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低氧对类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞表达葡萄糖-6-磷酸异构酶及细胞周期的影响

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中华风湿病学杂志 2015年第5期19卷 327-331,I0001页

作者：陆英宗明樊莎莎卢添宝戴兴苗范列英同济大学附属东方医院检验科上海200120

目的研究将通过对骨性关节炎（OA）和RA患者的关节滑膜成纤维样细胞（FLS）进行正常氧和低氧培养后,观察FLS表达葡萄糖-6-磷酸异构酶（G6PI）和缺氧诱导因子（HIF）-1α的变化情况及对细胞周期的影响.方法原代培养OA和RA患者的滑膜成... 详细信息

目的研究将通过对骨性关节炎（OA）和RA患者的关节滑膜成纤维样细胞（FLS）进行正常氧和低氧培养后,观察FLS表达葡萄糖-6-磷酸异构酶（G6PI）和缺氧诱导因子（HIF）-1α的变化情况及对细胞周期的影响.方法原代培养OA和RA患者的滑膜成纤维细胞,分别在正常氧和3％氧环境中培养24 h,实时荧光定量PCR检测G6PI、HIF-1α mRNA表达水平,蛋白印迹法检测G6PI、HIF-1α蛋白表达水平.流式细胞仪检测细胞周期.采用t检验、Mann-Whitney U检验进行统计学处理.结果与正常氧培养相比,经3％氧培养RA FLS G6PI mRNA的升高倍数（2.6±0.4）明显高于OA FLS的升高倍数（1.5±0.4）（t=4.94,P＜0.05）;RA FLS G6PI蛋白表达水平明显高于OA FLS（t=2.81,P＜0.05）.与正常氧培养相比,RA FLS经3％氧培养HIF-1α mRNA的升高倍数（2.9±0.8）明显高于OA FLS的升高倍数（1.4±0.4）（t=4.51,P＜0.05）;RA FLS HIF-1α蛋白表达水平明显高于OA FLS（t=14.54,P＜0.05）.在3％氧低氧培养环境中,与正常氧培养相比,RA FLS G1期显著减少（t=11.31,P＜0.05）,S期（t=-7.62,P＜0.05）、G2期显著增加（t=-9.95,P＜0.05）.结论在RA低氧环境中,G6PI、HIF-1αmRNA和蛋白水平在FLS中的表达增高,FLS细胞增殖加快.

关键词：关节炎,类风湿葡糖-6-磷酸异构酶缺氧诱导因子1,α亚基细胞周期成纤维样细胞

类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞的蛋白质组学研究

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中华临床医师杂志（电子版） 2011年第17期5卷 5027-5032页

作者：张慧邱潮林瞿国英宗明孙立山范列英上海市东方医院同济大学附属东方医院医学检验科 200120 上海市浦东新区公利医院检验科上海市浦东新区潍坊社区卫生中心

目的研究类风湿关节炎(RA)和骨性关节炎(OA)关节滑膜成纤维样细胞(FLS)蛋白质组的表达差异,分析差异蛋白在RA关节滑膜增生中的作用。方法原代培养关节滑膜FLS,抽提细胞总蛋白并定量,通过高分辨双向电泳(2-DE)对RA和OA的滑膜FLS进行蛋白... 详细信息

目的研究类风湿关节炎(RA)和骨性关节炎(OA)关节滑膜成纤维样细胞(FLS)蛋白质组的表达差异,分析差异蛋白在RA关节滑膜增生中的作用。方法原代培养关节滑膜FLS,抽提细胞总蛋白并定量,通过高分辨双向电泳(2-DE)对RA和OA的滑膜FLS进行蛋白分离,找出其中表达差异的蛋白质点并进行质谱(MS)分析鉴定。结果 OA及RA滑膜FLS的2-DE图谱上分别显示有1324和1147个蛋白质点。其中47个蛋白质点在OA或RA滑膜FLS中有3倍以上的量变;12个蛋白质点只存在于OA滑膜FLS;15个蛋白质点只存在于RA滑膜FLS。选择54个蛋白质点进行MS,共成功鉴定34个蛋白质点。其中包括在OA中表达上升的人异天冬氨酸甲基转移酶(PIMT)和PIR(PIR),仅在RA中表达的硫氧还蛋白1(TRX-1)这三个与关节滑膜增生相关的蛋白质。结论 PIMT和PIR在RA中表达降低及TRX-1在RA中表达升高可能是RA关节滑膜增生,引起关节软骨破坏的原因之一。

