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PAD4在抗β2gp1/β2gp1复合物促进中性粒细胞胞外诱捕网形成中的作用

中华微生物学和免疫学杂志 2020年第2期40卷 115-121页

作者：孙彬蔡谦谦成思许国莹陈永新解鸿翔浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院检验中心310014 海军军医大学附属长征医院实验诊断科上海200003 江苏护理职业学院医学技术学院淮安223300 山东第一医科大学第一附属医院(山东省千佛山医院)检验科济南250000

目的探讨肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)在抗β2gp1/β2gp1复合物诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成中的作用。方法分离健康人外周血中性粒细胞与抗β2gp1/β2gp1复合物(100μg/ml)共孵育一定时间,Western blot检测细胞PAD4表达;进一步... 详细信息

目的探讨肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)在抗β2gp1/β2gp1复合物诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成中的作用。方法分离健康人外周血中性粒细胞与抗β2gp1/β2gp1复合物(100μg/ml)共孵育一定时间,Western blot检测细胞PAD4表达;进一步采用PAD4抑制剂Cl-amidine(10μmol/L)预处理中性粒细胞,Western blot检测细胞瓜氨酸化组蛋白3(CitH3)蛋白质表达,ELISA检测细胞培养上清中髓过氧化物酶(MPO)-DNA相对含量。下腔静脉狭窄法建立APS小鼠血栓模型,并通过腹腔注射Cl-amidine(50 mg/kg)进行干预,Western blot检测血浆中CitH3蛋白质表达,荧光染色法检测血浆中循环游离DNA(cf-DNA)浓度,取下腔静脉血栓称其重量,观察Cl-amidine能否抑制APS-IgG诱导的NETs和血栓形成。组间差异采用t检验或单因素方差分析。结果抗β2gp1/β2gp1复合物能够显著下调细胞质中PAD4蛋白质表达水平[(3.67±0.32)vs(1.47±0.19),t=10.22,P19)vs(2.97±0.31),t=11.49,P抗β2gp1/β2gp1复合物诱导的中性粒细胞CitH3蛋白质表达[(2.46±0.47)vs(0.46±0.13),t=12.24,P1],明显减少培养上清中MPO-DNA含量[(4.09±0.94)vs(2.80±0.57),t=4.23,P1.09±0.45),t=11.83,P1],明显降低APS小鼠血浆中cf-DNA浓度[(2685.0±735.8)vs(1784.0±577.0),t=3.93,P22±3.06)vs(4.89±1.90),t=2.27,P抗β2gp1/β2gp1复合物诱导的NETs形成,其可能在APS血栓形成中发挥重要作用。

关键词：抗磷脂综合征抗β2gp1/β2gp1复合物中性粒细胞胞外诱捕网肽酰基精氨酸脱亚氨酶4

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