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扇贝裙边糖胺聚糖对OX-LDL致血管内皮细胞损伤的保护作用

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中国药理学通报 2004年第12期20卷 1389-1392页

作者：张俊玲刘赛王瑞臣韩纪举山东省药材技工学校山东泰安271000 山东省青岛大学医学院山东青岛266021 山东省泰山医学院附属医院山东泰安271000 山东省泰山医学院山东泰安271000

目的　研究扇贝裙边提取物糖胺聚糖 (SS GAG)对血管内皮细胞的保护作用 ,进而探讨其抗动脉粥样硬化 (AS)作用机制。方法　本研究采用氧化低密度脂蛋白 (OX LDL)建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株 (HUVEC ,CRL 2 4 80 )损伤模型 ,用... 详细信息

目的　研究扇贝裙边提取物糖胺聚糖 (SS GAG)对血管内皮细胞的保护作用 ,进而探讨其抗动脉粥样硬化 (AS)作用机制。方法　本研究采用氧化低密度脂蛋白 (OX LDL)建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株 (HUVEC ,CRL 2 4 80 )损伤模型 ,用MTT法和化学方法分别从细胞和分子水平观察SS GAG对血管内皮细胞增殖活性及细胞内一氧化氮 (NO)水平和内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)活性的影响。结果　OX LDL能明显抑制血管内皮细胞的增殖活性 (P <0 0 1) ,降低血管内皮细胞内NO水平及eNOS的活性 (P <0 0 1) ;用SS GAG(终浓度为 5 0 ,10 0 ,2 0 0mg·L-1)预处理后 ,能逆转上述效应 (P <0 0 1)。结论　OX LDL抑制血管内皮细胞的增殖 ,降低内皮型eNOS的活性 ,减少细胞内NO的生成 ;SS GAG对血管内皮细胞的脂质过氧化物损伤有保护作用。

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖血管内皮细胞低密度脂蛋白动脉粥样硬化

扇贝裙边糖胺聚糖对U937泡沫细胞形成过程中TNF-α、IL-6和IL-8表达的影响

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中国药科大学学报 2008年第6期39卷 563-565页

作者：孙福生鞠传霞刘赛青岛市市立医院青岛266011 青岛大学医学院青岛266021

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的U937泡沫细胞形成过程中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,以探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化作用的机制。方法:采用U937细胞... 详细信息

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的U937泡沫细胞形成过程中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,以探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化作用的机制。方法:采用U937细胞与80mg/Lox-LDL孵育48h建立U937泡沫细胞模型。将培养的U937细胞分为5组:正常细胞对照组、模型组(ox-LDL)和低、中、高浓度的SS-GAG药物组。分别检测不同处理组细胞分泌的TNF-α、IL-6和IL-8的含量。结果:培养的U937泡沫细胞中TNF-α、IL-6和IL-8表达量明显高于正常细胞组,而药物组中TNF-α、IL-6和IL-8表达量则明显降低,以800μg/mL药物组降低最为明显(P<0.01)。结论:SS-GAG能降低泡沫细胞形成过程中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8的表达从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖 U937泡沫细胞肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-6 白细胞介素-8 动脉粥样硬化

扇贝裙边糖胺聚糖抗肿瘤作用和对荷瘤小鼠免疫功能的影响

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中国医院药学杂志 2008年第2期28卷 90-93页

作者：邢军刘赛王海桃董传海高莹莱芜市人民医院山东莱芜271100 青岛大学医学院药理教研室山东青岛266021 西安市第一医院药剂科陕西西安710002

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)的抗癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:建立小鼠移植性S180实体瘤模型,观察SS-GAG的抑瘤率以及对荷瘤小鼠的体质量、肝质量、白细胞计数、脾指数、胸腺指数的影响,同时观察SS-GAG对荷瘤小鼠细... 详细信息

