检索结果-南通市图书馆

人骨髓间充质干细胞的扩增培养及向成软骨样细胞的定向诱导分化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江大学学报（理学版） 2004年第3期31卷 337-342页

作者：邱丽燕王金福沈丹金洁浙江大学生命科学学院浙江杭州310012 浙江大学附属第一医院浙江杭州310003

从人骨髓中分离和培养间充质干细胞(MSCs),在原代和传代培养中其形态学上均为贴壁、纤维状的细胞,随着代次的增加细胞形态更加趋于一致.流式细胞仪鉴定CD45、CD34、CD117、HLA-DR阴性,CD29、CD166阳性,并随着培养代次的增加,阳性比率和... 详细信息

从人骨髓中分离和培养间充质干细胞(MSCs),在原代和传代培养中其形态学上均为贴壁、纤维状的细胞,随着代次的增加细胞形态更加趋于一致.流式细胞仪鉴定CD45、CD34、CD117、HLA-DR阴性,CD29、CD166阳性,并随着培养代次的增加,阳性比率和阴性比率出现相应的上升和降低,说明细胞中MSCs纯度增加.第三代细胞大约有80%处于G0/G1期,S+G2+M期约20%,说明MSCs有强大的增殖潜能.在传代培养中的最适接种密度为5000个/cm2左右.MSCs在体外经历了滞缓期、对数生长期、平稳期3个时期,传代培养的MSCs生长速度比原代的MSCs明显快很多.采用程序降温法对MSCs进行冻存,60～90d后对冻存的MSCs进行复苏,发现MSCs仍可在体外良好生长4～6代,特定的MSCs样本可以扩增10代,说明经过冻存的细胞仍具有良好的增殖能力.对4例标本的前三代MSCs在体外利用TGF-β1和维生素C诱导两周后,用RT-PCR证明MSCs表达软骨特异性的II型前胶原的mRNA,说明培养的细胞具有向成软骨样细胞分化的潜能,由此进一步证实其为MSCs.

关键词：骨髓间充质干细胞扩增培养成软骨样细胞细胞形态

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

反硝化细菌工业化筛选与扩增培养研究

中国资源综合利用 2022年第12期40卷 26-30页

作者：张鑫杨宏北京工业大学水质科学与水环境恢复工程重点实验室北京100124

为探寻高效经济的反硝化细菌工业化筛选与扩增方法,本研究使用工业级生物反应器完成反硝化细菌的筛选与扩增培养,然后以此为基础制成包埋填料进行污泥活性验证试验。结果表明,污泥的脱氮性能能够实现快速提高,最大脱氮速率为534.7 mg/(L... 详细信息

为探寻高效经济的反硝化细菌工业化筛选与扩增方法,本研究使用工业级生物反应器完成反硝化细菌的筛选与扩增培养,然后以此为基础制成包埋填料进行污泥活性验证试验。结果表明,污泥的脱氮性能能够实现快速提高,最大脱氮速率为534.7 mg/(L·h),最大比反硝化速率为41.7 mg N/(g MLSS·h),最大污泥增长量为696.5 mg/(L·d),证明反硝化细菌能够实现工业化筛选与生产。结合试验数据,实际生产中,初始污泥浓度的建议值取5 500 mg/L。包埋填料脱氮表现良好,最大脱氮速率为220.6 mg/(L·h)。

关键词：反硝化细菌筛选扩增培养脱氮性能固定化生物反应器

维普期刊数据库博看期刊

体外扩增法分离培养兔骨髓来源的血管内皮祖细胞(英文)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究与临床康复 2008年第51期12卷 10193-10196页

作者：高岩马骋吕冬燕刘同库北华大学附属医院心脑科吉林省吉林市132000

背景：体外扩增法培养血管内皮祖细胞操作简便、费用低廉是实验中获取内皮祖细胞的主要方法。目的：拟从兔的骨髓中通过体外扩增法分离培养出血管内皮祖细胞，为进一步观察自体血管内皮祖细胞移植促进血管内皮的修复提供细胞学基础。设... 详细信息

