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美国白蛾核型多角体病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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昆虫学报 2010年第7期53卷 824-830页

作者：乔鲁芹曲良建王玉珠张永安杨忠岐陶万强关玲山东农业大学植物保护学院山东泰安271018 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所北京100091 北京市林业保护站北京100029

为了建立对昆虫核型多角体病毒(nucleopolyhedrovirus)进行定量检测方法,本研究选用美国白蛾Hyphantria cunea核型多角体病毒的polyhedrin基因为目的基因,经引物设计、PCR扩增、目的片段与载体连接转化以及重组质粒的鉴定,并对重组质粒... 详细信息

为了建立对昆虫核型多角体病毒(nucleopolyhedrovirus)进行定量检测方法,本研究选用美国白蛾Hyphantria cunea核型多角体病毒的polyhedrin基因为目的基因,经引物设计、PCR扩增、目的片段与载体连接转化以及重组质粒的鉴定,并对重组质粒标准品和样品DNA进行检测,构建出美国白蛾核型多角体病毒SYBR GreenⅠ荧光定量标准曲线。统计学分析显示标准品浓度的对数值与Ct值之间存在良好的线性关系(R=0.998)。该方法的检测灵敏度为101～102拷贝/μL,线性范围达5个数量级,扩增产物形成单一的特异性熔解峰,组内组间的变异系数均小于3%。根据已建立的方法对不同感染时间段的感病幼虫进行检测,每毫克幼虫样本内病毒polyhedrin基因拷贝数增殖倍数对数值与感染时间(d)呈正相关(R=0.987)。这些结果表明,建立的美国白蛾核型多角体病毒荧光定量PCR检测方法是可靠的,具有灵敏度高、重复性好等特点,可为昆虫核型多角体病毒体内增殖动态研究及昆虫病毒的标准化生产提供参考。

关键词：美国白蛾核型多角体病毒 SYBR GreenⅠ 荧光定量PCR 感病幼虫检测

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试用核型多角体病毒防治粘虫

植物保护 1984年第6期 29-30页

作者：杨发泽彭涛刘玉琢褚茗莉安徽省阜阳地区农科所辽宁省农科院植保所

1978年,阜阳地区农科所在当地粘虫自然死虫中得到一些感染病毒的虫尸,分离物经武汉大学病毒所和安徽医学院电镜室鉴定,确认为粘虫核型多角体病毒((NPV)此种病毒国外于1915年自粘虫体内分离得到,国内1962年以来,蔡秀玉等也有研究报导,但... 详细信息

1978年,阜阳地区农科所在当地粘虫自然死虫中得到一些感染病毒的虫尸,分离物经武汉大学病毒所和安徽医学院电镜室鉴定,确认为粘虫核型多角体病毒((NPV)此种病毒国外于1915年自粘虫体内分离得到,国内1962年以来,蔡秀玉等也有研究报导,但用于田间防治试验者还较少见,本文就1980—1983年对毒力测定和田间试验示范方面所得结果报告如下:

关键词：粘虫麦类害虫卵孵化感病幼虫阜阳地区

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虫·草·菌

自然杂志 1979年第7期 31-32+68页

作者：臧穆中国科学院昆明植物研究所

真菌是一类没有叶绿素的生物,在阳光下不能进行光合作用,它以异养的方式取食,依靠侵害活的生物(寄主)或吸取枯、死生物体的有机物质(腐生)而生活。其中,大量的种类对人类有益。我国人民,远在古代,就对真菌有较深入的了解。在农业生产活... 详细信息

真菌是一类没有叶绿素的生物,在阳光下不能进行光合作用,它以异养的方式取食,依靠侵害活的生物(寄主)或吸取枯、死生物体的有机物质(腐生)而生活。其中,大量的种类对人类有益。我国人民,远在古代,就对真菌有较深入的了解。在农业生产活动中,掌握了酿酒技术,所谓“清

关键词：虫草菌素真菌子座感病幼虫虫草属蛹草昆虫体

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赤松毛虫质型多角体病毒研究初报(摘要)

江苏林业科技 1978年第3期 1-3页

作者：彭趋贤范民生陶贵朝江苏省林业科学研究所

1977年6月,山东沂南县东风林场寄给我所赤松毛虫病毒死虫干一包,经对马尾松毛虫连续进行感染试验,表现有较好的杀虫效果。室内用10～20倍稀释液毒杀3～6龄幼虫,死亡率达63.6～98.8％。林间毒杀5～6龄幼虫,10～15倍稀释液毒杀率为63.6～6... 详细信息

