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菹草乙酸乙酯组分抑藻活性物质的分离纯化和鉴定

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环境科学 2015年第10期36卷 3860-3865页

作者：孙颖颖苏振霞浦寅芳肖辉王长海淮海工学院江苏省海洋生物技术重点实验室连云港222005 江苏省海洋资源开发研究院连云港222000 南京农业大学资源与环境科学学院南京210095

前期研究表明,菹草乙酸乙酯组分能显著抑制赤潮微藻米氏凯伦藻的生长.在此基础上,采用硅胶柱层析和硅胶GF254薄层层析等方法,分离纯化菹草乙酸乙酯组分中的抑藻活性物质.进一步应用质谱、核磁共振碳谱和氢谱等技术,鉴定抑藻活性物质.结... 详细信息

前期研究表明,菹草乙酸乙酯组分能显著抑制赤潮微藻米氏凯伦藻的生长.在此基础上,采用硅胶柱层析和硅胶GF254薄层层析等方法,分离纯化菹草乙酸乙酯组分中的抑藻活性物质.进一步应用质谱、核磁共振碳谱和氢谱等技术,鉴定抑藻活性物质.结果表明,从菹草乙酸乙酯组分中分离纯化到2种抑藻活性物质.当浓度为16μg·m L-1时,它们对米氏凯伦藻表现出一定的抑藻活性.结构鉴定表明,此2种抑藻活性物质为Trichodermatides B和2-methylheptylisonicotinate.此2种化合物为首次从菹草中分离得到,也是首次从沉水植物中分离得到.

关键词：赤潮微藻分离鉴定抑藻活性物质菹草

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刺松藻抑藻活性物质分离的初步研究

环境科学与技术 2016年第4期39卷 53-57,78页

作者：浦寅芳苏振霞肖辉张志恒王俊孙颖颖淮海工学院海洋学院江苏连云港222005 江苏省海洋资源开发研究院江苏连云港222000

采用甲醇浸泡刺松藻干粉末,适当处理后,制备到此海藻的甲醇提取物(过滤和减压蒸干)。抑藻活性检测表明,当浓度为4.0 mg/mL时,此甲醇提取物明显抑制了米氏凯伦藻的生长。进一步采用2种液液萃取方法,对此提取物进行分离,共获得8个液液萃... 详细信息

采用甲醇浸泡刺松藻干粉末,适当处理后,制备到此海藻的甲醇提取物(过滤和减压蒸干)。抑藻活性检测表明,当浓度为4.0 mg/mL时,此甲醇提取物明显抑制了米氏凯伦藻的生长。进一步采用2种液液萃取方法,对此提取物进行分离,共获得8个液液萃取分离组分。这些组分对米氏凯伦藻均表现出抑藻活性。在此基础上,采用化学成分系统预试验方法,初步分析了这些抑藻活性组分的化学成分。结果表明,刺松藻甲醇提取物的液液萃取分离组分中主要含有鞣质、有机酸和黄酮。最后,对抑藻活性组分进行了硅胶GF_(254)薄层层析检测,得到了较为适宜的展开剂,为后续采用硅胶柱层析进行分离纯化奠定了良好的实验基础。目前,国内外尚未见刺松藻抑藻活性物质的相关研究。

关键词：抑藻活性物质刺松藻分离赤潮微藻

副球菌O-4对米氏凯伦藻的抑制作用及抑藻活性物质分离鉴定

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副球菌O-4对米氏凯伦藻的抑制作用及抑藻活性物质分离鉴定

作者：李晨曲阜师范大学

学位级别：硕士

有害赤潮是世界范围的海洋灾害之一,严重威胁着海洋生态平衡、海洋渔业发展、海洋旅游业和人类健康。赤潮防控已经成为海洋环境生态学研究的焦点。使用抑藻微生物防治有害赤潮是一种环境友好的生物方法,表现出一定的应用前景,已成为有... 详细信息