关键词：关节炎,风湿性骨关节炎质谱分析法电泳,凝胶,双向成纤维样细胞

沙利度胺对类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞影响的体外研究

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实用临床医药杂志 2007年第1期11卷 39-41,44页

作者：舒强李兴福刘花香李栋山东大学齐鲁医院风湿科山东济南250012

目的研究沙利度胺(Thalidomide)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维样细胞(FLS)体外培养时的增生殖分化特性的影响。方法关节镜、关节活检针取RA患者滑膜组织,分离培养和鉴定FLS,MTT法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察沙利度胺对FLS细... 详细信息

目的研究沙利度胺(Thalidomide)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维样细胞(FLS)体外培养时的增生殖分化特性的影响。方法关节镜、关节活检针取RA患者滑膜组织,分离培养和鉴定FLS,MTT法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察沙利度胺对FLS细胞存活分数(SF)和c-fos、COX-2mRNA表达。结果RA-FLS体外培养呈良性增生。沙利度胺对RA-FLS的SF值的抑制作用最强(P细胞,证实体外培养传代的RA-FLS为非恶性无限制增生。实验剂量下沙利度胺通过抑制c-fos、COX-2的表达、降低FLS增殖能力等不同途径,发挥对RA滑膜细胞的免疫调节作用。

关键词：类风湿关节炎成纤维样细胞滑膜沙利度胺

艾拉莫德对骨关节炎滑膜成纤维样细胞特性的影响

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中华风湿病学杂志 2006年第7期10卷 389-392,i0001页

作者：舒强李兴福侯怀水李栋刘花香山东大学齐鲁医院风湿科济南250012 山东大学齐鲁医院低温医学中心济南250012

目的观察骨关节炎(OA)滑膜成纤维样细胞(FLS)体外培养时生长、增殖特性,以及艾拉莫德(T-614)对其增殖能力的影响,探讨艾拉莫德的抗炎机制。方法噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪观察OA和滑膜正常者(NS)膝关节滑膜组织体外培养时FLS增殖能力和... 详细信息

目的观察骨关节炎(OA)滑膜成纤维样细胞(FLS)体外培养时生长、增殖特性,以及艾拉莫德(T-614)对其增殖能力的影响,探讨艾拉莫德的抗炎机制。方法噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪观察OA和滑膜正常者(NS)膝关节滑膜组织体外培养时FLS增殖能力和细胞周期的变化：用反转录-聚合酶链反应测定FLS的c-fos和COX-2表达情况,检测不同浓度T-614作用下FLS的细胞增殖、细胞周期和基因表达。结果OA和NS的FLS在体外培养时的生长活性、分化能力的差异无统计学意义。高剂量T-614对两种FLS的细胞存活分数(SF)的抑制作用差异无统计学意义,但与阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0．05)。OA-FLS中加入1000 ml/L T-614可诱导细胞凋亡并抑制c-fos和COX-2表达,200 ml/L T-614延长G_1期而缩短S期。结论无炎症介质激活时,OA-FLS在体外未表现出高增殖潜能：高剂量的艾拉莫德对OA-FLS的增殖分化及表达有直接抑制作用,并通过此机制对OA滑膜炎进行免疫调节。

关键词：骨关节炎成纤维样细胞滑膜艾拉莫德

根尖周囊肿囊壁成纤维样细胞异质性与破骨细胞诱导功能的关系

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根尖周囊肿囊壁成纤维样细胞异质性与破骨细胞诱导功能的关系

硫氧还蛋白1对类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞增殖和凋亡的影响

2019年中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第十三次全国口腔病理学术会议

作者：王海丞章燕同济大学附属口腔医院上海牙组织修复与再生工程技术研究中心

目的:分析在根尖周囊肿囊壁内,成纤维样细胞的异质性分化,分析与破骨细胞诱导功能相关的目标分子。材料和方法:从20例根尖周囊肿患者的病变中,分离培养囊壁成纤维样细胞的单个集落形成单位。取各集落细胞培养上清制备条件培养基,诱导破... 详细信息

