MD探针可以将结合型特布他林及游离型抗体阻挡在半透膜外,从而实现对小分子半抗原(特布他林)的取样,随后将含有游离型半抗原的透析液注入FI-CL系统。碱性条件下,特布他林对鲁米诺-铁氰化钾系统的化学发光有较强的增敏作用,因此,通过测定化学发光信号,可以实现透析液中特布他林的检测。并通过MD探针的回收率校正,计算出免疫反应体系中游离半抗原的浓度,最后通过Scatchard和Klotz公式,计算得到特布他林单克隆抗体的亲和力。两种计算方法所得结果均为4.9×106 M-1,说明特布他林单克隆抗体是中等亲和力的抗体,该结果与硫氰酸盐洗脱法所得结果一致。该方法操作简便、成本低、分析时间短,为单克隆抗体亲和力的测定提供了新的途径。(2)在线微透析采样结合化学发光法测定莱克多巴胺单克隆抗体亲和力本研究基于在线MD和FI-CL的联用技术构建了一种测定抗体亲和力的免标记型新方法,用于直接测定莱克多巴胺与其单克隆抗体间的亲和力常数。MD探针可以将结合型莱克多巴胺及游离型抗体阻挡在半透膜外,从而实现对免疫反应体系中游离型莱克多巴胺的取样,随后将含有游离型半抗原的透析液注入FI-CL系统。碱性条件下,莱克多巴胺对鲁米诺-高锰酸钾系统的化学发光有较强的增敏作用,因此,通过测定化学发光信号,可以实现对透析液中莱克多巴胺的检测。并通过MD探针的回收率校正,计算出免疫反应体系中游离半抗原的浓度,最后通过Scatchard和Klotz分析,计算得到莱克多巴胺单克隆抗体的亲和力。两种分析方法所得结果均为1.0×106 M-1,说明莱克多巴胺单克隆抗体是中等亲和力的抗体,该结果与硫氰酸盐洗脱法所得结果一致。因此,我们认为该方法用于抗体亲和力的测定是简单、可行的,可以广泛地应用于免疫化学领域。

关键词：流动注射化学发光微透析抗体亲和力半抗原单克隆抗体

IgG抗体亲和力方法用于鉴别麻疹原发和继发性免疫失败

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中国疫苗和免疫 2017年第1期23卷 22-25页

作者：于霞丽付茵陈萌北京市疾病预防控制中心北京100013

目的探讨麻疹消除阶段IgG抗体亲和力应用于区分原发和继发性免疫失败麻疹病例的意义。方法采用酶联免疫吸附方法检测92例麻疹诊断病例(其中17例为一起学校麻疹暴发疫情病例)的血清IgM和IgG抗体水平,测定IgG抗体亲和力,计算相对亲和力指... 详细信息

目的探讨麻疹消除阶段IgG抗体亲和力应用于区分原发和继发性免疫失败麻疹病例的意义。方法采用酶联免疫吸附方法检测92例麻疹诊断病例(其中17例为一起学校麻疹暴发疫情病例)的血清IgM和IgG抗体水平,测定IgG抗体亲和力,计算相对亲和力指数。结果 17例暴发疫情病例的血清IgM阳性率为41.18%(7/17),IgG阳性率为100%(17/17),全部为高亲和力IgG抗体。在另75例IgM阳性病例中,IgG阳性率为76.00%(57/75),有高亲和力IgG抗体的病例占61.4%(35/57)。92例病例中未接种含麻疹成分疫苗(MCV)25例,有高亲和力IgG抗体的病例占48%(12/25);22例病例接种≥1剂MCV,有高亲和力IgG抗体的病例占77.27%(17/22)。MCV接种病例中继发性免疫失败麻疹病例17例,原发性免疫失败麻疹病例5例。结论麻疹IgG抗体亲和力测定可用于鉴别麻疹原发和继发性免疫失败病例,解决了中国消除麻疹的这一关键技术问题。

关键词：麻疹抗体免疫失败抗体亲和力

IgG抗体亲和力实验在麻疹疑似病例检测中的应用研究

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实用预防医学 2021年第10期28卷 1269-1271页

作者：刘洁刘芳高艳李崇孙灵利北京市朝阳区疾病预防控制中心北京100021

目的使用IgG抗体亲和力方法鉴别麻疹病例中的原发性和继发性免疫反应,研究麻疹消除阶段免疫失败病例的检出状况。方法选择出疹后3 d内和4~28 d采集的双份血清IgM结果均为阴性的麻疹疑似病例以及有明确免疫接种史的麻疹疑似病例,采用ELIS... 详细信息

