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光敏生物素标记k-DNA打点杂交鉴定利什曼原虫种株

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四川大学学报(医学版) 1988年第3期19卷 222-225页

作者：吕洪刚胡孝素寄生虫学教研室

用光敏生物素标记利什曼原虫动基体DNA（k-DNA）,以打点杂交鉴定利什曼原虫。结果表明,在前鞭毛体数为10～10时,此法能显示出利什曼原虫不同的种和株间有明显的区别,并且发现采自国内黑热病流行病学特征不同的地区的虫株间k-DNA 在同源... 详细信息

用光敏生物素标记利什曼原虫动基体DNA（k-DNA）,以打点杂交鉴定利什曼原虫。结果表明,在前鞭毛体数为10～10时,此法能显示出利什曼原虫不同的种和株间有明显的区别,并且发现采自国内黑热病流行病学特征不同的地区的虫株间k-DNA 在同源程度上存在差异,但用传统分类法则无法加以鉴别。此法为快速、简便地鉴定利什曼原虫及诊断黑热病提供了新的途径。

关键词：光敏生物素动基体DNA 打点杂交利什曼原虫鉴定

光敏生物素标记汉坦病毒cDNA探针及金标链亲和素检测系统在打点杂交中的应用

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军事医学科学院院刊 1990年第4期14卷 309-311页

作者：张贺秋陈德蕙王嘉玺陆应麟邹民吉郭宁汪劲松军事医学科学院基础医学研究所北京安贞医院心肺血管研究中心

本文采用近年来发展的光敏生物素标记核酸探针的方法,在国内首次成功地制备了光敏生物素标记汉坦病毒(Hantaan virus)M 与 S 片段 cDNA 探针及胶体金标记链亲和素(streptavidin),建立了 EHFV cDNA 探针—金标链亲和素检测系统的打点杂... 详细信息

本文采用近年来发展的光敏生物素标记核酸探针的方法,在国内首次成功地制备了光敏生物素标记汉坦病毒(Hantaan virus)M 与 S 片段 cDNA 探针及胶体金标记链亲和素(streptavidin),建立了 EHFV cDNA 探针—金标链亲和素检测系统的打点杂交新技术。初步用于检测同源汉坦病毒质粒,最低检测量低于18.5pg。

关键词：光敏生物素打点杂交 cDNA探针

检测丁型肝炎病毒RNA打点杂交法的建立及其应用

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中华实验和临床病毒学杂志 1994年第1期8卷 65-67页

作者：易炎杰汤少华詹美云中国预防医学科学院病毒学研究所

经缺口平移法以ａ－３２Ｐ－ｄＣＴＰ标记１．０ｋｂ的丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）ｃＤＮＡ片段为探针，采用蛋白酶Ｋ直接从血清中提取ＨＤＶＲＮＡ，建立了检测血清中ＨＤＶＲＮＡ的打点杂交法，其灵敏性可达１ｐｇ水平，与乙型肝炎病毒（... 详细信息

经缺口平移法以ａ－３２Ｐ－ｄＣＴＰ标记１．０ｋｂ的丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）ｃＤＮＡ片段为探针，采用蛋白酶Ｋ直接从血清中提取ＨＤＶＲＮＡ，建立了检测血清中ＨＤＶＲＮＡ的打点杂交法，其灵敏性可达１ｐｇ水平，与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ无交叉杂交反应；并应用于检测我国５９４９份ＨＢｓＡｇ阳性血清中的ＨＤＶＲＮＡ，共检出１７６份ＨＤＶＲＮＡ阳性，检出率为２．９５％。

关键词：丁型肝炎病毒打点杂交 RNA 检测

2009～2010年北京儿童腹泻中轮状病毒新VP4基因亚型的研究

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病毒学报 2011年第6期27卷 565-570页

作者：董慧瑾钱渊张又邓莉赵林清朱汝南陈冬梅刘立颖贾立平首都儿科研究所病毒研究室北京100020 首都儿科研究所附属儿童医院感染消化科北京100020

P[8]b基因亚型是国内外新近发现的A组人轮状病毒(HRV)VP4基因的一种新亚型,本研究旨在建立有效鉴别HRV P[8]a和P[8]b基因亚型及P[4]和P[6]基因型的VP4基因打点杂交分型方法,并运用此方法对2009～2010年首都儿科研究所附属儿童医院门诊... 详细信息

