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中草药 2021年第23期52卷 7244-7258页

作者：张雅婷蔡皓段煜裴科王梦晴于慧刘鑫宋健涛段奕辰南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 山西中医药大学中药与食品工程学院山西晋中030619

目的研究炮制与配伍对四逆散中主要有效成分在抑郁模型大鼠血浆、胆汁、尿液及粪便中代谢成分的差异。方法建立慢性不可预期温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁大鼠模型,造模结束后分别ig柴胡、白芍、柴胡-白芍药对... 详细信息

目的研究炮制与配伍对四逆散中主要有效成分在抑郁模型大鼠血浆、胆汁、尿液及粪便中代谢成分的差异。方法建立慢性不可预期温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁大鼠模型,造模结束后分别ig柴胡、白芍、柴胡-白芍药对、四逆散及含醋炙柴胡和醋炙白芍的四逆散提取物,并在连续ig 7 d后收集24 h尿液及粪便,再次ig收集血浆及胆汁。采用超高效液相色谱-四极杆飞行质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术对血浆、胆汁、尿液及粪便样本进行检测,并结合PeakViewTM和MetabolitePilotTM软件进行鉴定分析。结果依据代谢途径和离子碎片信息,推测柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d、芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷、橙皮苷、橙皮素、柚皮苷、甘草苷、甘草酸以及甘草素在抑郁模型大鼠体内主要以原型、脱糖、脱氧、去甲基化、氧化、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸化等形式存在。最终在柴胡组中鉴定了27种代谢产物,在白芍组中鉴定了30种代谢产物,在柴胡-白芍药对组中鉴定了52种代谢产物,在四逆散组中鉴定了118种代谢产物,在含醋炙柴胡和醋炙白芍的四逆散组中鉴定了168个代谢产物。结论在抑郁模型大鼠体内,配伍前后的"单味药-药对-复方"和炮制前后的"生品-醋炙品"的代谢产物存在较大差异。即经醋炙及配伍后,14种主要活性成分的原型及其代谢产物的分布更为广泛,且醋炙在一定程度上促进了某些成分参与肝肠循环,进一步为四逆散抗抑郁作用的药效物质研究奠定基础,同时也为阐明炮制与配伍机制提供科学依据。

关键词：四逆散醋炙配伍代谢产物 UPLC-Q-TOF/MS 抗抑郁作用慢性不可预期温和应激柴胡白芍柴胡皂苷a 柴胡皂苷b2 柴胡皂苷c 柴胡皂苷d 芍药苷芍药内酯苷苯甲酰芍药苷氧化芍药苷橙皮苷橙皮素柚皮苷甘草苷甘草酸甘草素

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CUMS大鼠前额叶皮质神经炎症机制及氟西汀的作用途径研究

CUMS大鼠前额叶皮质神经炎症机制及氟西汀的作用途径研究

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作者：陈旭阳南京大学

学位级别：硕士

抑郁症为现代社会严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。抑郁症病因复杂,其确切病理机制仍不清楚。炎症反应学说作为抑郁症病理机制的重要假说之—,已获得学术界关注与重视,但现有假说和研究多局限于外周炎症。本研究聚焦中枢功能脑... 详细信息

抑郁症为现代社会严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。抑郁症病因复杂,其确切病理机制仍不清楚。炎症反应学说作为抑郁症病理机制的重要假说之—,已获得学术界关注与重视,但现有假说和研究多局限于外周炎症。本研究聚焦中枢功能脑区的神经炎症,具体针对抑郁症模型动物前额叶皮质(PFC)神经炎症的病理机制开展研究工作,同时研究临床抗抑郁药盐酸氟西汀可能的作用途径。在国际认可的抑郁症动物模型——慢性不可预期温和应激(CUMS)大鼠上,检测其血清、脑脊液(CSF)以及PFC脑区促炎性细胞因子白介素1 beta(IL-1β)表达和活性的病理变化,并探究CUMS诱导动物PFC脑区IL-1β表达和活化异常所致神经炎症的分子机制。与正常对照组动物比较,经过12周CUMS的抑郁症模型大鼠出现体重减轻和明显抑郁样行为(蔗糖水摄入量减少),同时其PFC脑区IL-1β表达(mRNA和蛋白水平)及活化(17 kDa IL-1β成熟体蛋白水平)水平显著升高,而CUMS大鼠外周血清及CSF中IL-1β水平却未出现明显变化。盐酸氟西汀可显著抑制CUMS大鼠PFC脑区IL-1β的异常表达和活化,这与其改善CUMS大鼠抑郁样行为的效果一致。进一步研究发现,CUMS大鼠PFC脑区核转录因子-κB(NF-κB)信号通路以及核苷酸结合寡聚域受体家族模式识别受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的活性相对于对正常对照组动物显著升高,同时尽管CUMS大鼠PFC脑区Toll样受体4(TLR4)蛋白表达未见明显变化,但TLR2及嘌呤受体P2X配体门控性离子通道7(P2RX7)蛋白表达水平显著升高,提示这些炎性分子、元件和信号通路可能参与介导了 CUMS抑郁症模型动物PFC脑区IL-1β表达及活化异常所致神经炎症的病理过程。针对中枢神经细胞的分析结果显示,与正常对照组动物比较,CUMS大鼠PFC脑区发生小胶质细胞异常活化,同时伴随星形胶质细胞减少及功能损害;而NLRP3和小胶质细胞标记蛋白——离子钙结合接头分子1(Iba1)蛋白共定位研究结果则进一步明确:CUMS大鼠PFC脑区小胶质细胞NLRP3炎症小体的异常激活可能是引起该脑区IL-1β表达和活化异常而产生神经炎症的重要原因。氟西汀则显著抑制CUMS大鼠PFC脑区小胶质细胞NLRP3炎症小体的激活。氟西汀抑制PFC脑区炎性分子、元件以及信号通路异常表达和激活的同时,还保护和改善了 CUMS大鼠PFC脑区星形胶质细胞的数量和功能。这些研究结果佐证了 CUMS大鼠PFC脑区神经炎症病理变化和机制,初步说明通过抗神经炎症而发挥抗抑郁活性这一新的药物作用途径。上述新发现为抑郁症炎症反应学说提供新的实验证据,拓展了抑郁症中枢神经炎症研究内涵。PFC脑区相关神经炎症通路、元件及分子可能成为防治抑郁症药物新的潜在干预靶标。