目的使用IgG抗体亲和力方法鉴别麻疹病例中的原发性和继发性免疫反应,研究麻疹消除阶段免疫失败病例的检出状况。方法选择出疹后3 d内和4~28 d采集的双份血清IgM结果均为阴性的麻疹疑似病例以及有明确免疫接种史的麻疹疑似病例,采用ELISA检测血清标本的IgG抗体,对于检出的IgG抗体进一步进行亲和力测定。结果52例双份血IgM阴性的麻疹疑似病例中,根据核酸或者IgG结果可确诊的麻疹病例有23例,其中19例IgG抗体为高亲和力,提示为再次感染。有明确含麻疹成分疫苗接种史的病例7例,其中1例病例接种一剂次含麻疹成分疫苗,采集的双份血中首份血产生低亲和力抗体,第二份血产生高亲和力抗体;其余6例接种≥2剂次含麻疹成分疫苗,均产生高亲和力抗体。结论IgG抗体亲和力检测可以发现再次感染的不典型麻疹病例,并能有效区分原发性和继发性免疫反应病例,为麻疹消除阶段的病例检测和控制提供技术支持。

关键词：麻疹抗体亲和力原发性免疫失败继发性免疫失败

抗双链DNA抗体水平和抗体亲和力与SLE患者疾病状态的关系以及对两种方法检测能力的影响

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检验医学与临床 2018年第2期15卷 151-153,156页

作者：田野张云聪冯珍如闫惠平张岩张海萍李佩郑芳芳聂秋燕刘晴王晓宁张国军谭延国首都医科大学附属复兴医院检验科 100038 北京大学第一医院检验科北京100034 首都医科大学附属北京佑安医院临床检验中心 100069 首都医科大学附属北京天坛医院实验诊断中心 100050

目的探讨抗双链DNA(dsDNA)抗体水平和抗体亲和力与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动性的关系,分析两种抗dsDNA抗体检测方法检出能力差异的原因。方法使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IIF)同时测定300例SLE患者(SLE组)和495例非... 详细信息

目的探讨抗双链DNA(dsDNA)抗体水平和抗体亲和力与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动性的关系,分析两种抗dsDNA抗体检测方法检出能力差异的原因。方法使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IIF)同时测定300例SLE患者(SLE组)和495例非SLE自身免疫疾病患者(非SLE疾病组),以及300例健康人(健康对照组)血清中的抗dsDNA抗体,然后进一步测定ELISA检测为阳性标本的抗dsDNA抗体亲和力指数。结果 (1)SLE组抗dsDNA抗体水平[285.8(164.5~463.3)IU/mL]明显高于非SLE疾病组[172.9(135.3~200.1)IU/mL],差异有统计学意义(P=0.038);SLE组抗体亲和力指数[32.3(19.2~50.7)]与非SLE疾病组[15.5(9.5~49.8)]差异无统计学意义(P=0.169);SLE组抗dsDNA抗体水平和抗体亲和力指数分别与SLEDAI评分呈显著正相关(P=0.000、0.002)。(2)ELISA和IIF同时检测为阳性的标本,其抗dsDNA抗体水平和亲和力指数均明显高于单独ELISA检测为阳性标本的抗体水平和抗体亲和力指数,差异有统计学意义(P抗体水平及抗体亲和力指数与SLE疾病活动性密切相关,表明较高的抗体水平和抗体亲和力可能影响疾病进程,可作为病程监测的指标。IIF相对于ELISA,更倾向于检测出相对较高亲和力的抗dsDNA抗体。

关键词：抗双链DNA抗体抗体亲和力间接免疫荧光法系统性红斑狼疮

丙基硫氧嘧啶诱发的小血管炎和原发性小血管炎抗髓过氧化物酶抗体亲和力的比较

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第4期25卷 277-281页

作者：叶华高莹于峰郭晓蕙赵明辉北京大学第一医院内分泌科肾内科100034 北京大学第一医院肾内科 100034

目的　比较丙基硫氧嘧啶(PTU)相关性小血管炎和原发性小血管炎抗髓过氧化物酶(MPO)抗体亲和力的大小及其与临床表现的关系。方法　以纯化的人MPO为抗原,采用抗原抑制性酶联免疫吸附法对我院确诊的13例PTU相关性小血管炎和19例原发性显... 详细信息

