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中华老年医学杂志 2005年第7期24卷 508-510页

作者：杨艳兰柳洁薛延山西省人民医院内分泌科北京积水潭医院创伤骨科研究所

目的观察2β(3羟丙氧)骨化三醇(ED71)对体外培养人成骨样细胞增殖与分化的影响,进一步探讨ED71治疗骨质疏松的机制。方法采用塞唑蓝(MTT)分析法检测ED71对体外培养OS732人成骨样细胞增殖作用与效价。采用培养细胞匀浆测单位蛋白碱性磷... 详细信息

目的观察2β(3羟丙氧)骨化三醇(ED71)对体外培养人成骨样细胞增殖与分化的影响,进一步探讨ED71治疗骨质疏松的机制。方法采用塞唑蓝(MTT)分析法检测ED71对体外培养OS732人成骨样细胞增殖作用与效价。采用培养细胞匀浆测单位蛋白碱性磷酸酶活性,培养基中骨钙素含量分析及原位杂交方法检测ED71对OS732人成骨样细胞分化的影响。结果培养第4天,10-7mol/LED71显著抑制成骨样细胞增殖(P成骨样细胞的作用不明显。培养4d后培养基中骨钙素水平在10-7mol/LED71组变化不大,在10-8mol/L、10-9mol/LED71组骨钙素水平显著增高(P成骨样细胞增殖高剂量作用显著,促进成骨样细胞分化较低剂量显著。

关键词： OS-732 人成骨样细胞增殖与分化骨化三醇成骨样细胞增殖 mol/L 转化生长因子-β 碱性磷酸酶活性细胞增殖作用原位杂交方法氧体外培养细胞分化 TGF-β 骨钙素骨质疏松培养细胞 0.05 酶比活性培养基分析法

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甲状旁腺素对成骨样细胞增殖及β-微管蛋白的影响

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中医正骨 2003年第6期15卷 9-10页

作者：刘彬曲耀华王玉兰张维娟河南大学医学院开封475001

为研究甲状旁腺素 (PTH)对大鼠成骨肉瘤细胞UMR10 6细胞增殖及 β 微管蛋白表达的影响。采用流式细胞技术测定DNA合成的变化并进行细胞周期分析 ,用Northernblotting方法观察β 微管蛋白的表达量。运用间接免疫荧光技术及Westernblottin... 详细信息

为研究甲状旁腺素 (PTH)对大鼠成骨肉瘤细胞UMR10 6细胞增殖及 β 微管蛋白表达的影响。采用流式细胞技术测定DNA合成的变化并进行细胞周期分析 ,用Northernblotting方法观察β 微管蛋白的表达量。运用间接免疫荧光技术及Westernblotting方法观察微管聚合状态及微管蛋白的表达。结果显示 ,用PTH处理UMR10 6细胞 12小时后 ,S期细胞比例明显增大 ,提示PTH具有促该细胞株增殖作用。同时β 微管蛋白的mRNA及蛋白质表达量增加 ,β 微管聚合加强。表明 β 微管蛋白的合成及聚合与细胞增殖间可能存在着一定关系。

关键词：甲状旁腺素成骨样细胞增殖 β-微管蛋白大鼠骨肉瘤流式细胞技术测定细胞周期

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甲状旁腺素促成骨样细胞增殖作用及其与钾离子通道的关系

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中医正骨 2002年第6期14卷 7-8页

作者：曲耀华刘彬张维娟谷静丽河南大学医学院开封4715001

为研究甲状旁腺素 (PTH)促大鼠成骨样肉瘤细胞 (UMR10 6 )增殖作用及与钾离子通道活动的关系。采用磺基罗丹明(SRB)染色法观察细胞增殖改变并用膜片钳技术记录细胞膜钾离子通道电流的变化。同时用 3H- Td R掺入法测定 DNA合成的改变。... 详细信息

为研究甲状旁腺素 (PTH)促大鼠成骨样肉瘤细胞 (UMR10 6 )增殖作用及与钾离子通道活动的关系。采用磺基罗丹明(SRB)染色法观察细胞增殖改变并用膜片钳技术记录细胞膜钾离子通道电流的变化。同时用 3H- Td R掺入法测定 DNA合成的改变。结果显示 ,PTH可以明显地促进 UMR10 6细胞的增殖 ,且使 3H- Td R掺入率增加 77.14 %。在含有 PTH(10 - 8mol· L- 1 )的培养液中培养 12 h后 ,钾通道电流比对照组有明显增加 ;而且用钾通道阻断剂后 ,3H- Td R掺入率下降。表明其可促进大鼠成骨样肉瘤的 DNA合成和细胞增殖。

关键词：成骨样细胞增殖甲状旁腺素钾离子通道实验研究

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杜仲叶提取物对MC3T3-E1细胞体外作用及其机制的实验研究

杜仲叶提取物对MC3T3-E1细胞体外作用及其机制的实验研究

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作者：陈虹浙江大学

学位级别：硕士

背景：颌骨可因外伤、肿瘤、炎症等多种因素而造成骨缺损，颌骨缺损除直接导致颜面畸形外，还可引起严重的功能障碍，给病人造成语言、吞咽等功能的障碍，及在生理、心理、社会等方面的不良影响。自1912年Macewen报道利用自体肋骨修复... 详细信息