P[8]b基因亚型是国内外新近发现的A组人轮状病毒(HRV)VP4基因的一种新亚型,本研究旨在建立有效鉴别HRV P[8]a和P[8]b基因亚型及P[4]和P[6]基因型的VP4基因打点杂交分型方法,并运用此方法对2009～2010年首都儿科研究所附属儿童医院门诊及住院腹泻患儿中P[8]b基因亚型HRV的流行情况及其G/P基因组合情况进行研究。通过对GenBank序列数据库可检索到的国内外HRV各种P基因型及亚型的VP4基因序列应用相关软件进行基因分析,在不同基因型别间核苷酸变异密集而相同P基因型内核苷酸高度保守的的位置设计各型别探针,并分别以本实验室上传GenBank的北京HRV地方株P[4]和P[6]基因型及P[8]a和P[8]b亚型的VP4基因作为相应型别探针的合成引物的设计模板及探针经PCR合成的合成模板,合成地高辛素标记的DNA探针。经测序验证所建立的VP4基因杂交分型方法结果可靠。对门诊88例(55%,88/160)及住院79例(70.5%,79/112)HRV腹泻患儿的P分型结果显示P[8]a亚型仍为主要型别,前者为96.6%(85/88),而后者为62.0%(49/79);P[8]b亚型在住院HRV感染腹泻患儿中占较高比例(27.9%,22/79),虽然其在门诊HRV感染患儿中也存在,但仅占2.3%(2/88);另外单纯P[4]基因型HRV感染仅在住院腹泻患儿中检测到1例(1.3%,1/79),而P[6]基因型在门诊及住院HRV感染腹泻患儿中均未检测到;本组标本中HRV P[8]b亚型主要与G9基因型组合。本研究表明G9P[8]b型HRV在北京腹泻儿童中有流行。

关键词： A组轮状病毒 VP4基因 Pb基因亚型 G9基因型打点杂交

阿霉素肾病大鼠巨噬细胞CSF-1受体基因的表达

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免疫学杂志 1992年第3期8卷 162-164页

作者：刘利平陈重义李传富湖北医学院第二附属医院中心实验室武汉430071 湖北医学院第二附属医院儿科武汉430071 南京医学院病生教研室

为了了解肾病综合征时巨噬细胞的功能状态,本文采用打点杂交的方法,研究了阿霉素肾病大鼠腹腔巨噬细胞的CSF-1受体(CSF-1R)特异性mRNA的表达。结果表明,在未经γ-干扰素刺激时,正常大鼠及肾病大鼠的巨噬细胞均无CSF-1R基因表达;当经γ-... 详细信息

为了了解肾病综合征时巨噬细胞的功能状态,本文采用打点杂交的方法,研究了阿霉素肾病大鼠腹腔巨噬细胞的CSF-1受体(CSF-1R)特异性mRNA的表达。结果表明,在未经γ-干扰素刺激时,正常大鼠及肾病大鼠的巨噬细胞均无CSF-1R基因表达;当经γ-干扰素刺激后,肾病大鼠的巨噬细胞产生CSF-1R特异性m-RNA的量明显低于正常大鼠(P<0.05)。本文结果表明,巨噬细胞功能下降可能是肾病综合征时免疫功能低下的又一重要原因。

关键词：肾病综合征巨噬细胞打点杂交

尖锐湿疣中人乳头瘤病毒DNA检测及存在情况初探

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西安医科大学学报 1992年第2期13卷 123-125页

作者：董小平袁育康房益兰刘延娜楚雍烈任会勋西安医科大学微生物学教研室西安710061

尖锐湿疣的发病与人乳头瘤病毒密切相关。本文用打点杂交法检测了28例尖锐湿疣病理标本,其中14例与HPV-11探针杂交阳性,阳性率50%(14/28)。对其中杂交信号较强的9例进一步分别用BamI Ⅱ、PstI酶解,Southem转印后与HPV-11探针杂交,对病毒... 详细信息