背景：体外扩增法培养血管内皮祖细胞操作简便、费用低廉是实验中获取内皮祖细胞的主要方法。目的：拟从兔的骨髓中通过体外扩增法分离培养出血管内皮祖细胞，为进一步观察自体血管内皮祖细胞移植促进血管内皮的修复提供细胞学基础。设计、时间及地点：开放性实验，于2005—03／2006—02在解放军第二军医大学长征医院内科实验室完成。材料：6～8月龄新西兰大白兔8只，雌雄不拘，体质量（2．5±0．5）kg，抽取骨髓，密度离心法分离骨髓单个核细胞方法：将骨髓单个核细胞接种于密度为1×10^6cm^-2，加入含有血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的M199培养基中体外扩增培养7d，通过DiL标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的凝集素BS-1双染法鉴定血管内皮祖细胞，显示红色荧光的为吞噬了乙酰化低密度脂蛋白的细胞，绿色荧光为结合BS-1的细胞，双染色为橙色荧光。免疫荧光染色及流式细胞仪检测CD133，CD34，Flk-1的表达。主要观察指标：①细胞形态观察。②血管内皮祖细胞的增殖能力。③乙酰化低密度脂蛋白和凝集素BS-1双染法鉴定血管内皮祖细胞结果。④血管内皮祖细胞免疫组织化学鉴定结果。⑤血管内皮祖细胞表面标志物流式细胞仪检测结果。结果：①细胞形态观察：新分离的骨髓单个核细胞呈圆形，培养72h后可见贴壁细胞呈集落样生长，细胞呈圆形或不规则形，核分裂相明显，至培养第7天成片生长的细胞集落相互连接，呈梭形的内皮样细胞。②血管内皮祖细胞的增殖能力：培养2～4d血管内皮祖细胞增殖较快，之后增殖速度减缓，生长曲线呈典型“S”形外观，培养第6，7天血管内皮祖细胞生长再次增快，吸光度值分别达到0．58±0．15和0．62±0．23。⑧在血管内皮祖细胞的胞质中，出现与乙酰化低密度脂蛋白结合的红色荧光聚集，阳性率达95％以上；与凝集素BS-1结合率几乎达100％；两者双染色率达90％以上。④血管内皮祖细胞免疫组织化学及流式细胞仪检测细胞表面标志物CD133，FIK-1，CD34均呈阳性。结论：体外扩增法成功地从兔骨髓中分离培养出具有血管内皮祖细胞特征的细胞群体。

关键词：骨髓内皮祖细胞扩增培养鉴定

人脐静脉内皮细胞衬里鼠颈总动脉血管内壁实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高技术通讯 2002年第9期12卷 24-27页

作者：叶志义蔡绍皙王远亮卢晓重庆大学生物工程学院国家教育部重点实验室重庆400044

选用人脐静脉内皮细胞作为表衬细胞 ,经过细胞的扩增培养 ,以 3× 10 5/ml浓度的细胞悬液种植到已除去内皮细胞的鼠颈总动脉内腔壁上培养 2 4h后用扫描电镜进行观察。结果表明 :超低温冷冻对鼠血管内弹性层没有损伤 ,在种植了人脐静脉... 详细信息

选用人脐静脉内皮细胞作为表衬细胞 ,经过细胞的扩增培养 ,以 3× 10 5/ml浓度的细胞悬液种植到已除去内皮细胞的鼠颈总动脉内腔壁上培养 2 4h后用扫描电镜进行观察。结果表明 :超低温冷冻对鼠血管内弹性层没有损伤 ,在种植了人脐静脉内皮细胞4 8h后 ,内皮细胞完全覆盖整个血管内腔表面 ,异种内皮细胞能够正常地生长于异种血管材料表面。

关键词：人脐静脉内皮细胞鼠颈总动脉血管内壁实验研究异种移植血管表衬细胞扩增培养

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

颞下颌关节滑膜间充质干细胞的分离与培养

中华口腔医学杂志 2005年第5期40卷 362-364页

作者：李健龙星柯金孟庆功房维武汉大学口腔医学院口腔生物医学工程教育部重点实验室 430079 口腔颌面外科颞下颌关节病及颌面疼痛诊疗中心

目的进行颞下颌关节滑膜间充质干细胞(SMSCs)的体外分离与培养。方法用有限稀释法筛选出SMSCs,并在25ml培养瓶中扩增培养。噻唑蓝法检测SMSCs的细胞生长周期,细胞免疫化学检测波形蛋白和角蛋白的表达,流式细胞技术对SMSCs进行CD8,CD34,C... 详细信息

