检索结果-南通市图书馆

中国免疫学杂志 2008年第6期24卷 570-576,F0003页

作者：邱趁丽杨贵波中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室北京100050

主要组织相容性复合体(Major histocompatibilitycomplex,MHC)是脊椎动物染色体上一组紧密连锁的基因群,人MHC位于6p21.3上[1],恒河猴MHC定位在6q24上[2].

关键词：组织相容性复合体恒河猴疾病进程 MHCⅡ类分子 MHC分子杀伤性T细胞 MHCI类分子免疫系统细胞

恒河猴CGβ亚基(rmCGβ)DNA在HeLa细胞中的表达及其对小鼠免疫反应的诱导

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动物学报 2001年第4期47卷 419-424页

作者：陈云刘喆彭景楩张富春陈幼珍王宾中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室北京100080

为了探讨人绒毛膜促性腺激素hCGβ亚基DNA避孕疫苗的可能性 ,以恒河猴绒毛膜促性腺激素rmCGβ亚基全长氨基酸编码序列的cDNA片段构建了真核质粒表达载体pCMV4 rmCGβ。通过脂质体转染的方法导入HeLa细胞 ,采用RT PCR方法检测rmCGβ在mRN... 详细信息

为了探讨人绒毛膜促性腺激素hCGβ亚基DNA避孕疫苗的可能性 ,以恒河猴绒毛膜促性腺激素rmCGβ亚基全长氨基酸编码序列的cDNA片段构建了真核质粒表达载体pCMV4 rmCGβ。通过脂质体转染的方法导入HeLa细胞 ,采用RT PCR方法检测rmCGβ在mRNA水平上的表达。实验证明HeLa细胞在转染后 2 4h表达最强 ,48h和 72h表达依次减弱 ;利用ELISA方法检测了 pCMV4 rmCGβ在HeLa细胞中rmCGβ蛋白的表达 ,rmCGβ蛋白主要以细胞内或膜结合的形式存在 ,其含量可达 0 5 μg/ 10 6细胞。pCMV4 rmCGβDNA免疫接种雌性BALB/c纯系小鼠 ,能诱导小鼠产生强烈的体液免疫应答 ,滴度最高可达 1∶6 0 0 0以上 ,高滴度的免疫反应持续 10周以上 ,且免疫反应的强度与pCMV4 rmCGβDNA无剂量依赖关系。

关键词： CGβ 恒河猴 DNA疫苗 HeLa细胞表达免疫反应避孕疫苗

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恒河猴大脑前额叶cDNA文库的构建

Zoological Research 2006年第3期27卷 325-330页

作者：李易黄薇张新宿兵中国科学院昆明动物研究所细胞与分子进化重点实验室国家人类基因组南方研究中心上海201203

为筛选出与认知、记忆相关的脑部表达基因及基因家族,利用TRIzol试剂从恒河猴大脑前额叶组织抽提总RNA,再用纯化试剂盒从总RNA中成功纯化出mRNA。按照Stratagene公司的cDNASynthesisKit(200401)、ZAP-cDNASynthesisKit(200400)和ZAP-cDNAGigapackⅢGoldCloningKit(200450)三个试剂盒的操作说明,构建了恒河猴大脑前额叶组织的cDNA文库。文库总库容为2·0×106克隆;绝大多数的cDNA插入片段≥0·5kb,平均长度≈1·0kb;cDNA片段与噬菌体载体重组率为97·3%。文库各项指标均达要求,为克隆大脑PFC区表达基因、测定基因编码区序列、揭示具有多种剪切组合模式等提供了可靠资源,也为相关基因表达调控的研究提供了方便。

关键词：恒河猴大脑前额叶 cDNA文库大脑表达基因

恒河猴对人工设计的HIV-1 DNA疫苗的免疫反应

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科学通报 2006年第10期51卷 1169-1174页

作者：张立树金宁一宋英今孙岩松王宏战大伟马鹤雯尚玉璞金洪涛洪宝庆李昌军事医学科学院11所全军基因工程重点实验室长春130062 天津大学农业与生物工程学院天津300072 军事医学科学院实验动物中心北京100071 暨南大学生命科学院生物系广州510632 吉林大学农学部生化教研室长春130062

HAART对HIV/AIDS的治疗起到了重要的作用,但研制有效的疫苗是解决该全球性问题的最终方案.将人工设计的HIV-1多表位-p24DNA疫苗质粒pVAX1-MEGp24大量制备并纯化后,于0,4,8及18周肌肉注射免疫恒河猴,分别在第3次免疫和第4次免疫后2周(第1... 详细信息

