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二性霉素B眼内缓释系统对白色念珠菌性眼内炎影响的实验研究

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中华眼科杂志 2006年第5期42卷 420-425页

作者：陈楠杨一涛董晓光谢立信王身国山东省眼科研究所山东省眼科学重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地青岛266071 中国科学院化学研究所

目的探讨二性霉素B眼内缓释系统对兔实验性白色念珠菌性眼内炎的治疗作用及其安全性。方法缓释系统由二性霉素B和乙交酯丙交酯己内酯三元共聚物(PGLC)制成。(1)药效学实验:50只新西兰兔右眼行中央部玻璃体切除,同时眼内注射104cfu/ml白... 详细信息

目的探讨二性霉素B眼内缓释系统对兔实验性白色念珠菌性眼内炎的治疗作用及其安全性。方法缓释系统由二性霉素B和乙交酯丙交酯己内酯三元共聚物(PGLC)制成。(1)药效学实验:50只新西兰兔右眼行中央部玻璃体切除,同时眼内注射104cfu/ml白色念珠菌悬液0.1ml,构建眼内炎模型后,随机数字表法分为5组,每组10只眼。A组,眼内炎对照组;B组,空白药物载体组;C组,二性霉素B眼液滴眼组;D组,二性霉素B眼内注射组;E组,二性霉素B眼内缓释系统组。对比观察各组眼内炎性反应。高效液相色谱分析方法定期检测眼内二性霉素B浓度。(2)毒性实验:20只正常新西兰兔分为3组:正常对照组,2只眼;DDS组,眼内植入1粒含药1mg的缓释系统,10只眼;空白载体组,眼内植入空白药物载体,8只眼。分别进行视网膜电图、眼部病理学及透射电镜检查,并行肝、肾病理学检查。结果E组在各个时间点玻璃体混浊较A、B、C组均明显减轻;E组与D组玻璃体混浊在2周内无差异,其后存在差异;D组玻璃体混浊在2周内与A、B、C组存在差异,但2周后无差异;C组在各个时间点玻璃体混浊较A、B组均无显著差异。眼内植入药物缓释系统后,视网膜电图无显著改变,视网膜病理学和电镜检查以及肝、肾病理学检查未见异常改变。结论二性霉素B眼内缓释系统能够抑制白色念珠菌性眼内炎进展。PGLC缓释系统释药稳定、安全、无毒性。

关键词：眼内炎眼感染,真菌性念珠菌,白色两性霉素B 药物释放系统

实时荧光重组酶聚合酶扩增在白色念珠菌检测中的初步应用

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中华烧伤杂志 2019年第8期35卷 587-594页

作者：蒙雨丹刘爽赵军宁彭毅志苏丹金晓君李晓鲁西南医科大学附属第一医院整形烧伤外科泸州646000 四川省中医药科学院四川省中医药转化医学中心成都610041 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 四川大学国家生物治疗重点、实验室成都610041

目的探讨实时荧光重组酶聚合酶扩增(RPA)在白色念珠菌检测中的初步应用效果。方法(1)取1mL白色念珠菌标准株及阴性对照菌铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌、大肠杆菌、光滑念珠菌标准株菌液,使用酵母/细菌基因组试剂盒提取DN... 详细信息