目的进行颞下颌关节滑膜间充质干细胞(SMSCs)的体外分离与培养。方法用有限稀释法筛选出SMSCs,并在25ml培养瓶中扩增培养。噻唑蓝法检测SMSCs的细胞生长周期,细胞免疫化学检测波形蛋白和角蛋白的表达,流式细胞技术对SMSCs进行CD8,CD34,CD44,血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的检测。结果体外培养的SMSCs,细胞突起明显,细胞外形均匀一致,免疫染色显示波形蛋白阳性与角蛋白阴性。流式细胞仪检测发现其有CD44、VCAM-1和ICAM-1的表达。结论从成人的颞下颌关节滑膜中可以分离培养出SMSCs。

关键词：颞下颌关节滑膜干细胞间充质干细胞关节滑膜扩增培养体外分离颞下颌细胞间黏附分子免疫化学检测

腺病毒载体携带标记基因EGFP转染人羊膜上皮细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2017年第21期21卷 3382-3387页

作者：金玲刘小勇徐玮郝晓宁牛静宜王乙婷曹端荣深圳市宝安人民医院眼科广东省深圳市518101 暨南大学附属第一医院眼科广东省广州市510630

背景:人羊膜上皮细胞具有干细胞的某些性能,可诱导分化为角膜样上皮细胞,但在体外培养时无法示踪,不能有效地监测其细胞转归。目的:探讨利用腺病毒载体将标记基因EGFP转染入人羊膜上皮细胞的可行性及感染效率。方法:pD C316-mC MV-EGFP... 详细信息

背景:人羊膜上皮细胞具有干细胞的某些性能,可诱导分化为角膜样上皮细胞,但在体外培养时无法示踪,不能有效地监测其细胞转归。目的:探讨利用腺病毒载体将标记基因EGFP转染入人羊膜上皮细胞的可行性及感染效率。方法:pD C316-mC MV-EGFP腺病毒包装后,腺病毒载体携带标记基因EGFP转染体外培养的人羊膜上皮细胞,并扩增培养,观察转染后人羊膜上皮细胞与未转染人羊膜上皮细胞的形态差异,并在荧光显微镜下观察转染基因的表达,用流式细胞仪检测转染细胞的细胞周期及EGFP阳性表达率。结果与结论:(1)多数转染细胞筛选出的抗性克隆以及培养的克隆细胞与正常体外培养的人羊膜上皮细胞在形态上无显著差异;(2)瞬时转染后48 h的人羊膜上皮细胞中增强型绿色荧光蛋白阳性表达率最高达99.01%;(3)转染后的人羊膜上皮细胞的细胞周期有所减慢,说明利用腺病毒载体能将标记基因EGFP转染入人羊膜上皮细胞,可更直观地观察到人羊膜上皮细胞在体外的进一步转归。

关键词：腺病毒科感染绿色荧光蛋白质类羊膜上皮细胞细胞周期组织工程干细胞培养腺病毒绿色荧光蛋白人羊膜上皮细胞原代培养扩增培养基因转染转染效率国家自然科学基金

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

硝化细菌富集培养及应用研究进展

水产科技情报 2013年第6期40卷 320-323页

作者：罗小溪高建忠陈再忠上海海洋大学水产与生命学院上海201306

硝化细菌对于养殖水体中的氨氮具有良好的降解作用。文章介绍了国内外有关硝化细菌富集培养的方法及研究现状,比较了目前国内外的硝化细菌产品,综述了硝化细菌应用研究的进展,指出了实际应用的硝化细菌产品存在的问题,对解决这些问题提... 详细信息

硝化细菌对于养殖水体中的氨氮具有良好的降解作用。文章介绍了国内外有关硝化细菌富集培养的方法及研究现状,比较了目前国内外的硝化细菌产品,综述了硝化细菌应用研究的进展,指出了实际应用的硝化细菌产品存在的问题,对解决这些问题提出了一些建议,展望了硝化细菌产品的发展前景。

关键词：硝化细菌富集培养扩增培养硝化细菌制剂

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

海带细胞工程育苗的生产应用研究

海带细胞工程育苗的生产应用研究

作者：张全胜中国海洋大学

学位级别：硕士

传统的海带夏苗培育方法是以海带生活史为依据建立的，此方法自60年代初建立以来，延用至今。随着现代细胞工程技术的迅速发展，细胞工程育苗即配子体无性繁殖系育苗方法成为目前海带育苗生产中的崭新技术。本文主要从生产应用角度，通... 详细信息