HAART对HIV/AIDS的治疗起到了重要的作用,但研制有效的疫苗是解决该全球性问题的最终方案.将人工设计的HIV-1多表位-p24DNA疫苗质粒pVAX1-MEGp24大量制备并纯化后,于0,4,8及18周肌肉注射免疫恒河猴,分别在第3次免疫和第4次免疫后2周(第10与第20周)采集血液,分离血清和外周血淋巴细胞(PBMC),乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测PBMC特异性CTL杀伤活性,ELISA法检测血清HIV-1抗体和PBMC培养上清Th1类细胞因子的含量,MTT法测定PBMC的增殖能力.结果表明,HIV-1多表位-p24DNA疫苗免疫组的恒河猴PBMC在恒河猴限制性HIV-1CTL表位肽刺激下产生针对HIV-1靶细胞的特异性杀伤活性,分泌Th1类细胞因子IFN-γ和IL-2的水平升高,并出现HIV-1特异性细胞增殖反应;该重组疫苗同时能诱导恒河猴产生HIV-1特异性抗体.结果提示,HIV-1多表位-p24DNA疫苗能诱导恒河猴产生HIV-1特异性细胞和体液免疫应答.

关键词：人免疫缺陷病毒Ⅰ型人工设计 DNA疫苗恒河猴免疫

恒河猴TRIM5α的组织分布及不同刺激促进PBMC中TRIM5α转录水平的上调

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Zoological Research 2009年第4期30卷 354-360页

作者：汤霞戴正喜夏厚军刘丰亮况轶群张高红郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049

TRIM5α(tripartite motif protein 5-alpha)蛋白是恒河猴体内一种非常重要的限制因子,能抑制人免疫缺陷病毒(HIV-1, human immunodeficiency virus type 1)、马感染性贫血病毒(EIAV, equine infectious anemia virus)和猫免疫缺陷病毒 (FIV, feline immunodeficiencyvirus)等逆转录病毒的复制。恒河猴 TRIM5α的组织分布以及在受到外界刺激时 TRIM5α mRNA 表达量的变化研究还未见报道。本研究从中国恒河猴的各组织中提取总 RNA,以β-actin基因作为内参照,通过半定量 RT-PCR 检测各组织中 TRIM5α mRNA 的表达。选择 HIV-GFP-VSVG 假病毒感染外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),非特异性刺激剂——佛波脂(Phorbol myfismte acetate,PMA)+离子霉素(ionomycin,Ion)及 CD28 抗体+CD49d 抗体分别共刺激恒河猴 PBMC,研究不同刺激对恒河猴TRIM5α mRNA 表达水平的影响。结果表明:TRIM5α mRNA 表达于所研究的恒河猴 21 种组织中,免疫系统和泌尿生殖系统组织中表达量最高,而神经系统组织,如大脑、脊髓中表达较少,其他组织中未见明显的表达差异;HIV-GFP-VSVG 感染和用 PMA+Ion、CD28 抗体+CD49d 抗体分别共刺激 PBMC 能促进 PBMC 中 TRIM5α mRNA的转录水平的上调。

关键词： TRIM5α 恒河猴组织分布 PBMC 共刺激表达水平

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腺病毒载体疫苗在恒河猴体内的长期毒性试验

中国药理学通报 2007年第7期23卷 953-958页

作者：卢觅佳周国亮李峰王湛周玲陈云祥由振强温磊宣尧仙浙江省医学科学院国家新药安全评价研究重点实验室浙江杭州310013 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052

目的探讨以5型腺病毒为载体的人用疫苗Ad5-LMP2在恒河猴体内的药效学作用和安全性。方法恒河猴经im给予4.5×1011、1.5×1011和0.5×1011v.p·(kg·次)-1的Ad5-LMP2和等体积的磷酸盐缓冲液(对照组),每5d给药1次,共给药6次。在停药次日... 详细信息

