检索结果-南通市图书馆

作者：张晓蕊成都体育学院

学位级别：硕士

目的:通过检测细胞凋亡学指数、sirt1及其介导的sirt1/Runx2通路和sirt1/PPARγ通路在大鼠肌腱病中的表达,探究肌腱病的发生机制,并观察郑氏一号新伤药对肌腱病大鼠模型的防治效果,为该药的临床使用提供理论依据。方法:将72只雄性Wista... 详细信息

目的:通过检测细胞凋亡学指数、sirt1及其介导的sirt1/Runx2通路和sirt1/PPARγ通路在大鼠肌腱病中的表达,探究肌腱病的发生机制,并观察郑氏一号新伤药对肌腱病大鼠模型的防治效果,为该药的临床使用提供理论依据。方法:将72只雄性Wistar大鼠随机分为K组(空白对照组),T组(单纯跳跃组)和F组(敷药跳跃组),每组再按取材时间点随机分为4周组,6周组,8周组,每组8只。K组自然喂养,T组、F组采用“电击跳跃法”造模,且F组从第4周开始外敷郑氏一号新伤药干预。观察大鼠一般情况(毛发、神态、体力状况等)和有效跳跃次数后,分别于第4、6、8周末取跟腱组织,HE染色观察组织形态学变化,Tunel法检测细胞凋亡指数,PCR及Western Bolt法检测大鼠跟腱内去乙酰化酶sirt1、转录调节因子Runx2和PPARγ的mRNA和蛋白表达。结果:1.大体情况观察:大体观察:K组大鼠一般情况良好,造模组(T组、F组)大鼠跳跃后表现为神态倦怠,皮毛凌乱,体力下降,但F组优于T组。2.有效跳跃次数:造模组(T组、F组)跳跃过程中整体呈下降趋势,且F组优于T组,在4～7周存在显著性差异。3.HE染色组织形态学观察:K组4、6、8周腱纤维均呈波状排列,无明显差异。第4周,T、F组腱纤维排列紊乱,部分表现成骨细胞与脂肪细胞略有增多。第6周,与第4周相比,T组排列紊乱,成骨与脂肪细胞稍有增多;F组腱纤维排列轻微紊乱、稀疏,成骨细胞与脂肪细胞未见明显变化。第8周,与第6周相比,T组部分纤维断裂,成骨细胞与脂肪细胞明显增多;F组成骨细胞与脂肪细胞未见明显变化。4.细胞凋亡学检测:(1)组内分析:K组、F组从第4周到第8周整体呈下降趋势,T组呈缓慢上升趋势。K组、T组组内无显著性差异,P>0.05;F组内第4周与第8周间存在显著性差异,P0.05。(2)蛋白表达:(1)组内分析:4～8周时,T组呈现先下降后上升的趋势。三组内均不存在显著性差异,P>0.05,(2)组间分析:第8周时,K、T组之间存在显著性差异,P0.05。(2)组间分析:第4周时,T组、F组间存在显著性差异,P0.05。(2)组间分析:第8周时,K、F组与T组之间均存在显著性差异,P0.05。(2)组间分析:第8周时,K、F组与T组间均存在显著性差异,P成,随着腱细胞凋亡加剧,腱病不断加重。2在肌腱病形成过程中可发现sirt1的高表达,且通过Sirt1/Runx2通路影响肌腱病进程中的骨化进程,通过Sirt1/PPARγ通路影响肌腱病进程中的脂肪化进程。3外敷郑氏一号新伤药可有效延缓大鼠肌腱病的发生发展进程,其机制与抑制肌腱细胞凋亡、降低Runx2表达抑制骨化和降低PPARγ表达抑制脂肪化进程有关。

关键词：腱病郑氏一号新伤药细胞凋亡 sirt1 成骨成脂

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破骨细胞骨吸收上清液对骨髓间充质干细胞增殖分化的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第3期30卷 241-244,249页

作者：邵秉一于洋蒋程程帅逸戚朦景欢尚冯青金岩杨德琴重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆400015 杭州市红十字会医院口腔科浙江杭州310003 第四军医大学组织工程中心陕西西安710032

目的研究破骨细胞骨吸收活动中的分泌产物对骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响。方法诱导小鼠脾脏细胞为破骨细胞,用抗酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)染色。破骨细胞与牛骨磨片共培养,扫描电镜观察骨吸收陷窝。收集骨吸收实验破骨细胞培养上... 详细信息

目的研究破骨细胞骨吸收活动中的分泌产物对骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响。方法诱导小鼠脾脏细胞为破骨细胞,用抗酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)染色。破骨细胞与牛骨磨片共培养,扫描电镜观察骨吸收陷窝。收集骨吸收实验破骨细胞培养上清液作用于小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),MTT法检测BMSC生长曲线;成骨诱导后钙化结节茜素红染色法检测BMSC成骨能力;成脂诱导后油红O染色检测BMSC成脂能力;Western blot法检测小鼠BMSC成骨相关蛋白RUNX2、碱性磷酸酶(ALP)及成脂相关蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的表达。结果 TRAP染色、扫描电镜显示脾脏细胞可诱导分化为具有骨吸收能力的破骨细胞;与对照组相比,加入破骨细胞培养上清液,BMSC的增殖受到抑制,成骨分化增强,成脂分化减弱(P成骨分化增强,成脂分化减弱的作用。

关键词：破骨细胞骨髓来源的间充质干细胞增殖成骨成脂

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