传统的海带夏苗培育方法是以海带生活史为依据建立的，此方法自60年代初建立以来，延用至今。随着现代细胞工程技术的迅速发展，细胞工程育苗即配子体无性繁殖系育苗方法成为目前海带育苗生产中的崭新技术。本文主要从生产应用角度，通过对细胞系增殖特点、附苗特点的研究，系统探讨了海带细胞系扩增培养、附苗、育苗各环节的关键技术。一、细胞系扩增培养：在20L广口瓶中，接种浓度0.5g／L，提供适宜的生长条件，进行细胞系生长试验，通过回归分析得y=-0.1118+1.3108x+0.085x-0.0006x(R2=0.9985)，用于估算克隆生产量(其中y是鲜重，x是天数)。通过对不同密度克隆对营养盐的消耗研究，实验表明当克隆的密度较小时，N6ppm、P1ppm、每周换水一次，可满足其生长需要;克隆密度较大时，N10ppm、P2ppm、每周换水一次，可满足其生长需要。在充气悬浮培养条件下克隆的瞬时生长率明显高于静置培养。不同接种密度实验结果表明：分瓶数量越多，克隆总重量增长越多;接种密度越低，克隆的生长速度越快。大规模培养结果表明在20L广口瓶中，48g克隆在起始培养时经组织捣碎机粉碎切割，切割时间10s(细胞段长度约200um)，并按0.35g／L接种，一个月后不粉碎直接分瓶，分瓶密度1.5g／L，一个月后最大密度410g／瓶，生长速度约每周翻一番。二、附苗：采苗前，将♀♂配子体克隆混合并由长光照(连续光照)转入短光照(光期L：D10：14)培养，连续观测克隆生长情况，结果显示，进入配子体发育阶段需11天时间，细胞增加量达40％;以孢子体发生时间和发生率为指标，研究不同♀♂比例的配子体发育情况，结果显示，1：1和3：1比较接近，5：1以上配比出现了孢子体发生时间延迟、发生率降低和孤雌生殖现象;通过不同克隆喷洒量的孢子体发生密度实验，3g／帘(♀系)与孢子采苗(孢子附着密度20～25／160X)的发生密度接近;干帘喷洒、干帘浸泡和间接喷洒的采苗方法比较显示，间接喷洒法简便易行、孢子体发生整齐。三、育苗：海带细胞系育苗生产中，在采苗结束时采取附苗后静水、24h后微流水(表层流速5cm／s以下)、72h后正常流水;孢子体生长到8～16列c时开始以0.5kg／cm的压力洗刷，随着孢子体的生长及附着力的提高逐渐增加洗刷强度和次数;同时采用常规育苗生产中的温、光、盐等技术措施，进行幼苗培育。结果显示：配子体附着率海带细胞工程育苗的生产应用研究 80%以上、幼苗健壮、出苗质量达到国家一类帘标准，克隆采苗至8一16列。期间的生长发育速度较常规抱子体采苗后的生长发育速度快20天。本文还对细胞工程育苗和传统育苗的两种大抱子体主要经济性状进行统计学分析，从遗传角度证明前者种群变异程度明显小于后者。关键词:海带、细胞系、扩增培养、附苗、育苗今

关键词：海带细胞系扩增培养附苗育苗

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

皮肤生产线

新知客 2008年第3期 90-93页

作者：韩少华

2000年,美国第一块"人造皮肤"面市,这个每年使20万到30万烧伤和皮肤溃疡患者受益的有机药品,创造了一个每年超过2000万美元产值的市场,并在8年间,使生产"人造皮肤"的企业的市值以年均增长22.5%的速度成长着。2008年,中国的"人造皮肤"也... 详细信息

2000年,美国第一块"人造皮肤"面市,这个每年使20万到30万烧伤和皮肤溃疡患者受益的有机药品,创造了一个每年超过2000万美元产值的市场,并在8年间,使生产"人造皮肤"的企业的市值以年均增长22.5%的速度成长着。2008年,中国的"人造皮肤"也迈开了产业化步伐。

关键词：人造皮肤生物敷料扩增培养表皮细胞原代培养溃疡面积白色脓液纤维细胞组织工程学血管化