目的探讨以5型腺病毒为载体的人用疫苗Ad5-LMP2在恒河猴体内的药效学作用和安全性。方法恒河猴经im给予4.5×1011、1.5×1011和0.5×1011v.p·(kg·次)-1的Ad5-LMP2和等体积的磷酸盐缓冲液(对照组),每5d给药1次,共给药6次。在停药次日和停药15d时进行尿常规、血液、眼科、心电图、脏器重量和系数、大体观和病理组织学检查;给药前后定期采取猴血清并从剖检猴的脾脏分离淋巴细胞,用ELISA、病毒中和试验和ELISPOT检测腺病毒载体和目的基因蛋白产物LMP2诱导的体液和细胞免疫应答;通过PCR扩增各器官总DNA中的lmp2基因来检测Ad5-LMP2在体内的生物分布。结果在整个试验期间试验猴均未出现任何异常反应,也无动物死亡;给药组动物在整个给药期间的摄食、饮水和体重增长及上述各项常规毒理学检测中均未出现明显异常。受试物在试验猴体内诱发了较高水平的抗腺病毒中和抗体,但目的蛋白LMP2诱导的特异性细胞免疫应答未受抗腺病毒中和抗体的明显抑制;在猴的心、肝、脾、肺、肾、脑、睾丸(或卵巢)及给药部位均可检测到Ad5-LMP2并维持到停药后15d。结论在保证受试物药理学作用的前提下,恒河猴连续1mon肌肉注射相当人临床拟用剂量37.5倍的Ad5-LMP2,未见明显不良反应,中毒靶器官和中毒剂量未明显显示,其安全剂量大于4.5×1011v.p·(kg·次)-1。

关键词：腺病毒载体疫苗恒河猴长期毒性试验体液和细胞免疫生物分布

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恒河猴腰椎间盘缺血性退变模型的建立

中国修复重建外科杂志 2014年第4期28卷 485-490页

作者：魏富鑫王乐周治宇崔尚斌刘少喻邹学农钟锐梁子建中山大学附属第一医院脊柱外科广州510080

目的建立恒河猴腰椎间盘缺血性退变模型并通过T1ρ自旋锁定成像和T2-mapping技术验证其可靠性。方法选取12只健康雌性恒河猴,年龄4～6岁,体重4.4～6.1 kg。每只设L5、6椎间盘作为实验组,L4、5椎间盘作为对照组。实验组于椎间盘相邻的... 详细信息

目的建立恒河猴腰椎间盘缺血性退变模型并通过T1ρ自旋锁定成像和T2-mapping技术验证其可靠性。方法选取12只健康雌性恒河猴,年龄4～6岁,体重4.4～6.1 kg。每只设L5、6椎间盘作为实验组,L4、5椎间盘作为对照组。实验组于椎间盘相邻的上、下软骨终板下骨各缓慢注射平阳霉素（2 mg/mL）1 mL,对照组各注射生理盐水1 mL。于术前及术后1、4、12周采用MRI T1ρ和T2-mapping技术量化评估退变进程,术后4、12周取材行HE染色观察。结果对照组手术前后各时间点T1ρ、T2 map弛豫时间值均无明显变化,差异无统计学意义（P〉0.05）。实验组T1ρ弛豫时间值于术后4周明显下降,4、12周与术前及术后1周比较差异有统计学意义（P〈0.05）;T2 map弛豫时间值于术后12周明显下降,与其余时间点比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。对照组与实验组间除术后4、12周T1ρ弛豫时间值及术后12周T2 map弛豫时间值比较差异有统计学意义（P〈0.05）外,其余时间点两组间比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。对照组及实验组手术前后各时间点间比较以及各时间点两组间比较T2WI轴位髓核高信号区面积占整个椎间盘面积百分比,差异无统计学意义（P〉0.05）。组织学观察示,对照组各时间点椎间盘髓核及纤维环结构未见异常。实验组术后4周椎间盘髓核细胞数目减少、排列不规则;12周椎间盘髓核纤维化,内层纤维环出现裂隙改变。结论经椎体终板下骨注射平阳霉素可获得可靠的怛河猴腰椎间盘缺血性退变模型,T1ρ自旋锁定成像和T2-mapping可作为椎间盘早期退变的量化评价指标。

关键词：腰椎间盘缺血性退变模型 Tlp自旋锁定成像 T2-mapping 恒河猴

恒河猴骨髓间充质干细胞在体外向角膜上皮前体细胞的诱导分化

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科学通报 2007年第14期52卷 1665-1672页

作者：袁静俞建雄黄冰刘炳乾刘敬波江儒章葛坚中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室中山大学附属第三医院普外科广州510630

组织工程生物角膜是角膜的理想替代物,为严重眼表疾病的治疗带来了希望.然而,足量种子细胞的获得是构建生物角膜的瓶颈.骨髓间充质干细胞(MSC)具有多向分化潜能.为探讨MSC能否分化为角膜上皮细胞,将分离培养的灵长类动物恒河猴P3代MSC... 详细信息