尖锐湿疣的发病与人乳头瘤病毒密切相关。本文用打点杂交法检测了28例尖锐湿疣病理标本,其中14例与HPV-11探针杂交阳性,阳性率50%(14/28)。对其中杂交信号较强的9例进一步分别用BamI Ⅱ、PstI酶解,Southem转印后与HPV-11探针杂交,对病毒DNA存在形式进行分析,结果证实HPV-11在尖锐湿疣细胞中主要以游离形式存在。

关键词：人乳头瘤病毒尖锐湿疣打点杂交

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PCR检测犬腺病毒方法的建立

中国兽医学报 1994年第3期14卷 260-263页

作者：扈荣良黄耕林庆年袁书智夏咸柱农牧大学军事兽医研究所长春130062

利用人工合成的两条引物,对病犬肝脏和细胞培养物冻融上清中的1、2型犬腺病毒DNA进行多聚酶链式反应（PCR）检测;再将扩增产物进行同位素标记,与纯化病毒DNA进行打点杂交。扩增产物经电泳分析结果表明,其大小与设计的引物间的序列大小... 详细信息

利用人工合成的两条引物,对病犬肝脏和细胞培养物冻融上清中的1、2型犬腺病毒DNA进行多聚酶链式反应（PCR）检测;再将扩增产物进行同位素标记,与纯化病毒DNA进行打点杂交。扩增产物经电泳分析结果表明,其大小与设计的引物间的序列大小基本一致;扩增产物经标记后只与犬腺病毒DNA发生杂交反应,表明其为犬腺病毒特异性核酸片段。

关键词：犬腺病毒打点杂交聚合酶链反应

吗啡耐受和电针耐受时大鼠脑内血管紧张素Ⅱ的基因表达加速

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针刺研究 1989年第1期14卷 144-145页

作者：高而威王克威韩济生北京医科大学生理教研室

我们以往的工作表明，脑内血管紧张素Ⅱ(AⅡ)作为一种抗阿片物质参与吗啡耐受和电针耐受的形成。本工作探讨在此过程中脑内血管紧张素(Ang)基因表达是否加速。采用酚抽提法取大鼠脑组织总RNA，使用人工合成的Ang cDNA探针进行打点杂交... 详细信息

我们以往的工作表明，脑内血管紧张素Ⅱ(AⅡ)作为一种抗阿片物质参与吗啡耐受和电针耐受的形成。本工作探讨在此过程中脑内血管紧张素(Ang)基因表达是否加速。采用酚抽提法取大鼠脑组织总RNA，使用人工合成的Ang cDNA探针进行打点杂交。放射自显影结果表明，多次皮下注射吗啡或连续数小时电针的大鼠脑NAng mRNA含量明显升高。

关键词：血管紧张素Ⅱ 基因表达电针耐受吗啡耐受脑内加速 cDNA探针多次皮下注射大鼠脑组织放射自显影 RNA含量阿片物质工作探讨总RNA 人工合成打点杂交工作表抽提法 Ang

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DNA-RNA杂交检测传染性支气管炎病毒

中国兽医科技 1996年第4期26卷 16-17页

作者：王志亮杜元钊范根成朱万光刘佩兰孙淑芳吴时友农业部动物检疫所青岛266032

以光敏生物素标记传染性支气管炎病毒(IBV)Ark株3′末端及部分N蛋白基因的cDNA克隆片段,进而与提取的IBV标准毒株M_(41),H_(52)和分离的YG以及新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊炎病毒(IBDV)、病毒性关节炎病毒(AVAV)的标准株LaSota,D_(78)... 详细信息

以光敏生物素标记传染性支气管炎病毒(IBV)Ark株3′末端及部分N蛋白基因的cDNA克隆片段,进而与提取的IBV标准毒株M_(41),H_(52)和分离的YG以及新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊炎病毒(IBDV)、病毒性关节炎病毒(AVAV)的标准株LaSota,D_(78)和S_(1133)的RNA进行斑点杂交试验。结果IBV株皆呈阳性反应,而NDV、IBDV、AVAV则呈阴性反应,特别是分离的变异株YG呈强阳性反应,进一步从分子水平上证明该病毒确属IBV。

关键词：光敏生物毒探针传染性支气管炎病毒打点杂交