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昆虫学报 2015年第3期58卷 341-350页

作者：邓侨杨莲茹杨晓野王瑞史红蕾郑文青李军燕杨波内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

【目的】本研究旨在找出区分西方角蝇Haematobia irritans和截脉角蝇***幼虫龄期划分标准,为准确鉴定两种角蝇各龄幼虫,研究斯氏副柔线虫在角蝇体内的发育过程,以及制定防控骆驼斯氏副柔线虫病的有效措施等奠定基础。【方法】采用实验... 详细信息

【目的】本研究旨在找出区分西方角蝇Haematobia irritans和截脉角蝇***幼虫龄期划分标准,为准确鉴定两种角蝇各龄幼虫,研究斯氏副柔线虫在角蝇体内的发育过程,以及制定防控骆驼斯氏副柔线虫病的有效措施等奠定基础。【方法】采用实验室人工孵育两种角蝇幼虫的方法,分别测量不同发育阶段幼虫的虫体长、咽骨体长和咽骨体宽3项指标,利用SPSS Statistics 19.0统计软件对数据进行处理,结合Crosby生长法则和线性回归的方法进行分析,比较两种角蝇幼虫之间差异,以确定两种角蝇幼虫最佳龄期划分标准。【结果】结果表明,两种角蝇的幼虫均分为3龄,咽骨体是两种角蝇幼虫龄期划分的特征性结构,两种角蝇各龄幼虫相同指标的测量值随龄期的增长呈现出相同的增长规律。咽骨体长是划分两种角蝇幼虫龄期的最佳测量指标,咽骨体宽可作为分龄的辅助指标;两种角蝇相邻龄期幼虫的体长变化范围存在相互重叠,不能准确划分角蝇幼虫龄期。【结论】研究表明通过西方角蝇和截脉角蝇幼虫咽骨体的形态特征可简便、快速和准确地鉴定两种角蝇幼虫的龄期。

关键词：骆驼斯氏副柔线虫病西方角蝇截脉角蝇幼虫龄期咽骨体

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骆驼斯氏副柔线虫病传播媒介西方角蝇和截脉角蝇各虫态的系统形态学研究

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中国兽医学报 2017年第6期37卷 1077-1083页

作者：邓侨杨莲茹杨晓野王瑞李斌张伟杨波内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

本研究旨在完善西方角蝇和截脉角蝇各虫态的系统形态学资料,为野外采集两种角蝇各虫态样本的分类鉴定提供理论依据,进而为研究斯氏副柔线虫在角蝇体内发育过程,以及制定防控骆驼斯氏副柔线虫病的有效措施等奠定基础。通过实验室人工饲... 详细信息

本研究旨在完善西方角蝇和截脉角蝇各虫态的系统形态学资料,为野外采集两种角蝇各虫态样本的分类鉴定提供理论依据,进而为研究斯氏副柔线虫在角蝇体内发育过程,以及制定防控骆驼斯氏副柔线虫病的有效措施等奠定基础。通过实验室人工饲养角蝇,收集西方角蝇和截脉角蝇的卵、各龄幼虫、蛹和成蝇,详细观察并描述两种角蝇各虫态的形态结构,以明确两种角蝇各虫态之间的形态学差异。除西方角蝇和截脉角蝇1龄幼虫外,两种角蝇的卵、2龄幼虫、3龄幼虫、蛹和成蝇都存在可识别的形态学差异。本研究详细描述了西方角蝇和截脉角蝇各虫态的形态特征,并确定了多处可用于区分两种角蝇卵、2龄幼虫、3龄幼虫、蛹和成蝇的形态特征差异。

关键词：骆驼斯氏副柔线虫病西方角蝇截脉角蝇形态学

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西方角蝇和截脉角蝇18S rDNA的克隆及其分子系统学研究

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中国兽医杂志 2015年第12期51卷 36-38页

作者：史红蕾邓侨杨莲茹杨晓野王瑞郑文青杨波内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了弄清双翅目昆虫西方角蝇(***)和截脉角蝇(***)18S rDNA基因序列及其分子进化。本研究测定了两种角蝇的18S rDNA基因序列,将其在NCBI中Blast,并将序列与GenBank中已知9种双翅目昆虫的18S rDNA基因序列进行比较分析,找出它们的同源区... 详细信息