有害赤潮是世界范围的海洋灾害之一,严重威胁着海洋生态平衡、海洋渔业发展、海洋旅游业和人类健康。赤潮防控已经成为海洋环境生态学研究的焦点。使用抑藻微生物防治有害赤潮是一种环境友好的生物方法,表现出一定的应用前景,已成为有害赤潮防治的热点之一。在此背景下,本文筛选出一株对有毒有害赤潮微藻米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)具有显著抑制作用的细菌O-4,探究了其抑藻机制,并分离鉴定出一种抑藻活性物质。主要研究结果如下:1、抑藻细菌O-4形态特征及种属信息从海水中筛选出一株对米氏凯伦藻具有显著抑制作用的细菌,编号为O-4。该菌在2216E固体培养基上长起的菌落呈白色、表面光滑、边缘平滑的圆形;扫描电镜观察表明,O-4长600-800 nm、直径约400 nm、短棒状、无鞭毛;16S r RNA测序及系统发育进化分析表明O-4为副球菌(Paracoccus homiensis)。2、副球菌O-4抑藻机制副球菌O-4的主要抑藻方式为间接抑藻。副球菌O-4发酵液上清和菌体分别加入到米氏凯伦藻藻液中共培养48 h,上清液的抑藻率可以达到97%,菌体的抑藻率为10.4%。副球菌O-4可导致米氏凯伦藻细胞聚团沉降、藻细胞破裂、细胞内容物外泄。副球菌O-4还可导致米氏凯伦藻光合系统损伤,表现为叶绿素a和类胡萝卜素含量下降、叶绿素荧光动力学参数改变。3、O-4在2216E培养基培养中产生抑藻活性物质的分离鉴定使用2216E固体培养基培养副球菌O-4,对其产物用乙酸乙酯进行提取并测定抑藻活性:当乙酸乙酯萃取相添加浓度为50 mg/L及以上时抑藻效果非常明显,加药5 d后抑藻率可达100%。使用气相色谱-质谱联用技术对菌培养前后2216E固体培养基乙酸乙酯相萃取的物质进行了测定,通过对比,在培养过副球菌O-4的2216E培养基中检出19种特异物质。GC-MS/MS分析表明十九碳烯酸(顺-10)为副球菌O-4产生的具有抑藻活性的成分,其浓度为30 mg/L时,培养6d后抑藻率可以达到42.25%,浓度为35 mg/L及以上时,培养3天后抑藻率即可达到100%。在这些工作之外,我们还可以从以下方面深入对本选题的研究:探索抑藻活性物质的合成机制;探究藻菌之间的群落关系,为原位的赤潮暴发治理提供思路;通过对培养方法、提取方法和检测手段的优化来进一步挖掘潜在的抑藻活性物质。

关键词：赤潮米氏凯伦藻抑藻细菌抑藻机制抑藻活性物质

抑藻菌株Bacillus ***03分离鉴定及其对铜绿微囊藻的抑制效果与特征

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微生物学通报 2018年第12期45卷 2592-2602页

作者：许艳婷宋瑞雪田聪琦李祎河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 厦门大学生命科学学院福建厦门361102

【背景】蓝藻常形成水华,严重破坏水生环境及威胁水生生物。微生物能够专一性地抑制蓝藻的生长,从而可以被用于蓝藻水华的控制。【目的】分离筛选一株对有害水华藻——铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa)7806有高效抑藻能力的菌株,对其... 详细信息

【背景】蓝藻常形成水华,严重破坏水生环境及威胁水生生物。微生物能够专一性地抑制蓝藻的生长,从而可以被用于蓝藻水华的控制。【目的】分离筛选一株对有害水华藻——铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa)7806有高效抑藻能力的菌株,对其进行生理生化和分子鉴定,并研究其抑藻效果与特征。【方法】通过API试剂条确定其生理生化特征,对细菌的16SrRNA基因进行测序并构建系统进化树,通过探究细菌菌体、上清、发酵液的抑藻效果确定该菌的抑藻方式,通过测定不同温度、pH、蛋白酶K、有机溶剂萃取和透析条件下的抑藻效果及傅里叶红外光谱来确定胞外抑藻物质的性质。【结果】菌株hsn03与芽孢杆菌属(Bacillus sp.)的Bacillus sonorensis NBRC101234有最高相似性,达99.59%;通过分泌胞外抑藻物质对铜绿微囊藻生长表现出抑制效果,且最佳抑藻添加量为7.0%(体积比);胞外抑藻物质为一类分子量大于500 Da且小于1 kD,耐高温,耐酸碱,含有叁键和累积双键,非蛋白、多糖类的小分子物质。【结论】抑藻菌株的挖掘与鉴定对于丰富有害藻华藻的抑藻菌质资源有非常大的促进作用,通过对抑藻方式、效果和特征的研究为进一步将抑藻菌应用于铜绿微囊藻的治理奠定基础。

关键词：铜绿微囊藻芽孢杆菌属抑藻活性物质抑藻效果与特征

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微生物抑藻及其抑藻机制研究进展

山东化工 2020年第18期49卷 41-43页

作者：熊露露梅齐诚张鑫洋刘天浩孙好芬青岛理工大学环境与市政工程学院山东青岛266033

水体富营养化程度日趋严重使得水华、赤潮也频频暴发,由此带来的环境问题和造成的巨大经济损失已得到人们的广泛关注。本文从微生物的控藻原理和技术、抑藻机制、抑藻活性物质角度,归纳总结了现阶段有关微生物抑藻活性物质方面的研究进... 详细信息

水体富营养化程度日趋严重使得水华、赤潮也频频暴发,由此带来的环境问题和造成的巨大经济损失已得到人们的广泛关注。本文从微生物的控藻原理和技术、抑藻机制、抑藻活性物质角度,归纳总结了现阶段有关微生物抑藻活性物质方面的研究进展,为水体富营养化的治理提供一定的理论依据和参考思路。

关键词：富营养化生物控藻抑藻活性物质抑藻效果溶藻微生物

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