目的探讨实时荧光重组酶聚合酶扩增(RPA)在白色念珠菌检测中的初步应用效果。方法(1)取1mL白色念珠菌标准株及阴性对照菌铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌、大肠杆菌、光滑念珠菌标准株菌液,使用酵母/细菌基因组试剂盒提取DNA。分析PCR、实时荧光定量PCR、实时荧光RPA检测白色念珠菌的特异性。(2)取1株白色念珠菌标准株,以光滑念珠菌为阴性对照菌,复苏摇菌并计数,10倍倍比稀释为1×10^7~1×10^1集落形成单位(CFU)/mL,同实验(1)提取DNA,分析PCR、实时荧光定量PCR、实时荧光RPA检测白色念珠球菌的灵敏性。统计实时荧光定量PCR扩增曲线达到阈值所需循环数及实时荧光RPA出现特异性扩增曲线所需时间,并与PCR结果进行比对。统计3种方法对白色念珠菌的检出下限及检出率,分析实时荧光RPA中白色念珠菌浓度与检测时间之间的相关性。(3)取1株白色念珠菌标准株,同实验(1)提取DNA,分别行PCR、实时荧光定量PCR、实时荧光RPA,统计3种方法检测总时长。(4)取31份疑似感染白色念珠菌的临床样本和1份棉拭子取材的白色念珠菌临床样本提取DNA,进行PCR与实时荧光RPA,统计阳性检出率。分别采用酵母/细菌基因组试剂盒、chelex-100加热煮沸法、液氮反复冻融法提取上述2种方法检测均出现阳性结果的临床样本的DNA。同前行实时荧光RPA检测(以光滑念珠菌为阴性对照菌)和PCR检测,阴性对照菌同实验(1),观察2种方法检测是否出现阳性结果,并统计实时荧光RPA中扩增曲线达到荧光阈值所需时间。对数据行线性相关分析和t检验。结果(1)3种方法检测中白色念珠菌均出现阳性结果,5种阴性对照菌均未出现阳性结果。(2)白色念珠菌菌液浓度越低,实时荧光定量PCR中扩增曲线达到阈值所需循环数越多,实时荧光RPA中出现特异性扩增曲线所需时间越长,PCR中凝胶条带的亮度越弱,3种检测方法中阴性对照菌均未出现相应的阳性结果。实时荧光RPA、PCR与实时荧光定量PCR中白色念珠菌的检出下限均为1×10^1CFU/mL。实时荧光RPA中白色念珠菌浓度与检测时间呈明显负相关,r=-0.95,P白色念珠菌的阳性检出率均为100%。实时荧光RPA对1×101CFU/mL的白色念珠菌的阳性检出率为78%,对1×10^2~1×10^7CFU/mL的白色念珠菌的阳性检出率均为100%。(3)PCR、实时荧光定量PCR、实时荧光RPA检测白色念珠菌的总时间分别为133、93、35min。(4)实时荧光RPA对31份疑似感染白色念珠菌临床样本的阳性检出率为32.26%(10/31),低于PCR的35.48%(11/31)。11份临床样本经实时荧光RPA与PCR检测均出现阳性结果,阴性对照菌均未出现阳性结果。采用酵母/细菌基因组提取试剂盒、chelex-100加热煮沸法提取DNA进行实时荧光RPA,扩增曲线达到阈值所需时间分别为(438±13)、(462±12)s,二者相近(t=1.32,P>0.05)。液氮反复冻融法提取DNA进行实时荧光RPA,扩增曲线达到阈值所需时间为(584±15)s,明显长于另外2种方法(t=7.55、6.39,P白色念珠菌具有检测快速、操作简单、灵敏性高、特异性好等优点,值得临床推广应用。

关键词：念珠菌,白色核酸扩增技术重组酶聚合酶扩增 DNA提取快速检测

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白色念珠菌与龋病相关性的研究进展

中华口腔医学杂志 2021年第5期56卷 491-496页

作者：吕晓慧王琨张凌琳四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医学院实验教学示范中心成都610041

白色念珠菌是口腔中重要的机会致病真菌。近年来,研究发现它能与口腔常见致龋菌变异链球菌发生相互作用,对维持口腔正常的微生态平衡具有重要作用;同时白色念珠菌自身具有黏附、产酸、耐酸等作用,能使牙体硬组织脱矿,并能产生胶原蛋白... 详细信息

白色念珠菌是口腔中重要的机会致病真菌。近年来,研究发现它能与口腔常见致龋菌变异链球菌发生相互作用,对维持口腔正常的微生态平衡具有重要作用;同时白色念珠菌自身具有黏附、产酸、耐酸等作用,能使牙体硬组织脱矿,并能产生胶原蛋白酶降解牙体硬组织的有机质,具有致龋潜能。本文从白色念珠菌在患龋人群中的检出率、致龋潜力、与变异链球菌的交互作用、与其他口腔细菌的交互作用4个方面进行综述,以期拓展对口腔微生物在龋病中作用的认识,为龋病的临床防治提供新思路。

关键词：念珠菌,白色龋齿链球菌,变异微生物间相互作用口腔微生物

白色念珠菌白斑中核苷酸结合寡聚化结构域1、核因子κB及人β-防御素的表达

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中华口腔医学杂志 2014年第8期49卷 464-469页

