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Cyclin D1、CDK4、P16及Rb基因在砷诱发HaCaT细胞恶性转变过程中的表达及意义

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Cyclin D1、CDK4、P16及Rb基因在砷诱发HaCaT细胞恶性转变过程中...

作者：郝明明大连医科大学

学位级别：硕士

目的:研究cyclin D1,CDK4,P16及Rb基因在砷诱发HaCaT细胞恶性转变过程中的表达及意义。方法:应用低浓度砷剂（100nM）长期作用于HaCaT细胞20周,观察细胞形态学改变,应用软琼脂克隆形成实验观察单克隆形成情况,应用Real Time-PCR检测... 详细信息

目的:研究cyclin D1,CDK4,P16及Rb基因在砷诱发HaCaT细胞恶性转变过程中的表达及意义。方法:应用低浓度砷剂（100nM）长期作用于HaCaT细胞20周,观察细胞形态学改变,应用软琼脂克隆形成实验观察单克隆形成情况,应用Real Time-PCR检测MMP-9表达水平,以构建砷致HaCaT细胞恶性表型细胞。应用Real Time-PCR检测砷致HaCaT细胞恶性转化过程中,不同时间点（0周,6周,15周,20周）cyclin D1,CDK4,P16及Rb基因mRNA表达水平。结果: 1.成功构建砷致HaCaT细胞恶性表型细胞砷剂长期低浓度（100nM）作用于HaCaT细胞20周,细胞显示了形态学上的改变,即单个细胞边界不清,形态多样,伸展性差,细胞体积变小,频繁出现多核巨细胞。软琼脂克隆形成实验计算单克隆体形成率,砷剂组单克隆体形成率（0.67‰）明显多于对照组（0.16‰）（P﹤0.05）。Real Time-PCR检测显示砷剂组（20周）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA表达水平显著高于对照组。 2. CDK4/cyclinD1/p16/Rb通路中各基因mRNA水平表达改变（1） P16 mRNA表达水平:与正常对照组（0周）HaCaT细胞相比,砷剂组第6周,15周,20周HaCaT细胞P16 mRNA表达均显著高于正常对照组（P﹤0.05）。P16 mRNA最高表达水平出现于第6周,于15周,20周明显回落。（2） Rb mRNA表达水平:与正常对照组（0周）HaCaT细胞相比,砷剂组第6周,15周,20周HaCaT细胞Rb mRNA表达均显著高于正常对照组（P﹤0.05）。Rb mRNA最高表达水平出现于第6周,于15周,20周Rb mRNA表达水平回落,但仍显著高于正常对照组（P﹤0.003,P﹤0.004）。（3） CDK4 mRNA表达水平:与正常对照组（0周）HaCaT细胞相比,砷剂组第6周,15周,20周HaCaT细胞CDK4 mRNA表达均显著高于正常对照组（P﹤0.05）。CDK4 mRNA表达于第6周出现显著高水平表达,于第15周CDK4 mRNA表达回落,但与正常对照组（0周）相比,仍显著升高（P﹤0.009）。于第20周CDK4 mRNA表达又回升,且高于第6周CDK4 mRNA表达。（4） cyclin D1 mRNA表达水平:与正常对照组（0周）HaCaT细胞相比,砷剂组第6周,15周,20周HaCaT细胞cyclin D1 mRNA表达均显著高于正常组（P﹤0.05）。cyclin D1 mRNA最高表达水平出现于第6周,于第15周cyclin D1mRNA表达回落,但仍显著高于正常组（0周）（P﹤0.007）。第20周cyclin D1 mRNA表达又略有上升。结论: 1.应用低浓度砷剂长期作用于HaCaT细胞20周即可发生恶性转化。细胞形态学上改变为单个细胞边界不清,形态多样,伸展性差,细胞体积变小,频繁出现多核巨细胞。软琼脂实验单克隆体形成增多。MMP-9表达显著增高。 2.细胞周期调控p16-cyclin D1/CDK4-pRb途径在砷诱发人类皮肤癌过程中发生异常。 3.砷诱发HaCaT细胞恶性转变过程中,在早期P16,cyclin D1,CDK4,Rb mRNA水平表达即显著升高,提示p16-cyclin D1/CDK4-pRb途径各相关基因mRNA水平改变是一早期分子事件。 4.砷诱发HaCaT细胞恶性转变过程中不同时间点cyclin D1,P16,CDK4,Rb mRNA表达水平各有不同变化,表明在细胞增殖,分化及恶性转化过程中其作用可能有所差异。为研究砷致皮肤癌的分子机制、早期诊断、预防和筛选药物干预靶点提供理论依据。

关键词：砷剂 HaCaT细胞恶性转变 p16-cyclin D1/CDK4-pRb 途径

肠道微生态对肝硬化-肝癌癌前病变恶性转变的影响

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世界最新医学信息文摘 2019年第83期19卷 50-50页