为了弄清双翅目昆虫西方角蝇(***)和截脉角蝇(***)18S rDNA基因序列及其分子进化。本研究测定了两种角蝇的18S rDNA基因序列,将其在NCBI中Blast,并将序列与GenBank中已知9种双翅目昆虫的18S rDNA基因序列进行比较分析,找出它们的同源区和多变区,利用全序列和最保守同源区分别构建系统发育树。结果表明,西方角蝇和截脉角蝇18S rDNA基因序列长度均为1 984 bp,二者同源性为96.4%,存在73个识别位点。两种角蝇与GenBank中已登陆西方角蝇的同源性分别为99.1%和95.7%。11种双翅目昆虫18S rDNA基因序列中均有三段保守程度较高的同源区,分别相当于西方角蝇18S rDNA基因序列中320 bp^693 bp,848 bp^1 181 bp和1 606 bp^1 849 bp,其中第一段同源区最为保守。本文在国内外首次报道截脉角蝇18S rDNA基因序列,并证明了西方角蝇18S rDNA基因序列高度保守。利用18S rDNA基因序列中最保守同源区构建的系统发育树,对11种双翅目昆虫分类更符合传统形态学分类结果。

关键词：西方角蝇截脉角蝇 18S rDNA 序列分析

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西方角蝇和截脉角蝇rDNA的ITS基因序列对比研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2009年第1期16卷 32-37页

作者：王俊杰杨莲茹杨晓野李林川霍玉福范永生内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018 内蒙古动物疾病预防控制中心呼和浩特010010 内蒙古赤峰市疾病预防控制中心内蒙古赤峰024000 内蒙古巴彦淖尔市乌拉特后旗兽医局内蒙古巴彦淖尔015543

为了解决传统方法研究蝇类传播媒介费时费力及难以准确鉴定其幼虫等问题,本研究以采自内蒙古北部戈壁地区骆驼及其粪便上的西方角蝇和截脉角蝇为研究对象,将2种角蝇rDNA的ITS序列片段进行了测序分析。运用DNAStar5.0软件中的MegAlign工... 详细信息

为了解决传统方法研究蝇类传播媒介费时费力及难以准确鉴定其幼虫等问题,本研究以采自内蒙古北部戈壁地区骆驼及其粪便上的西方角蝇和截脉角蝇为研究对象,将2种角蝇rDNA的ITS序列片段进行了测序分析。运用DNAStar5.0软件中的MegAlign工具和ClustalW程序,对2种角蝇的ITS序列进行了分析。结果表明,西方角蝇扩增的ITS片段大小为1047bp,包含部分的18S、28S及全部的ITS1（464bp）、5S（122bp）、ITS2a（29bp）、2S（30bp）和ITS2（349bp）序列;截脉角蝇扩增的ITS片段大小为1015bp,包含部分的18S、28S及全部的ITS1（457bp）、5S（122bp）、ITS2a（29bp）、2S（30bp）和ITS2（324bp）序列。2种角蝇的ITS序列（去掉18S及28S部分后）差异显著,有190个识别位点,差异性达到14.9%。上述结果为进一步研究西方角蝇和截脉角蝇的分子生物学特性奠定了重要基础。

关键词：西方角蝇截脉角蝇核糖体DNA ITS

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角蝇体内斯氏副柔线虫的观察及COI基因特异性序列分析

角蝇体内斯氏副柔线虫的观察及COI基因特异性序列分析

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作者：李文生内蒙古农业大学

学位级别：硕士

斯氏副柔线虫（Parabronema skrjabini）是一种寄生于骆驼皱胃的寄生性线虫,其中间宿主是西方角蝇（Haematobia irritans）和截脉角蝇（Haematobia titillans）。为了明确我国双峰驼养殖地区斯氏副柔线虫对角蝇的感染情况、寄生部位,斯... 详细信息