背景：颌骨可因外伤、肿瘤、炎症等多种因素而造成骨缺损，颌骨缺损除直接导致颜面畸形外，还可引起严重的功能障碍，给病人造成语言、吞咽等功能的障碍，及在生理、心理、社会等方面的不良影响。自1912年Macewen报道利用自体肋骨修复下颌骨缺损获得成功以来，各国学者在颌骨缺损重建方面进行了大量的研究。颌骨缺损传统的治疗方法主要是骨移植，其中包括自体骨移植、异体、异种骨移植和人工骨代用品。近年来，随着生物学和材料科学的发展，组织工程学作为高新技术新领域的一门多学科交叉的新兴边缘学科随之应运而生，并得到了迅速的发展，利用组织工程学方法构建的组织工程骨已成为骨移植的又一研究热点。杜仲，为杜仲科植物杜仲(Eucommia ulmoids Oliv．)的干燥树皮，是我国特有的名贵中药，中国药典规定其树皮作为中药杜仲入药。杜仲皮一般需生长15-20年，而叶的资源相对丰富易得，研究证实杜仲叶与皮的化学成分基本一致，具有同等功效，可以以叶代皮，具有补肝肾、强筋骨等作用。杜仲叶的化学成分为：1)苯丙素类化合物：包括谷甾醇(13-sistosterol)、熊果酸(ursolic acid)、绿原酸(chlorogenic acid)。2)环烯醚萜类：杜仲醇(eneommiol)、京尼平苷酸(geniposidic acid)、京尼平苷(geniposide)、桃叶珊瑚苷(aucubin)。3)黄酮类：山奈酚(kaempferol)、斟皮素(quercetin)。研究表明，杜仲叶提取物的有效成分对成骨细胞的增殖具有明显的促进作用。机体在外伤等应激条件下都会由超氧化物歧化酶(SOD)、氧化酶等催化产生活性氧(reactive oxygenspecies，ROS)，如超氧阴离子((O2)、过氧化氢(H2O2)、羟基自由基(HO·)等。这对于细胞信号传递、吞噬细胞的功能及创口愈合的快慢都有重要的作用。目的探讨不同浓度的杜仲叶提取物对体外培养的成骨细胞增殖作用的影响，并根据其体外活性测试的结果，选择杜仲叶提取物最佳成骨作用浓度;探讨杜仲叶提取物(Euec)对HO诱导所致的成骨细胞凋亡的抑制作用及其分子机制。方法：通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法进行细胞毒性实验，流式细胞计数法进行细胞增殖实验，以探讨杜仲叶的成骨作用;以HO诱导小鼠成骨样细胞(MC3T3-E1)氧化损伤，建立细胞凋亡模型，经适当浓度Euec的干预，采用Western blot，RT-PCR方法测定细胞的存活率，细胞的凋亡率，半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、-6、-7、-9的相关凋亡蛋白及基因表达。探讨Euec对HO所致MC3T3-E1凋亡的抑制作用及其可能的机制。结果：由实验可知：800umol/L的HO可致使MC3T3-E1细胞凋亡;杜仲叶提取物(Euec)(6.25ug/ml)可显著抑制HO所致细胞的氧化损伤，提高细胞的存活率;可明显降低细胞中凋亡细胞百分比;可抑制半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶Caspase-3、Caspase-6、Caspase-7、Caspase-9的蛋白和基因表达。结论： Euec对MC3T3-E1的增殖有促进作用，可以用于骨缺损修复;Euec能明显抑制HO诱导的MC3T3-E1细胞的凋亡作用，减轻MC3T3-E1细胞的氧化损伤，其机制可能与抑制Caspase-3、-6、-7、-9的激活有关。

关键词：杜仲叶提取物药理作用成骨样细胞增殖氧化损伤超氧化物歧化酶半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶

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中国医学文摘（外科学） 2008年第1期27卷 56-58页

骨质疏松与骨整合（综述）;17β-雌二醇对骨外膜来源成骨样细胞增殖及基因表达的影响；椎管内修复臂丛神经损伤的解剖及临床应用研究;骨水泥阻塞髓腔后骨内压升高对远侧关节影响的实验研究;放射性骨显像在组织工程骨修复骨缺损实验中的... 详细信息

骨质疏松与骨整合（综述）;17β-雌二醇对骨外膜来源成骨样细胞增殖及基因表达的影响；椎管内修复臂丛神经损伤的解剖及临床应用研究;骨水泥阻塞髓腔后骨内压升高对远侧关节影响的实验研究;放射性骨显像在组织工程骨修复骨缺损实验中的应用;同种异体组织工程骨猪皮下植入后IL-2及TNF-α的表达；

关键词：成骨样细胞增殖 17β-雌二醇组织工程骨臂丛神经损伤放射性骨显像实验研究 TNF-α 骨质疏松

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