关键词：抑郁症慢性不可预期温和应激神经炎症氟西汀

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黄芪、帕罗西汀对抑郁症小鼠模型大脑白介素-18和5-羟色胺影响的研究

黄芪、帕罗西汀对抑郁症小鼠模型大脑白介素-18和5-羟色胺影响的...

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作者：韩晓蕾山西中医学院

学位级别：硕士

抑郁症(Depression)是一种严重危害人类身心健康的高发性精神情志障碍性疾病[1]。抑郁症己成为当今世界第四大疾患,直至2020年,抑郁症将可能成为仅次于冠心病的第二大疾病[2]。但到目前为止,关于抑郁症的确切发病原因和机制尚未完全研... 详细信息

抑郁症(Depression)是一种严重危害人类身心健康的高发性精神情志障碍性疾病[1]。抑郁症己成为当今世界第四大疾患,直至2020年,抑郁症将可能成为仅次于冠心病的第二大疾病[2]。但到目前为止,关于抑郁症的确切发病原因和机制尚未完全研究清楚。近年来,国内外学者的多项研究表明,多种细胞因子介导的免疫功能异常反应可能在抑郁症的发病中起着某种重要作用[3]。背景作为常用的补益中药,黄芪有着“补气固表、利尿脱毒、排脓及敛疮生肌”等功效[4],国内外实验表明[5],黄芪能维持免疫系统的动态平衡,有着调节免疫系统的双向性作用,能显著提高免疫抑制鼠的IL-2、TNF-α、INF-γ等免疫细胞因子的活化生成水平。并且能有效提高机体抗氧化能力,促进机体神经系统发育和神经的生长,保护机体神经细胞,提高机体免疫力。但目前有关黄芪在抑郁症治疗中的作用的研究较少见诸国内外报道,且尚无明确定论。目的通过比较C57BL/6J小鼠抑郁症模型中抑郁发病前后以及分别经黄芪(高、中、低剂量)、帕罗西汀、生理盐水干预后,检测小鼠大脑内IL-18、5-HT含量的变化,了解中草药黄芪抗抑郁作用的疗效及作用机制,并探讨IL-18、5-HT与抑郁症发病的相关性及可能的作用机制。方法1.采用CUMS造模法,对60只雄性C57BL/6J小鼠进行造模,制备抑郁症的小鼠模型;2.60只小鼠随机分成空白对照组、模型组、帕罗西汀干预组、黄芪干预组(高剂量组、中剂量组、低剂量组);3.不同时点检测小鼠大脑和外周血IL-18和5-HT的变化。结果1.运用黄芪进行干预后可显著改善抑郁症小鼠抑郁症状;2.抑郁模型鼠大脑内IL-18水平显著高于空白对照组,而5-HT水平与IL-18水平呈负相关,显著低于空白对照组;3.帕罗西汀组和黄芪高、中剂量能够明显降低CUMS抑郁模型小鼠大脑内和外周血IL-18水平,而提高5-HT的含量。结论黄芪能够有效降低抑郁症小鼠中枢及外周血IL-18含量,提高5-HT含量,进而改善抑郁症状。

关键词：抑郁症黄芪帕罗西汀 IL-18 5-TH 慢性不可预期温和应激

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哈蟆油对抑郁模型小鼠行为学影响的研究

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吉林中医药 2019年第10期39卷 1335-1338页

作者：马超律广富林贺叶鸿博左佳航于桂丽李禹墨李岳宸叶豆丹林喆长春中医药大学长春130117 长春中医药大学吉林省人参科学研究院长春130117 长春赛迈斯生物工程有限公司长春130000

目的考察哈蟆油对慢性温和不可预知应激所致抑郁模型小鼠行为学的影响。方法 42只健康雄性小鼠,随机分为空白组、模型组、氟西汀组(3 mg/kg)、哈蟆油高剂量组(800 mg/kg)、哈蟆油中剂量组(400 mg/kg)、哈蟆油低剂量组(200 mg/kg),通过... 详细信息

目的考察哈蟆油对慢性温和不可预知应激所致抑郁模型小鼠行为学的影响。方法 42只健康雄性小鼠,随机分为空白组、模型组、氟西汀组(3 mg/kg)、哈蟆油高剂量组(800 mg/kg)、哈蟆油中剂量组(400 mg/kg)、哈蟆油低剂量组(200 mg/kg),通过每日随机给予模型动物1~2种不同的刺激,连续造模42 d,每周称量1次体质量,第28天开始给药,连续给药14 d。于第28天、第42天通过悬尾实验、强迫游泳实验、旷场实验对各组小鼠进行行为学评价。结果造模28 d后,除空白组外,各组小鼠均出现明显的体质量下降;悬尾实验、强迫游泳实验各组小鼠不动时间增加;旷场实验运动时间、运动路程、运动速度、中央区活动时间下降,角落活动时间增加(P 慢性不可预知温和应激所致小鼠的抑郁行为。

关键词：哈蟆油慢性不可预期温和应激抑郁行为学悬尾实验强迫游泳实验旷场实验

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