作者：钱雅洁蒋文晖王翔段宁黄晓峰王文梅南京大学医学院附属口腔医院 210008 南京大学口腔医学院口腔黏膜病科 210008 南京大学口腔医学院病理科 210008

目的研究白色念珠菌白斑和无白色念珠菌感染的白斑患者组织中核苷酸结合寡聚化结构域1 （nucleotide-binding oligomerization domain 1,NOD1）、核因子κB及人β-防御素1,2,3的表达,探讨白色念珠菌感染对口腔白斑组织中NOD1信号通路... 详细信息

目的研究白色念珠菌白斑和无白色念珠菌感染的白斑患者组织中核苷酸结合寡聚化结构域1 （nucleotide-binding oligomerization domain 1,NOD1）、核因子κB及人β-防御素1,2,3的表达,探讨白色念珠菌感染对口腔白斑组织中NOD1信号通路内关键蛋白和人β-防御素表达的影响.方法收集40例口腔黏膜白斑组织样本,采用HE染色、过碘酸-雪夫（periodic acid-Schiff,PAS）染色、真菌银染法和免疫组化法检测,四项均阳性者19例,判定为白色念珠菌白斑,其余21例判定为无白色念珠菌感染白斑.采用蛋白质印迹法检测白色念珠菌白斑和无白色念珠菌感染的白斑组织中NOD1和核因子κB的表达水平并进行比较.采用免疫组化法检测白色念珠菌白斑和无白色念珠菌感染的白斑组织中NOD1、核因子κB和人β-防御素1,2,3的表达,图像分析测定平均吸光度值,对平均吸光度值行独立样本t检验,检验水准为双侧α=0.05.结果在40例口腔白斑中,白色念珠菌阳性率为48％（19/40）.蛋白质印迹法结果显示白色念珠菌白斑中NOD1、核因子κB蛋白表达水平较无白色念珠菌感染的白斑显著降低.免疫组化结果表明,无白色念珠菌感染的白斑中NOD1、核因子κB和人β-防御素1,2,3染色的吸光度值分别为0.31 ±0.02、0.47±0.03、0.42±0.02、0.53±0.04、0.47±0.03,白色念珠菌白斑中NOD1、核因子κB和人β-防御素1,2,3染色的吸光度值分别为0.25±0.01、0.30±0.02、0.35±0.02、0.42±0.03、0.36±0.02,白色念珠菌白斑组织中NOD1、核因子κB和人β-防御素1,2,3的表达水平均较无白色念珠菌感染组显著减弱,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论白色念珠菌感染可能通过抑制NOD1信号通路降低口腔白斑组织中人β-防御素的表达.

关键词：念珠菌,白色 β-防御素白斑,口腔核苷酸结合寡聚化结构域1

硅橡胶中纳米二氧化钛对白色念珠菌生长影响的初探

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中华口腔医学杂志 2008年第6期43卷 367-369页

作者：李蓓赵铱民杨聚才韩颖董智伟第四军医大学口腔医学院修复科西安710032 第四军医大学口腔医学院检验科西安710032

目的通过研究纳米二氧化钛对硅橡胶体外抗白色念珠菌性能的影响，探讨用纳米二氧化钛改善硅橡胶抗白色念珠菌性能的可靠性。方法硅橡胶中加入质量分数分别为0．5％、1．0％、1．5％、2．0％的纳米二氧化钛抗菌剂，分别记为A、B、C、D组... 详细信息