目的:分析在根尖周囊肿囊壁内,成纤维样细胞的异质性分化,分析与破骨细胞诱导功能相关的目标分子。材料和方法:从20例根尖周囊肿患者的病变中,分离培养囊壁成纤维样细胞的单个集落形成单位。取各集落细胞培养上清制备条件培养基,诱导破骨细胞前体分化,Trap染色计算各集落诱导形成的破骨样细胞数量,并采用real-time PCR检测各集落细胞中,FN异构体及多个破骨诱导调控基因的相对表达量。基于主成份分析对所有集落形成单位聚类,分析FN异构体对不同聚类中,破骨细胞诱导效率的贡献。进一步通过免疫组织化学染色,分析FN异构体染色强度与囊肿的病变范围关系;并在体内、外阻断FN异构体,观察破骨细胞形成效率的变化。结果:20例病变中,共分离培养44个集落形成单位,可分为两类;类别1主要来自骨破坏范围较小的病变,类别2来源病变破坏范围较大,差异显著(P细胞的破骨细胞诱导效率,显著低于类别2(P细胞的破骨细胞诱导效率,成显著显著正相关(P成纤维样细胞的自分泌作用,能显著降低破骨细胞分化效率(P细胞抑制作用一致。结论:根尖周囊肿的纤维囊壁中,成纤维样细胞在诱导破骨细胞形成的作用上,发生了功能分化。这种分化可部分归因于FN基因的可变剪接所产生的异构体EDA+FN,该分子通过对成纤维细胞的自分泌作用,刺激破骨细胞形成。有潜在靶点的价值。

关键词：根尖周囊肿成纤维样细胞纤维粘连蛋白破骨细胞诱导聚类分析

来源： cnki会议评论

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硫氧还蛋白1对类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞增殖和凋亡的影响

人类骨髓成纤维样基质细胞对多发性骨髓瘤细胞迁移和归巢特性的影响

第十二届全国免疫学学术大会

作者：卢添宝宗明樊莎莎陆英范列英上海市东方医院同济大学附属东方医院

目的:研究硫氧还蛋白1(thioredoxin 1,Trx1)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜中的表达及其对RA滑膜成纤维样细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用免疫组化和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(... 详细信息

目的:研究硫氧还蛋白1(thioredoxin 1,Trx1)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜中的表达及其对RA滑膜成纤维样细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用免疫组化和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Trx1在RA和骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者关节滑膜组织中的表达与分布。分离培养RA和OA患者滑膜组织FLS,取对数生长期的FLS分别在在21%O和3%O的条件下培养,蛋白质印迹技术(Western Blot,WB)检测FLS中Trx1蛋白水平表达的差异。构建Trx1小干扰RNA(Trx1 siRNA)转染RA-FLS及OA-FLS。MTS法检测FLS的增殖,流式细胞术检测FLS凋亡。结果:Trx1在RA和OA患者的关节滑膜组织中均有表达,主要在细胞浆内表达,也可在细胞核中发现,且RA滑膜组织中Trx1 mRNA的表达水平表达明显比OA滑膜组织高,差异显著(P细胞增殖率高于21%O组。在3%O条件下,FLS转染Trx1 siRNA后,Trx1表达受抑制、FLS增殖率降低;FLS凋亡增加,差异有统计学意义(P细胞增殖,抑制细胞凋亡,从而在RA关节破坏中起一定作用。

关键词：硫氧还蛋白1 成纤维样细胞增殖凋亡

来源： cnki会议评论

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白血病．淋巴瘤 2010年第7期19卷 418-420页

作者：葛繁梅高延慧白庆咸延安大学医学院附属医院血液科 716000 第四军医大学西京医院血液科

目的观察人类骨髓成纤维样细胞系HFCL对多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖、迁移和归巢的影响.方法采用体外细胞培养,建立RPMI8226细胞和HFCL细胞共培养体系,锥虫蓝拒染法测定生长曲线;流式细胞术（FCM）检测细胞周期和黏附分子CD49d的变... 详细信息