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)的抗癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:建立小鼠移植性S180实体瘤模型,观察SS-GAG的抑瘤率以及对荷瘤小鼠的体质量、肝质量、白细胞计数、脾指数、胸腺指数的影响,同时观察SS-GAG对荷瘤小鼠细胞免疫活性的影响。结果:SS-GAG可明显抑制S180实体瘤的生长,SS-GAG与环磷酰胺联用可使化疗药物的抗癌作用增强并能有效提升减少的白细胞;能显著增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力和杀伤活性,增强荷瘤小鼠脾淋巴细胞的转化增殖和NK细胞活性。结论:SS-GAG可显著抑制肿瘤生长,与环磷酰胺联用时有减毒增效作用;并能增强荷瘤小鼠的免疫功能。

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖抗肿瘤作用免疫活性

扇贝裙边糖胺聚糖的体外抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠抗氧化作用的研究

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中国药房 2008年第19期19卷 1459-1461页

作者：邢军刘赛王海桃亓翠菊山东莱芜市人民医院莱芜市271100 青岛大学医学院药理教研室青岛市266021

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)的体外抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠的抗氧化功能的影响。方法:用MTT法观察不同浓度的SS-GAG对体外培养的宫颈癌HeLa、人大肠癌LOVO、肺癌A549、神经胶质瘤U251等肿瘤细胞株增殖活性的影响;观察SS-GAG对小... 详细信息

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)的体外抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠的抗氧化功能的影响。方法:用MTT法观察不同浓度的SS-GAG对体外培养的宫颈癌HeLa、人大肠癌LOVO、肺癌A549、神经胶质瘤U251等肿瘤细胞株增殖活性的影响;观察SS-GAG对小鼠接种S180后30d内的存活时间;通过黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸显色法等多种生化方法观察SS-GAG对荷瘤小鼠血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响,并与对照比较。结果:与对照比较,SS-GAG可明显抑制HeLa、U251细胞生长,对LOVO、A549细胞生长也有一定的抑制作用;SS-GAG能显著延长S180腹水瘤小鼠的生存时间,提高荷瘤小鼠的T-AOC、SOD水平,降低MDA含量(P<0.01或P<0.05)。结论:SS-GAG可抑制肿瘤生长,并有一定的抗氧化作用。

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖抗肿瘤活性抗氧化作用小鼠

扇贝裙边糖胺聚糖对U937泡沫细胞形成过程中抗氧化酶、NO和细胞内Ca^(2+)的影响

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中国药房 2007年第4期18卷 256-258页

作者：孙福生刘赛鞠传霞王海桃青岛市市立医院青岛市266011 青岛大学医学院青岛市266021

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)抗动脉粥样硬化作用机制。方法:将培养的U937细胞分为正常组、模型组和SS-GAG不同浓度组,除正常组外,其余组加入氧化低密度脂蛋白造模后给予相应浓度药物进行处理,分别采用不同方法测定各组细胞超氧... 详细信息

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)抗动脉粥样硬化作用机制。方法:将培养的U937细胞分为正常组、模型组和SS-GAG不同浓度组,除正常组外,其余组加入氧化低密度脂蛋白造模后给予相应浓度药物进行处理,分别采用不同方法测定各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和一氧化氮(NO)含量及Ca2+水平。结果:各组中SOD含量无显著性差别;SS-GAG组中GSH-Px活性和NO含量与模型组比较明显升高,而细胞内Ca2+水平则明显降低。结论:SS-GAG可能通过增强GSH-Px活性和NO释放,同时降低细胞内Ca2+水平而发挥抗动脉粥样硬化作用。

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖抗氧化酶一氧化氮 Ca^2+ 动脉粥样硬化

扇贝裙边糖胺聚糖对过氧化氢损伤的内皮细胞释放血管活性物质的影响

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中国药房 2008年第7期19卷 496-498页

作者：高莹刘赛王海桃山东莱芜市人民医院莱芜市271100 青岛大学医学院青岛市266021

目的:观察扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞产生血管活性物质的影响。方法:用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304建立H2O2诱导的内皮细胞损伤模型组、不同浓度的SS-GAG组以及正常对照组,用放射免疫法测定... 详细信息