1977年6月,山东沂南县东风林场寄给我所赤松毛虫病毒死虫干一包,经对马尾松毛虫连续进行感染试验,表现有较好的杀虫效果。室内用10～20倍稀释液毒杀3～6龄幼虫,死亡率达63.6～98.8％。林间毒杀5～6龄幼虫,10～15倍稀释液毒杀率为63.6～68.0％。镜检常出现六角形多角体和杆菌同时存在的现象,为了搞清楚试虫致病原因,1978年在继续进行接种感染试验的同时,着重对病原体进行检定分离工作,现将初步结果报导如下:

关键词：感病幼虫镜检六角形多角体松毛虫属赤松毛虫马尾松毛虫

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柑桔凤蝶核型多角体病毒的分离及形态学观察

山东农业科学 1984年第2期 55-56页

作者：孙发仁泰安地区农科所

柑桔凤蝶(Papilio xuthus Linnaeus)俗称桔狗、燕尾蝶,是柑桔重要害虫,在泰安地区主要危害花椒。1980年6月.从室内饲养的柑桔凤蝶幼虫自然患病死虫中分离获得一株核型多角体病

关键词：核型多角体病毒核多角体病毒柑桔凤蝶感病幼虫形态学观察

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幼虫芽孢杆菌与其生活力的测定

养蜂科技 1994年第3期 27-27页

作者：刘后贵福建农学院蜂学系

幼虫芽孢杆菌与其生活力的测定幼虫芽孢杆菌（Ｂａｌｉｌｌｕｓｌａｒｖｅ）是美洲幼虫腐臭病的致病菌。本文将详细介绍幼虫芽孢杆菌的检测与其生活力测定。一、幼虫芽孢杆菌的检测（一）霍斯特牛奶测试法此实验根据是幼虫芽孢杆菌能产... 详细信息

幼虫芽孢杆菌与其生活力的测定幼虫芽孢杆菌（Ｂａｌｉｌｌｕｓｌａｒｖｅ）是美洲幼虫腐臭病的致病菌。本文将详细介绍幼虫芽孢杆菌的检测与其生活力测定。一、幼虫芽孢杆菌的检测（一）霍斯特牛奶测试法此实验根据是幼虫芽孢杆菌能产生大量蛋白质水解酶。往盛有３～４毫...

关键词：幼虫芽孢杆菌生活力美洲幼虫腐臭病烂子病蜜蜂疾病感病幼虫

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用犀(虫甲)病毒防治犀(虫甲)的研究

热带作物译丛 1977年第2期 40-40页

作者：霍绍棠

1974年报导了毛里求斯关于用犀虫甲病毒(Rhabdionvirus oryctes)防治椰子二疣犀(虫甲)(Oryctes rhinoceros)的研究情况。这种病毒是1966年在马来西亚发现,1967年在西萨摩亚试验成功后,1970年引进毛里求斯。将感病的幼虫磨碎拌入潮湿的... 详细信息

1974年报导了毛里求斯关于用犀虫甲病毒(Rhabdionvirus oryctes)防治椰子二疣犀(虫甲)(Oryctes rhinoceros)的研究情况。这种病毒是1966年在马来西亚发现,1967年在西萨摩亚试验成功后,1970年引进毛里求斯。将感病的幼虫磨碎拌入潮湿的锯未中,然后从田间采回大量犀虫甲幼虫放入带病毒的锯末中,

关键词：感病幼虫毛里求斯锯末

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79-4B棉铃虫病毒杀虫剂

上海农业科技 1982年第2期 46-46页

79-4B棉铃虫病毒杀虫剂是一种新型生物农药。该药所用的S01-43毒株,是中国科学院武汉病毒研究所在国内首次分离到的一株单粒包埋类型的棉铃虫核型多角体病毒。1981年经中国科学院和农垦部正式鉴定。 79-4B病毒粒子长371.20±39.02nm,直... 详细信息

79-4B棉铃虫病毒杀虫剂是一种新型生物农药。该药所用的S01-43毒株,是中国科学院武汉病毒研究所在国内首次分离到的一株单粒包埋类型的棉铃虫核型多角体病毒。1981年经中国科学院和农垦部正式鉴定。 79-4B病毒粒子长371.20±39.02nm,直径72.8±7.64nm,病毒粒子由多角体内释放出来,一个多角体含35～58个病毒粒子。单虫多角体含量一般40～250亿个。幼虫摄食病毒后,最短潜伏期3～4天。多角体病毒可在幼虫血球,气管上皮、脂肪、表皮,以及中肠上皮等细胞核中增殖,所有组织细胞都能被侵染。感病幼虫体节肿胀发亮,体色

关键词：棉铃虫病毒杀虫剂病毒粒子病毒体多角体病毒昆虫病毒感病幼虫中国科学院武汉病毒研究所