目的观察人类骨髓成纤维样细胞系HFCL对多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖、迁移和归巢的影响.方法采用体外细胞培养,建立RPMI8226细胞和HFCL细胞共培养体系,锥虫蓝拒染法测定生长曲线;流式细胞术（FCM）检测细胞周期和黏附分子CD49d的变化;RT-PCR检测CXCR4基因的表达情况.结果 HFCL细胞抑制RPMI8226细胞生长,且与HFCL细胞直接接触组的抑制作用大于非直接接触组（Transwell）组.RPMI8226细胞与HFCL细胞共培养后,直接接触组G1期细胞增高,S期细胞减少：HFCL细胞下调RPMI8226细胞的CXCR4和CD49d 的表达,单独培养组明显高于直接培养组;Transwell组无明显变化.结论人类骨髓成纤维样细胞HFCL能抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI8226的增殖,抑制CXCR4和CD49d的表达,影响骨髓瘤细胞的迁移和归巢.

关键词：多发性骨髓瘤骨髓成纤维样细胞受体,CXCR4 CD49d 整合素α4

痹清饮对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的干预作用

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痹清饮对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的干预作用

正常人骨髓成纤维样基质细胞系对白血病细胞U937增殖的影响

第十二届全国中医风湿病学术研讨会

作者：孙素平周翠英刘建樊冰邓长财山东中医药大学附属医院中国人民解放军第401医院(青岛) 山东中医药大学

目的:探讨痹清饮对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖分化的影响。方法:分离培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞,不同浓度痹清饮作用后,与白芍总苷对照,MTT法测定细胞增殖率,流式细胞仪测定细胞周期。结果:痹清饮能显著抑制成纤维滑... 详细信息

目的:探讨痹清饮对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖分化的影响。方法:分离培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞,不同浓度痹清饮作用后,与白芍总苷对照,MTT法测定细胞增殖率,流式细胞仪测定细胞周期。结果:痹清饮能显著抑制成纤维滑膜细胞增殖分化,并且抑制作用呈明显的量效关系。结论:痹清饮和白芍总苷均可抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖,促进凋亡。

关键词：痹清饮/药效学类风湿关节炎/中医药疗法成纤维样细胞实验研究

来源： cnki会议评论

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第四军医大学学报 2003年第17期24卷 1560-1562页

作者：梁蓉黄高升王哲冯骥良郭英杨国嵘第四军医大学基础部病理学教研室陕西西安710033

目的 :观察正常人骨髓成纤维样细胞系HFCL对白血病细胞U937增殖的影响 .方法 :采用免疫组化对HFCL细胞进行鉴定 .建立U937细胞和HFCL细胞共培养体系 ,台盼蓝拒染法测定生长曲线 ;HE染色和瑞氏吉姆萨染色后进行分裂指数 (MI)测定 ;流式... 详细信息

目的 :观察正常人骨髓成纤维样细胞系HFCL对白血病细胞U937增殖的影响 .方法 :采用免疫组化对HFCL细胞进行鉴定 .建立U937细胞和HFCL细胞共培养体系 ,台盼蓝拒染法测定生长曲线 ;HE染色和瑞氏吉姆萨染色后进行分裂指数 (MI)测定 ;流式细胞仪 (FCM)检测细胞周期的变化 ;WesternBlot检测增殖细胞核抗原 (PCNA)表达 .结果 :与单独U937细胞培养相比 ,与HFCL细胞共培养后 ,U937细胞生长受抑 ,且与HFCL细胞直接接触组的抑制作用大于用transwell组 .其分裂指数单独白血病细胞组 >用transwell组 >与HFCL直接接触组 .细胞周期分析发现U937细胞与HFCL细胞共培养后 ,G1期细胞增高 ,S期细胞减少 ,以直接接触组为甚 .与HFCL细胞共培养后 ,U937细胞的PCNA表达下调 ;而与U937细胞共培养 ,HFCL细胞生长和细胞周期无明显变化 .结论 :正常人骨髓成纤维样细胞HFCL能抑制白血病细胞U937的增殖 ,阻止U937细胞细胞周期的运行。

关键词：骨髓成纤维样细胞白血病增殖