作者：韩清青海省康复医院

目的探索肠道微生态对肝硬化-肝癌癌前病变恶性转变的影响性。方法选取对照组130例健康体检者、观察组130例疑似肝硬化-肝癌癌前病变恶性转变患者,且均进行肠道微生态检验。结果观察组受检者相关指标均优于对照组(P<0.05),同时肠道微生... 详细信息

目的探索肠道微生态对肝硬化-肝癌癌前病变恶性转变的影响性。方法选取对照组130例健康体检者、观察组130例疑似肝硬化-肝癌癌前病变恶性转变患者,且均进行肠道微生态检验。结果观察组受检者相关指标均优于对照组(P恶性转变中敏感性、特异性、漏诊率、误诊率分别为97.00%、93.33%、3.00%、6.67%。结论肠道微生态能够预示微生态对肝硬化-肝癌癌前病变恶性转变情况,利用价值较高。

关键词：肠道微生态肝硬化肝癌癌前病变恶性转变

中断BMSCs向神经细胞诱导分化的细胞的恶变研究

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中国生物工程杂志 2014年第3期34卷 26-33页

作者：黄小娟王鸣刚廖世奇张虹王炯蓉马瑾杨楠马宁兰州理工大学生命科学与工程学院兰州730050 甘肃省医学科学研究院兰州730050

目的:通过中断BMSCs的正常分化过程,探索肿瘤发生与干细胞分化受阻的关系。方法:全骨髓贴壁培养法获取BMSCs,β-巯基乙醇法诱导BMSCs分化为神经细胞,同时,在加入诱导培养基后的不同时间中断诱导,正常培养至第四代及之后。通过免疫组化... 详细信息

目的:通过中断BMSCs的正常分化过程,探索肿瘤发生与干细胞分化受阻的关系。方法:全骨髓贴壁培养法获取BMSCs,β-巯基乙醇法诱导BMSCs分化为神经细胞,同时,在加入诱导培养基后的不同时间中断诱导,正常培养至第四代及之后。通过免疫组化检测、软琼脂克隆形成实验和CTX免疫抑制小鼠成瘤实验等鉴定和分析中断神经诱导细胞的分化特性和恶性转变趋势。结果:通过免疫组化检测中断神经诱导细胞逐渐表达了神经丝蛋白(NF);通过软琼脂集成形成实验,中断神经诱导40h组的细胞表现了比其他组较强的克隆形成能力,并在细胞病理学HE染色实验和细胞CTX免疫抑制小鼠成瘤实验证明中断神经诱导40h组的细胞发生了病理性恶变和获得致瘤性。结论:中断BMSCs的正常分化的培养,细胞有转化为肿瘤细胞的趋势。

关键词：骨髓间充质干细胞神经细胞中断神经诱导40h细胞恶性转变

腮腺Warthin瘤上皮成分恶变为黏液表皮样癌5例临床病理分析

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诊断病理学杂志 2014年第9期21卷 549-552,556页

作者：宋志刚宋欣石怀银王殿军解放军总医院病理科北京100853

目的探讨Warthin瘤上皮成分恶变为黏液表皮样癌的临床及病理学特点.方法收集并分析5例Warthin瘤上皮成分恶变为黏液表皮样癌的病例,研究其临床特点、病理形态学特点、免疫表型以及组织化学染色特点,并复习相关文献.结果 5例患者中,男... 详细信息

目的探讨Warthin瘤上皮成分恶变为黏液表皮样癌的临床及病理学特点.方法收集并分析5例Warthin瘤上皮成分恶变为黏液表皮样癌的病例,研究其临床特点、病理形态学特点、免疫表型以及组织化学染色特点,并复习相关文献.结果 5例患者中,男性3例,女性2例,年龄26 ～ 63岁,平均年龄45.6岁.临床均表现为腮腺区无痛性肿物.肿物呈结节状,其中2例有完整包膜,3例包膜不完整,包膜不完整区域与周围组织界限欠清;切面大多为实性、灰褐色.镜下黏液表皮样癌组织位于Warthin瘤瘤体内或肿瘤一侧,两者之间可见移行区.其中4例为低级别黏液表皮样癌,1例为高级别黏液表皮样癌.Warthin瘤嗜酸性上皮CK34βE12 、CK5/6和CK7（＋）,p63、CK20和CEA（-）;黏液表皮样癌黏液细胞CK7和CEA（＋）,CK5/6、p63 、CK34βE12和CK20均为（-）;Warthin瘤的基底细胞及黏液表皮样癌的表皮样细胞CK5/6、p63和CK34βE12均（＋）,而CK7、CK20和CEA（-）;Ki-67阳性指数在黏液表皮样癌区域高于Warthin瘤区域.黏液细胞PAS染色（＋）.结论 Warthin瘤上皮成分恶变为黏液表皮样癌极为罕见,有病理诊断主要依据组织学形态：明确的黏液表皮样癌形态及二者上皮成分移行.