目的通过研究纳米二氧化钛对硅橡胶体外抗白色念珠菌性能的影响，探讨用纳米二氧化钛改善硅橡胶抗白色念珠菌性能的可靠性。方法硅橡胶中加入质量分数分别为0．5％、1．0％、1．5％、2．0％的纳米二氧化钛抗菌剂，分别记为A、B、C、D组，对照组硅橡胶不加纳米二氧化钛，采用薄膜密着法在光照和无光照条件下测定各组硅橡胶对白色念珠菌的抗菌作用。结果光照条件下，A、B、C、D组菌落数[分别为（439．0±21．9）CFU、（289．3±7．8）CFU、（173．0±7．6）CFU、（86．7±3．9）CFU]与对照组[（597．3±5．5）CFU]的差异均有统计学意义（P〈0．05）；非光照条件下，A、B、C、D组菌落数[分别为（543．7±22．8）CFU、（478．0±17．0）CFU、（422．7±21．8）CFU、（283．0±12．1）CFU]与对照组[（611．3±10．0）CFU]的差异均有统计学意义（P〈0．05）。D组抗菌性能最好，无光照条件下，抑菌率为53．7％；光照条件下，抑菌率可达85．9％。结论添加了纳米二氧化钛抗菌剂的硅橡胶在光照和无光照条件下均能抑制白色念珠菌生长，随着纳米二氧化钛质量分数的增加，硅橡胶抑菌效果增强。纳米二氧化钛质量分数相同时，光照下硅橡胶的抑菌性比无光照强。

关键词：弹性聚硅酮类念珠菌,白色纳米结构二氧化钛

新疆博尔塔拉蒙古自治州三民族儿童口腔白色念珠菌分布及其与患龋的相关性研究

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中华口腔医学杂志 2018年第11期53卷 730-735页

作者：曹宏飞董英杨婷李贝贝赵今新疆医科大学第一附属医院牙体牙髓科乌鲁木齐830054

目的检测白色念珠菌在新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙古族、维吾尔族及汉族儿童口腔中的分布，并探讨其与低龄儿童龋的相关性，以期为龋病的早预测及早预防提供依据。方法采用多阶段、分层、整群抽样、随机数字表法，对新疆博尔塔拉蒙古自治... 详细信息

目的检测白色念珠菌在新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙古族、维吾尔族及汉族儿童口腔中的分布，并探讨其与低龄儿童龋的相关性，以期为龋病的早预测及早预防提供依据。方法采用多阶段、分层、整群抽样、随机数字表法，对新疆博尔塔拉蒙古自治州1 089名3-5岁健康儿童（蒙古族136名、维吾尔族403名、汉族550名；男性568名、女性521名）进行横断面研究，按照标准分为低龄儿童龋（early childhood caries，ECC）组786名，无龋组303名。采集有龋组龋坏组织样本（取所有龋坏牙表面的牙体组织）和无龋组龈上菌斑，利用鉴别培养基分离培养，并通过革兰染色、芽管试验、PCR及内转录间隔区测序进行鉴定，PCR-25SrDNA法进行基因分型。对不同基因型白色念珠菌在不同民族、不同性别间的差异和龋失补牙数分级与白色念珠检出的关系运用Pearson χ2检验和Spearman相关分析进行统计学分析。结果样本检测结果显示，总样本中，ECC组白色念珠菌检出率[14.4%（113/786）]显著高于无龋组[7.6%（23/303）]（χ2=9.214，P=0.002）；维吾尔族白色念珠菌检出率[17.9%（72/403）]显著高于汉族[8.7%（48/550）]（χ2=17.648，P=0.000），三民族检出率差异有统计学意义（χ2=17.848，P=0.000）。男性儿童中，维吾尔族白色念珠菌检出率[21.7%（44/203）]显著高于汉族[8.4%（24/285）]（χ2=17.365，P=0.000），三民族检出率差异有统计学意义（χ2=18.887，P=0.000）；女性儿童中，蒙古族[14.3%（8/56）]、维吾尔族[14.0%（28/200）]及汉族白色念珠菌检出率[9.1%（24/265）]差异无统计学意义（χ2=3.206，P=0.201）。ECC组维吾尔族和汉族口腔白色念珠菌检出率与龋失补牙数分级具有显著相关性（维吾尔族：r=0.195，P=0.001；汉族：r=0.145，P=0.004）。136例白色念珠菌样本中PCR-25SrDNA分3型，以A型为主[55.1%（75/136）]。结论低龄儿童口腔白色念珠菌的分布具有民族差异性；携带白色念珠菌的维吾尔族男性儿童更易患龋；携带白色念珠菌可能导致ECC，白色念珠菌无特殊致龋基因型，民族与携带白色念珠菌基因型并无关联。