组织工程生物角膜是角膜的理想替代物,为严重眼表疾病的治疗带来了希望.然而,足量种子细胞的获得是构建生物角膜的瓶颈.骨髓间充质干细胞(MSC)具有多向分化潜能.为探讨MSC能否分化为角膜上皮细胞,将分离培养的灵长类动物恒河猴P3代MSC在体外基质微环境中通过3种方案诱导,对诱导前后的MSC用形态学观察、免疫组织化学技术和流式细胞仪检测评价其分化情况.结果显示,Ⅲ组MSC表现出角膜上皮前体细胞的形态特征,检测出角膜上皮前体细胞的标志,包括integrinβ1,Cx43,Pax6和P63的表达.这说明,在适宜条件下,MSC能够诱导分化为角膜上皮前体样细胞,有可能作为构建生物角膜的种子细胞来源,进行眼表修复.

关键词：恒河猴骨髓间充质干细胞角膜上皮细胞去上皮羊膜基质 Transwell体系细胞生长因子脂多糖

静脉注射丹酚酸A在恒河猴体内的药代动力学研究

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药学学报 2015年第9期50卷 1142-1147页

作者：宋俊科张雯张维库冯章英谢涛杜冠华中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所国家药物筛选中心药物靶点研究和新药筛选北京市重点实验室北京100050 中日友好医院临床医学研究所北京100029 河北医科大学第四医院河北石家庄050011

丹酚酸A(salvianolic acid A,Sal A)是从丹参根中分离得到的具有多种药理活性的化合物。本文建立的恒河猴血浆中丹酚酸A的LC-MS测定方法可用于研究丹酚酸A在恒河猴体内的药代动力学特性,并考察了同时测定猴血浆中丹酚酸A、B和C的可行性... 详细信息

丹酚酸A(salvianolic acid A,Sal A)是从丹参根中分离得到的具有多种药理活性的化合物。本文建立的恒河猴血浆中丹酚酸A的LC-MS测定方法可用于研究丹酚酸A在恒河猴体内的药代动力学特性,并考察了同时测定猴血浆中丹酚酸A、B和C的可行性。恒河猴静脉注射丹酚酸A 2.5、5和10 mg·kg-1后,2 min时的血药浓度(C2 min)分别为(28.343±6.426)、(45.679±12.301)和(113.293±24.360)mg·L-1。药时曲线下面积(AUC0–∞)分别为(3.316±0.871)、(5.754±2.150)和(13.761±2.825)μg·L-1·h。本研究为丹酚酸A的临床前及临床研究提供了数据支持,也为丹酚酸A、B和C在猴或人体内的测定提供了参考。

关键词：丹酚酸A 丹酚酸B 丹酚酸C 恒河猴药代动力学

恒河猴H5N1禽流感病毒性肺炎模型建立及其发病机制

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中国人兽共患病学报 2014年第8期30卷 806-811页

作者：黎东明赖天文邓少嫦吴东张钰陈敏吕莹莹吴斌广东医学院附属医院呼吸疾病研究所湛江524001 广东省实验动物监测所

目的：探讨H5N1病毒（AF148678/ACGoose/Guangdong/11961H5N1）感染恒河猴诱发自初期至恢复期过程肺炎的机制。方法以 H5N1病毒液经鼻滴入恒河猴，染毒后第0h、12h、1d、2d、3d、4d、6d、10d、12d和14d采血作血液学和流感特异抗体检测... 详细信息

目的：探讨H5N1病毒（AF148678/ACGoose/Guangdong/11961H5N1）感染恒河猴诱发自初期至恢复期过程肺炎的机制。方法以 H5N1病毒液经鼻滴入恒河猴，染毒后第0h、12h、1d、2d、3d、4d、6d、10d、12d和14d采血作血液学和流感特异抗体检测。染毒后第1、3、6、14 d分别剖杀1只恒河猴，取气管支气管淋巴结、肺、心、肝、肾、大脑及小脑进行病毒分离、滴定、病理及免疫组化检测并观察感染后临床表现。结果猴感染后出现发热、呼吸困难，食欲下降等。病毒仅在肺组织复制，主要侵犯下呼吸道的肺泡上皮细胞和肺巨噬细胞。感染后第1～3d引起暂时性的严重肺炎，主要为中性粒细胞浸润；第6 d后逐渐恢复，以巨噬细胞浸润为主；第14 d后以 T 淋巴细胞浸润为主，肺组织呈恢复期状态。结论下呼吸道是H5N1病毒感染主要攻击的对象，这可能是H5N1病毒在人与人之间传递的障碍之一，其发病可能经过病毒侵入、复制阶段及免疫损伤阶段。

关键词： H5N1禽流感病毒恒河猴非人灵长类动物模型