关键词：腮腺 Warthin瘤黏液表皮样癌恶性转变

低级别胶质瘤复发再次术后癫痫预后危险因素分析

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中国临床神经外科杂志 2016年第9期21卷 513-516页

作者：周兴旺董辉周桥江涛刘艳辉毛庆四川大学华西医院神经外科成都610041 四川大学华西医院病理科成都610041 首都医科大学天坛医院神经外科北京100000

目的探讨首次术后诊断为低级别胶质瘤复发并再次手术治疗后癫痫预后的危险因素。方法回顾性分析2012年4月至2015年4月收治的复发并再次手术治疗的81例胶质瘤的临床资料。结果 81例中,43例再次术后病理诊断仍为低级别胶质瘤（无恶性转... 详细信息

目的探讨首次术后诊断为低级别胶质瘤复发并再次手术治疗后癫痫预后的危险因素。方法回顾性分析2012年4月至2015年4月收治的复发并再次手术治疗的81例胶质瘤的临床资料。结果 81例中,43例再次术后病理诊断仍为低级别胶质瘤（无恶性转变组）,38例进展为高级别胶质瘤（恶性转变组）。再次术后12个月,无恶性转变组29例（35.8%）完全无癫痫发作（EngelⅠ级）,恶性转变组为26例（32.1%）。多因素Logistic回归分析结果表明,肿瘤全切除是恶性转变组癫痫预后的良好指标（OR=0.171,95%CI为0.031-0.941,P=0.042）,肿瘤全切除（OR=0.09,95%CI为0.013-0.613;P=0.014）和Ki-67低表达（OR=0.064,95%CI为0.007-0.610;P=0.017）是无恶性转变组癫痫预后良好指标,而年龄≤38岁（OR=8.899,95%CI为1.615-60.667;P=0.013）是无恶性转变组癫痫预后不良指标。结论肿瘤全切除、年龄〉38岁以及Ki-67低表达是预测复发性低级别胶质瘤术后癫痫完全控制的良好因素,而在进展为高级别的胶质瘤中,仅有肿瘤全切除有助于癫痫完全控制。

关键词：复发性低级别胶质瘤恶性转变癫痫 Ki-67 手术影响因素

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鼻内翻性乳头状瘤研究进展

济宁医学院学报 2023年第6期46卷 446-448页

作者：张慧(综述) 李秀国(审校) 济宁医学院基础医学院济宁272067 济宁市第一人民医院耳鼻咽喉头颈外科济宁272011

鼻内翻性乳头状瘤(nasal inverted papilloma,NIP)是一种常见的鼻腔鼻窦肿瘤,由于其具有术后易复发、恶性转变等特点被归于交界性肿瘤。NIP病因复杂,病毒感染的作用越来越受到重视。手术治疗是NIP最有效的治疗方法,但是,如何能够及时给... 详细信息

鼻内翻性乳头状瘤(nasal inverted papilloma,NIP)是一种常见的鼻腔鼻窦肿瘤,由于其具有术后易复发、恶性转变等特点被归于交界性肿瘤。NIP病因复杂,病毒感染的作用越来越受到重视。手术治疗是NIP最有效的治疗方法,但是,如何能够及时给予干预措施,减少术后复发及恶变是临床上亟待解决的问题。本文着重对NIP的病因、临床分期系统、治疗方案做一综述,以期对该病的诊治或及时干预提供新的思路。

关键词：内翻性乳头状瘤人类乳头状瘤病毒复发恶性转变干预

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生物标记物在OLP癌变中的研究进展

临床口腔医学杂志 2012年第3期28卷 187-189页

作者：张文怡吴迎涛王万春青岛市口腔医院牙周黏膜科山东青岛266000

口腔扁平苔藓(OLP)是一种具有恶性转变风险的慢性口腔黏膜病,临床上判断癌变可能性的主要依据是通过病理切片来观察组织学形态,但存在主观性较强的技术瓶颈。近年来,生物标记物的发展有助于更加客观地判断OLP患者所处的疾病阶段,并预测... 详细信息

口腔扁平苔藓(OLP)是一种具有恶性转变风险的慢性口腔黏膜病,临床上判断癌变可能性的主要依据是通过病理切片来观察组织学形态,但存在主观性较强的技术瓶颈。近年来,生物标记物的发展有助于更加客观地判断OLP患者所处的疾病阶段,并预测癌变的潜在危险性,但是如何提高生物标记物的特异性和可靠性是该领域研究的难点之一。本文就近5年来生物标记物在OLP癌变中的研究进展做一综述。

关键词：口腔扁平苔藓恶性转变口腔鳞癌生物标记物

口腔扁平苔藓癌变中组织区域T淋巴细胞特征初探

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口腔扁平苔藓癌变中组织区域T淋巴细胞特征初探