斯氏副柔线虫（Parabronema skrjabini）是一种寄生于骆驼皱胃的寄生性线虫,其中间宿主是西方角蝇（Haematobia irritans）和截脉角蝇（Haematobia titillans）。为了明确我国双峰驼养殖地区斯氏副柔线虫对角蝇的感染情况、寄生部位,斯氏副柔线虫所在副柔属的归科问题,以及寻找一种适合于该病生前诊断方法的遗传标记。本文统计了双峰驼生活环境中角蝇体内斯氏副柔线虫的感染率和感染强度,明确了其寄生部位;并利用PCR技术扩增分析了斯氏副柔线虫线粒体DNA的COI基因序列,在此基础上设计出了特异性引物并加以验证。结果如下: 采用生物解剖法对采集于内蒙古巴彦淖尔市乌拉特后旗的176只角蝇（西方角蝇64只,截脉角蝇112只）进行了剖解,共有38只为阳性,感染率为21.59%。其中西方角蝇中13只为阳性,感染率为20.31%,最大感染强度为32条/只,平均感染强度是8条/只;截脉角蝇中25只为阳性,感染率为22.32%,最大感染强度为23条/只,平均感染强度是9条/只。斯氏副柔线虫幼虫主要寄生在角蝇的消化道内。利用PCR方法,以线虫COI基因通用引物NTF、NTR扩增内蒙古不同地区的斯氏副柔线虫线粒体DNA COI基因。将扩增产物纯化后克隆并测序。经DNAStar5.0和MEGA4.0分析,结果表明:扩增出的COI基因序列均为689bp,不同地区样本间的COI基因无差异;斯氏副柔线虫COI基因与旋尾目（Spirurata）中旋尾科（Spiruridae）、柔线科（Habronematidae）和吸吮科（Thelaziidae）,丝虫目（Filariata）盘尾科（Onchocercidae）某些线虫的同源性为79.8%～87.4%,遗传距离为0.137～0.232。基于COI基因构建的系统发育树表明,副柔属归于柔线科更符合生物进化的规律。以COI基因设计并合成特异性引物STF、STR,利用PCR方法对斯氏副柔线虫基因组进行特异性扩增后可得到约600bp的条带。敏感性试验表明,含有10个虫卵的DNA模板即可通过PCR扩增出来;特异性试验表明,该对引物具有较好的种特异性。本研究首次报道了斯氏副柔线虫COI基因序列,为斯氏副柔线虫提供了一个可靠的遗传标记,为建立斯氏副柔线虫病分子生物学生前诊断方法奠定了重要基础。

关键词：双峰驼西方角蝇截脉角蝇斯氏副柔线虫 COI基因序列分析

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骆驼生活环境蝇种鉴定及角蝇ITS序列检测与分析

骆驼生活环境蝇种鉴定及角蝇ITS序列检测与分析

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作者：王俊杰内蒙古农业大学

学位级别：硕士

为了调查我国骆驼斯氏副柔线虫病传播媒介的种类,并建立一种能快速准确筛选疑似传播媒介的分子生物学方法,本研究采集内蒙古戈壁地区骆驼主产地骆驼生活环境中的蝇类,利用传统的形态学分类方法进行了种属鉴定;并根据斯氏副柔线虫的ITS... 详细信息

为了调查我国骆驼斯氏副柔线虫病传播媒介的种类,并建立一种能快速准确筛选疑似传播媒介的分子生物学方法,本研究采集内蒙古戈壁地区骆驼主产地骆驼生活环境中的蝇类,利用传统的形态学分类方法进行了种属鉴定;并根据斯氏副柔线虫的ITS全序列设计引物,从各种蝇体内扩增斯氏副柔线虫的ITS序列,进行可疑传播媒介的筛选;并对疑似传播媒介-西方角蝇和截脉角蝇rDNA的ITS基因序列进行了扩增和测序,用DNAStar5.0软件进行了比对分析。结果表明:内蒙古戈壁地区骆驼主产地骆驼生活环境中有3科5属11种蝇;从其中的西方角蝇中扩增出一段与斯氏副柔线虫ITS序列同源性达99.2%的片段;西方角蝇和截脉角蝇的ITS基因片段大小分别为994bp和962bp,两种角蝇ITS基因序列的遗传相似性为86.8%,差异性为14.9%,差异包括碱基的插入与缺失、替换与颠换,共有190个识别位点,并全部集中在ITS1和ITS2区。论文详细描述了骆驼生活环境中各种蝇的形态学特征,附有各蝇种的整体彩图和具有鉴定意义的局部彩图,弥补了一般检索工具书只有文字描述而没有图片的缺陷,编制了骆驼生活环境蝇种检索表;探索出了比传统方法省时省力,且能快速筛选斯氏副柔线虫可疑传播媒介的分子生物学方法;填补了国内外在西方角蝇和截脉角蝇分子生物学研究方面的一些空白,为西方角蝇和截脉角蝇及其幼虫的种类鉴定提供了分子识别标记,对今后角蝇属种系发生关系和分类的研究具有重要的意义。上述研究成果为弄清我国骆驼斯氏副柔线虫病的确切传播媒介奠定了重要基础。

关键词：骆驼斯氏副柔线虫传播媒介西方角蝇截脉角蝇 ITS

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