目的:观察扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞产生血管活性物质的影响。方法:用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304建立H2O2诱导的内皮细胞损伤模型组、不同浓度的SS-GAG组以及正常对照组,用放射免疫法测定培养液中6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)、内皮素(ET)的含量;用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)的含量。结果:与模型组比较,不同浓度的SS-GAG组均可使血管舒张因子6-keto-PGF1a、NO含量明显增加;缩血管因子TXB2、ET含量明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论:SS-GAG可能通过增加舒血管因子、降低缩血管因子的分泌来减轻H2O2对内皮细胞的氧化损伤。

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖内皮细胞过氧化氢血管活性物质

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扇贝裙边糖胺聚糖对泡沫细胞抑制作用的研究

扇贝裙边糖胺聚糖对泡沫细胞抑制作用的研究

作者：孙福生青岛大学

学位级别：硕士

目的:研究扇贝裙边提取物—糖胺聚糖(SS-GAG)对泡沫细胞的抑制作用,探讨SS-GAG的抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:1.采用体外培养的U937细胞和氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)建立单核细胞源性泡沫细胞模型,通过酶法检测细胞内总胆固醇(... 详细信息

目的:研究扇贝裙边提取物—糖胺聚糖(SS-GAG)对泡沫细胞的抑制作用,探讨SS-GAG的抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:1.采用体外培养的U937细胞和氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)建立单核细胞源性泡沫细胞模型,通过酶法检测细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)含量及胆固醇酯与总阻固醇的比值(CE/TC),研究SS-GAG对单核细胞源性泡沫细胞形成的影响。 2.利用体外培养的U937泡沫细胞,应用黄嘌呤氧化酶法、谷胱甘肽还原酶法观察SS-GAG对单核细胞源性泡沫细胞形成过程中抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响。 3.采用体外培养的U937单核细胞源性泡沫细胞模型,应用硝酸还原酶法观察SS-GAG对泡沫细胞形成过程中细胞分泌一氧化氮(NO)含量的影响。 4.应用酶联免疫吸附实验(ELISA)法,观察SS-GAG对U937单核细胞源性泡沫细胞形成过程中细胞的血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。 5.利用体外培养的U937单核细胞源性泡沫细胞模型,用酶联免疫吸附实验(ELISA)法,观察SS-GAG对泡沫细胞形成过程中细胞表达的肿瘤坏死因子(TNFα)、白介素6(I1-6)和白介素6(I1-8)的影响。 6.应用Fluo-3/AM荧光探针和流式细胞仪(FCM)观察SS-GAG对体外培养的U937单核细胞源性泡沫细胞形成过程中对细胞内钙离子水平的影响。 7.利用体外培养的猪血管平滑肌细胞(SMC)和OX-LDL建立平滑肌源性泡沫细胞模型,通过酶法检测细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)含量及胆固醇酯与总胆固醇的比值(CE/TC),研究SS-GAG对平滑肌细胞源性泡沫细胞形成的影响。 8.采用体外培养的猪血管平滑肌细胞源性泡沫细胞模型,应用黄嘌呤氧化酶法、谷胱甘肽还原酶法观察SS-GAG对平滑肌源性泡沫细胞形成过程中抗氧化酶SOD、GSH-PX活性的影响. 9.利用体外培养的猪血管平滑肌源性泡沫细胞模型,应用硝酸还原酶法观察SS-GAG对泡沫细胞形成过程中细胞分泌的NO含量的影响。结果:1.成功地建立了猪血管平滑肌源性泡沫细胞模型;在培养的平滑肌源性

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖氧化低密度脂蛋白泡沫细胞动脉粥样硬化

扇贝裙边糖胺聚糖对过氧化氢损伤的血管内皮细胞保护作用的研究

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扇贝裙边糖胺聚糖对过氧化氢损伤的血管内皮细胞保护作用的研究

作者：高莹青岛大学

学位级别：硕士

目的：通过观察扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对过氧化氢(HO)损伤的血管内皮细胞的合成及分泌功能的影响，进一步探讨扇贝裙边提取物(ESS)抗动脉粥样硬化(AS)的作用机理。方法：1、采用体外培养的方法，用人脐静脉内皮细胞株(HUVEC，ECV304... 详细信息