目的　比较丙基硫氧嘧啶(PTU)相关性小血管炎和原发性小血管炎抗髓过氧化物酶(MPO)抗体亲和力的大小及其与临床表现的关系。方法　以纯化的人MPO为抗原,采用抗原抑制性酶联免疫吸附法对我院确诊的13例PTU相关性小血管炎和19例原发性显微镜下多血管炎(MPA)的患者血清中抗MPO抗体的亲和力进行检测,分析其与临床表现的关系,并对两组抗体的亲和力大小进行比较。亲和常数(aK)的值以使血清抗MPO抗体百分结合率下降5 0 %所需的抑制抗原的摩尔浓度的倒数表示。结果　PTU组不同患者血清抗MPO抗体百分结合率下降5 0 %所需的抑制抗原量差异较大,从5 0 μg ml不等。亲和常数的范围为14 0×10 7mol L ,其中位数为0 .75×10 7mol L。血清中抗 MPO抗体的亲和常数与伯明翰小血管炎活动性评分(BVAS)呈正相关(r=0 .5 83,P =0 .0 37) ,与抗体滴度、受累器官数、血红蛋白(Hb)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、血肌酐(Scr)浓度均没有相关性(P >0 .0 5 )。MPA组不同患者血清抗MPO抗体百分结合率下降5 0 %所需的抑制抗原量差异较PTU组小,从亲和常数的范围为8.97×10 7mol L到大于14 0×10 7mol L ,其中位数为5 6 .0×10 7mol L。血清中抗MPO抗体的亲和常数与血?

关键词：抗髓过氧化物酶原发性小血管炎抗体亲和力丙基硫氧嘧啶 C反应蛋白(CRP) mol/L 显微镜下多血管炎血红蛋白(Hb) 酶联免疫吸附法亲和常数抗MPO 诱发临床表现抗体滴度 PTU 相关性血肌酐浓度 MPA 结合率抗原量中位数

临床患者血浆中β-内酰胺类药物&抗体致输血无效及对供者红细胞亲和力的研究

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现代检验医学杂志 2023年第1期38卷 156-160页

作者：梁延连杨燕吴明磊方泰石苏宇清吴亚飞彭龙吴凡梁爽刘嘉婧徐筠娉深圳市血液中心输血医学研究所广东深圳518035 深圳市第三人民医院广东深圳518053 江苏中济万泰生物医药有限公司江苏无锡214400

目的分析临床患者血浆中β-内酰胺类药物&抗体对供者红细胞的亲和力,探究药源性溶血性贫血及输血无效的临床特点。方法选择2021年11月~2022年4月期间临床送检的4例有β-内酰胺类药物用药史的临床患者,检测ABO与Rh血型,直接抗球蛋白试验(... 详细信息

目的分析临床患者血浆中β-内酰胺类药物&抗体对供者红细胞的亲和力,探究药源性溶血性贫血及输血无效的临床特点。方法选择2021年11月~2022年4月期间临床送检的4例有β-内酰胺类药物用药史的临床患者,检测ABO与Rh血型,直接抗球蛋白试验(direct antiglobulin test,DAT)、不规则抗体鉴定(identification of irregular antibodies,IAT)与β-内酰胺类药物抗体及效价,对DAT阳性的患者红细胞进行酸放散并检测放散液中β-内酰胺类药物抗体。选择ABO和Rh同型的供者红细胞与患者血浆在37℃无菌条件下体外致敏,监测β-内酰胺类药物&抗体在0,24,48和72 h与供者红细胞的亲和力,并观察加入补体后的溶血程度。结果4例患者血浆中均存在β-内酰胺类药物抗体,停药前输血无效,停药后输血效果良好。患者1:A型,RhCCDee,DAT阳性(3+W),IAT阴性,血浆中存在头孢哌酮药物抗体(效价:1∶64)、阿莫西林药物抗体(效价:1∶16),放散液中存在头孢哌酮药物抗体。患者2:A型,RhCcDee,DAT阳性(4+W),IAT阴性,血浆中存在头孢哌酮药物抗体(效价:1∶128),放散液中存在头孢哌酮药物抗体。患者3:A型,RhCcDee,DAT阳性(4+),IAT阳性,鉴定为抗E抗体,血浆中存在阿莫西林药物抗体(效价:1∶16)、亚胺培南药物抗体(效价:1∶64)、头孢哌酮药物抗体(效价:1∶128),放散液中存在亚胺培南、头孢哌酮药物抗体。患者4:A型,RhCCDee,DAT阳性(1+),IAT阳性,鉴定为抗-E.c抗体,血浆中存在阿莫西林药物抗体(效价:1∶32),放散液中未检测到药物抗体。4例患者血浆与供者红细胞体外致敏24 h后DAT均为阳性,48和72 h内逐渐增强,加入补体后均可引起红细胞溶解。结论头孢哌酮、阿莫西林和亚胺培南三种β-内酰胺类药物&抗体可迅速结合到供者红细胞表面并随时间延长而增强,有补体存在的条件下可在24~72 h内破坏供者红细胞引起溶血,导致输血无效。

关键词： β-内酰胺类药物药物抗体抗体亲和力免疫性溶血性贫血