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Cloning and Sequence Analysis of Light Variable Region Gene of Anti-human Retinoblastoma Monoclonal Antibody

眼科学报 2002年第3期18卷 185-189页

作者： Xiufeng Zhong, Yongping Li, Shuqi Huang, Bo Ning Chunyan Zhang, Jianliang Zheng, Guanguang FengZhongshan Ophthalmic Center, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510060, China Zhongshan Ophthalmic Center Sun Yat-sen University Guangzhou 510060 China

Purpose: To clone the variable region gene of light chain of monoclonal antibody against human retinoblastoma and to analyze the characterization of its nucleotide sequence as well as amino acid ***: Total RNA was extracted from 3C6 hybridoma cells secreting specific monoclonal antibody(McAb)against human retinoblastoma(RB), then transcripted reversely into cDNA with olig-dT *** variable region of the light chain (VL) gene fragments was amplified using polymeerase chain reaction(PCR) and further cloned into pGEM(R) -T Easy vector. Then, 3C6 VL cDNA was sequenced by Sanger's *** analysis was done by NCBI ***: The complete nucleotide sequence of 3C6 VL cDNA consisted of 321 bp encoding 107 amino acid residues, containing four workframe regions(FRs)and three complementarity-determining regions (CDRs) as well as the typical structure of two cys residues. The sequence is most homological to a member of the Vk9 gene family, and its chain utilizes the Jkl gene ***: The light chain variable region gene of the McAb against human RB was amplified successfully , which belongs to the Vk9 gene family and utilizes Vk-Jk1 gene rearrangement. This study lays a good basis for constructing a recombinant antibody and for making a new targeted therapeutic agents against retinoblastoma.

关键词：抗人成视网膜细胞瘤单克隆抗体轻锭可变区基因基因克隆序列分析

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