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中国组织工程研究 2017年第33期21卷 5287-5292页

作者：李俊男陈嘉勇张毅陆晓涛昆明医科大学第四附属医院骨与创伤外科云南省昆明市650000 昆明医科大学第二附属医院急诊医学部云南省昆明市650000

背景:研究发现妊娠与干细胞的活性有明显关联。然而,尚未见到有关妊娠对脂肪干细胞影响的相关报道。目的:评估妊娠状态对大鼠脂肪干细胞增殖能力和诱导分化为类肝细胞潜能的影响。方法:分别获取正常大鼠和妊娠大鼠2种来源的脂肪干细胞... 详细信息

背景:研究发现妊娠与干细胞的活性有明显关联。然而,尚未见到有关妊娠对脂肪干细胞影响的相关报道。目的:评估妊娠状态对大鼠脂肪干细胞增殖能力和诱导分化为类肝细胞潜能的影响。方法:分别获取正常大鼠和妊娠大鼠2种来源的脂肪干细胞进行原代分离、培养和鉴定。利用CCK8法检测脂肪干细胞的增殖能力。采用相同肝诱导培养基,诱导脂肪干细胞分化为类肝细胞。荧光定量PCR检测诱导第0,7,14,21天时肝细胞标志物的表达;ELISA方法检测白蛋白分泌和尿素合成水平。结果与结论:(1)成功分离培养出正常大鼠和妊娠大鼠来源脂肪干细胞,经流式细胞术鉴定符合干细胞一般特性(CD44+/CD45-/CD90+);(2)与正常大鼠来源脂肪干细胞相比较,妊娠大鼠来源脂肪干细胞增殖更快,诱导分化为成骨、成脂和成肝细胞时间更短,肝细胞标志物变化更加迅速,白蛋白分泌和尿素合成能力更高;(3)妊娠对脂肪干细胞的增殖和分化具有促进作用,推测可能与雌激素水平相关。

关键词：干细胞脂肪干细胞妊娠细胞增殖成肝分化

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官内膜干细胞的成肝分化及其对肝损伤修复作用的研究

官内膜干细胞的成肝分化及其对肝损伤修复作用的研究

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作者：林建浙江大学

学位级别：硕士

本研究目的为探讨宫内膜干细胞的体外成肝诱导分化及其在肝脏损伤中发挥的修复作用。首先,我们从招募的志愿者经血中分离出单个核细胞进行体外传代培养并对获得的细胞进行间充质干细胞鉴定。宫内膜干细胞不具有致瘤性,可以呈单层贴壁生... 详细信息

本研究目的为探讨宫内膜干细胞的体外成肝诱导分化及其在肝脏损伤中发挥的修复作用。首先,我们从招募的志愿者经血中分离出单个核细胞进行体外传代培养并对获得的细胞进行间充质干细胞鉴定。宫内膜干细胞不具有致瘤性,可以呈单层贴壁生长,可以24小时倍增一次,为典型的棒状或长梭状的成纤维细胞样细胞。流式细胞术分析这类细胞均表达CD44,CD73,CD90,和CD29,而不表达CD117,CD34, CD45,和HLA-DR。宫内膜干细胞在体外可以被诱导分化为成骨细胞和成脂细胞。其次,我们研究了宫内膜干细胞的体外成肝诱导分化能力。宫内膜干细胞在与HGF、FGF4、OSM以及DEX等共培养后,逐渐向上皮细胞样细胞形态变化。诱导分化后的细胞能够表达ALB和AFP蛋白,以及基因ALB、AFP、CK18、CK19、CYP1A1和CYP3A4等。表达谱芯片分析可见分化后的细胞能表达33个肝脏相关基因,这些基因在原代肝脏细胞中表达,而宫内膜干细胞中则不表达。另外,诱导分化后细胞功能验证显示,其具有糖原合成、ICG排泌和尿素合成功能等。这些数据可以初步证实,所诱导的细胞是具有肝细胞表型且能发挥部分肝脏细胞功能的较成熟的细胞。最后,为了验证移植细胞能否参与肝损伤修复过程,小鼠肝脏部分切除后,分别移植宫内膜干细胞和诱导分化后细胞,移植后10天,移植分化组小鼠肝功能较移植宫内膜干细胞组恢复明显,具有显著性差异。移植8周后,在小鼠肝脏中可以检测到移植细胞的存在,并且移植宫内膜干细胞在受体肝脏内发生分化。Fah-/小鼠作为移植受体,移植细胞后8周,发现诱导分化组小鼠肝脏可见大量Fah阳性细胞,而移植宫内膜干细胞组则仅有少量散在分布的Fah阳性细胞存在。这些数据说明,分化后细胞可以部分重建小鼠肝脏,未分化细胞可以发生分化但整体水平较低。结果显示,移植细胞可以随血流迁移至小鼠肝脏,并在小鼠肝脏内达到一定程度的重建。综上所述,宫内膜干细胞及其来源的细胞在肝脏疾病治疗中可以发挥一定作用。

关键词：宫内膜干细胞成肝分化肝损伤

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