目的：通过观察扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对过氧化氢(HO)损伤的血管内皮细胞的合成及分泌功能的影响，进一步探讨扇贝裙边提取物(ESS)抗动脉粥样硬化(AS)的作用机理。方法：1、采用体外培养的方法，用人脐静脉内皮细胞株(HUVEC，ECV304)，建立HO诱导的血管内皮细胞损伤模型。2、用噻唑蓝(MTT)法观察SS-GAG对不同浓度的HO损伤的血管内皮细胞增殖活性的影响。3、用化学比色的方法测定分析SS-GAG对HO损伤的血管内皮细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放的影响。4、用酶促反应的方法测定内皮细胞内谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)的活性;用化学比色法测定内皮细胞内总的抗氧化能力(T-AOC)，分析SS-GAG对HO诱导的内皮细胞氧化损伤后GSH-PX及T-AOC活性的影响。5、用黄嘌呤氧化酶法测定内皮细胞内的超氧化物歧化酶(SOD)的活性;用硫代巴比妥酸反应物(TBARS)法测定内皮细胞内氧化损伤产物丙二醛(MDA)的含量;分析SS-GAG对受损细胞的SOD活性及损伤产物MDA的含量影响。6、建立HO诱导的血管内皮细胞氧化损伤模型，用硝酸还原酶法测定SS-GAG对血管内皮细胞的血管内皮舒张因子—一氧化氮(NO)含量的影响;用化学比色法测定SS-GAG对血管内皮细胞的一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。7、建立HO所致的血管内皮细胞氧化损伤模型，用放射免疫法测定内皮细胞合成分泌的前列环素(PGI)的稳定性代谢产物6-酮-前列环素F(PGF)和血栓素A(TX A)的稳定性代谢产物血栓素B(TX B)的含量，分析SS-GAG对血管内皮细胞氧化损伤后的合成分泌功能的影响。8、用放射免疫法测定血管内皮细胞合成分泌的缩血管生物活性多肽-内皮素ET的含量，分析SS-GAG对HO诱导的血管内皮细胞氧化损伤后细胞的合成分泌功能的影响。结果：1、HO在75、150、300、600、1500、3000、6000μmol／L浓度时对血管内皮细胞的增殖有明显抑制作用，HO的浓度与细胞增殖活性呈反比，HO的浓度越高，其抑制作用越强，二者有明显量效关系。***-GAG对低浓度的HO(75～600μmol／L)引起的VEC损伤有一定对抗作用，尤其是对抗HO75μmol／L时的作用显著(P＜0.05);但在高浓度HO(1500～6000μmol／L)存在时，SS-GAG则进一步抑制细胞的增殖活性(P＜0.05)。3、HO损伤组血管内皮细胞的LDH活性明显高于正常对照组;与损伤对照组比较，SS-GAG各保护组(50、100、200μg／ml)内皮细胞的LDH活性显著降低(P＜0.01)。4、与正常对照组比较，损伤对照组细胞内GSH-PX活性及T-AOC明显降低(P＜0.01);SS-GAG(50、100、200μg／ml)各保护组细胞内GSH-PX、T-AOC活力均明显高于损伤对照组(P＜0.05，P＜0.01)。5、与正常对照组比较，HO损伤组内皮细胞的SOD活性明显降低，MDA含量明显增加(P＜0.01);SS-GAG各保护组(50、100、200ug／ml)与损伤对照组比较，SOD活性明显增强，MDA含量明显减少(P＜0.01)。6、用SS-GAG(50、100、200ug／ml)预处理的各保护组与HO损伤对照组比较，其细胞内NO、NOS活性明显提高(P＜0.01)。7、HO损伤组与正常对照组比较，细胞培养液中的PGF。水平明显降低，TX B的含量明显增加(P＜0.01);SS-GAG在50、100、200ug／ml浓度时可逆转HO的作用，提高PGF水平，降低TX B含量(P＜0.01)。8、HO的损伤组可使血管内皮细胞中的ET表达增强，SS-GAG(50、100、200ug／ml)保护组可显著降低受损细胞ET的表达(P＜0.01)。结论：扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)能逆转低浓度过氧化氢对内皮细胞增殖活性的抑制;并能增强受损的内皮细胞内SOD和NOS的活性;提高细胞内GSH-PX的活性和细胞的T-AOC;有效降低脂质过氧化代谢产物MDA的产生和LDH的漏出;明显增加内皮依赖性舒张因子NO和PGF。等舒血管物质的含量;显著降低TXB和ET等缩血管物质的分泌。结果表明，扇贝裙边糖胺聚糖对过氧化氢所造成的血管内皮细胞的氧化损伤均有明显的保护作用。该作用在其防治动脉粥样硬化方面具有重要意义。

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖血管内皮细胞过氧化氢动脉粥样硬化

扇贝裙边糖胺聚糖对巨噬细胞脂蛋白代谢及脂蛋白受体表达的影响研究

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扇贝裙边糖胺聚糖对巨噬细胞脂蛋白代谢及脂蛋白受体表达的影响研...

作者：汪韶君青岛大学

学位级别：硕士

目的:研究扇贝裙边提取物—糖胺聚糖(SS-GAG)对巨噬细胞脂蛋白受体及脂蛋白氧化功能的影响,探讨SS-GAG的抗动脉粥样硬化(AS)的分子机制。方法:1.采用小鼠的单核巨噬细胞株(RAW264.7),建立氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的巨噬细胞损伤模... 详细信息

目的:研究扇贝裙边提取物—糖胺聚糖(SS-GAG)对巨噬细胞脂蛋白受体及脂蛋白氧化功能的影响,探讨SS-GAG的抗动脉粥样硬化(AS)的分子机制。方法:1.采用小鼠的单核巨噬细胞株(RAW264.7),建立氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的巨噬细胞损伤模型,运用MTT比色分析法研究SS-GAG对巨噬细胞的毒性作用及细胞氧化损伤后增殖活性的影响。 2.以体外培养的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7为模型,通过黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸显色法等多种生化的方法观察SS-GAG对巨噬细胞氧化低密度脂蛋白(LDL)过程中的产物丙二醛(MDA)和共轭双烯、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD),、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响。 3.以体外培养的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7为模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学的方法检测SS-GAG对OX-LDL损伤的巨噬细胞的低密度脂蛋白受体(LDL-R)蛋白表达和基因转录的影响。 4.以体外培养的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7为模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化的方法检测SS-GAG对OX-LDL损伤的巨噬细胞的高密度脂蛋白受体(SR-BI)蛋白表达和基因转录的影响。 5.以体外培养的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7为模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SS-GAG对OX-LDL损伤的巨噬细胞的清道夫受体CD36基因转录的影响。结果:***-GAG100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml、800μg/ml药物组巨噬细胞的增值活性与正常对照组比较无显著差别(P>0.05),表明实验所用浓度范围内SS-GAG对细胞无明显的毒性反应。 ***-LDL50μg/ml与小鼠的单核巨噬细胞RAW264.7作用24小时后能明显抑制RAW264.7细胞的增值活性。与模型组比较,SS-GAG各剂量组均可提高OX-LDL损伤引起的巨噬细胞增殖活性降低,以SS-GAG400μg/ml组作用最强,药物剂量小于400μg/ml时存在量效关系。 ***与巨噬细胞孵育24h后,细胞内的MPO活性升高、GSH-PX活性降低,脂质过氧化物MDA和共轭双烯的生成明显增多;与模型组比较,扇贝糖胺聚糖在100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml浓度时可明显提高GSH-PX活性,降低MPO活性,降低脂质过氧化物的生成,且存在一定的剂量效应关系。 ***-LDL50μg/ml与单核巨噬细胞RAW264.7作用24小时后能降低LDL—R的蛋白表

关键词：扇贝裙边糖胺聚糖氧化低密度脂蛋白巨噬细胞脂蛋白受体动脉粥样硬化