关键词：念珠菌,白色龋齿基因型低龄儿童龋病

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肉桂醛体外诱导白色念珠菌耐药的实验

中国临床康复 2006年第35期10卷 148-150页

作者：张文平王小丽黄真谢水祥赣南医学院病原生物学教研室江西省赣州市341000

目的:观察肉桂醛体外诱导白色念珠菌耐药性的反应情况。方法:实验于2005-02/12在赣南医学院病原生物学教研室完成。①参照美国国家临床实验室标准化委员会推荐的M27-A方案中的微量液基释法测定肉桂醛和氟康唑对原始白色念珠菌的最低抑... 详细信息

目的:观察肉桂醛体外诱导白色念珠菌耐药性的反应情况。方法:实验于2005-02/12在赣南医学院病原生物学教研室完成。①参照美国国家临床实验室标准化委员会推荐的M27-A方案中的微量液基释法测定肉桂醛和氟康唑对原始白色念珠菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。②采用多步诱导法,观察在含梯度浓度(1～50倍最低抑菌浓度)肉桂醛培养基上连续转种的白色念珠菌的最低抑菌浓度值变化情况,以氟康唑作为阳性对照,同时设空白对照和溶媒对照。③将敏感性下降的诱导株在无药培养基上连续转种10次后,检测其最低抑菌浓度值。④测定肉桂醛对氟康唑敏感性下降诱导株的最低抑菌浓度值。结果:①肉桂醛和氟康唑对原始白色念珠菌的最低抑菌浓度值分别为:0.014mg/L和2.0mg/L;肉桂醛对原始白色念珠菌的最低杀菌浓度值为0.056mg/L,氟康唑在本实验的最高浓度为64mg/L,未发现有杀菌作用。②在多步诱导培养过程中,肉桂醛组的最低抑菌浓度值始终保持不变,未诱导出对肉桂醛耐药的白色念珠菌菌株,菌株转种至含10倍最低抑菌浓度肉桂醛的培养基时,即停止生长,而在含50倍最低抑菌浓度氟康唑的培养基上菌株仍能生长。氟康唑诱导组菌株在培养过程中,其最低抑菌浓度值逐渐升高,转种至含50倍最低抑菌浓度氟康唑的培养基时,其最低抑菌浓度值(命名为FR株)是其亲株的12倍。③FR在无药培养基上连续转种10次后得到FR’,氟康唑在FR’的最低抑菌浓度值为20.16mg/L,与FR相比,差异无显著性(P>0.05)。④肉桂醛对FR的最低抑菌浓度值为0.014mg/L,与其相应的原始菌株相同。结论:肉桂醛不易产生耐药性,且对氟康唑敏感性下降的诱导株仍敏感。

关键词：念珠菌,白色肉桂氟康唑药物耐受性

白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系

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吉林大学学报（医学版） 2007年第3期33卷 483-487页

作者：曹岩张巨沙春蕊郑永晨刘永红吉林大学第二医院中心实验室吉林长春130041 吉林大学中日联谊医院手外科吉林长春130033 吉林大学第二医院麻醉科吉林长春130041 吉林省肿瘤医院电诊室吉林长春130012

目的:探讨临床白色念珠菌感染者不同标本中分离的白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系。方法:分别采用牛奶平板和卵黄培养基法检测白色念珠菌感染者不同标本(痰、血液、鹅口疮、伤口、阴道分泌物)中分离的190... 详细信息

目的:探讨临床白色念珠菌感染者不同标本中分离的白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系。方法:分别采用牛奶平板和卵黄培养基法检测白色念珠菌感染者不同标本(痰、血液、鹅口疮、伤口、阴道分泌物)中分离的190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力,分别将产酶株的菌丝相和孢子相菌悬液(5×106CFU.mL-1)注射小鼠尾静脉,1个月内观察小鼠死亡率及平均存活时间,以平均存活时间评价菌株毒力。结果:190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶阳性检出率分别为83.68%和85.26%。动物实验结果表明,菌丝相白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力均显著高于孢子相(P菌丝相白色念珠菌的小鼠死亡率高于注射孢子相的小鼠(P白色念珠菌重要毒力因子,酶活力可直接地反映其毒力和致病性。

关键词：念珠菌,白色分泌型酸性蛋白酶细胞外磷脂酶毒力

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口腔白色念珠菌检查方法的比较

中华口腔医学杂志 1990年第5期25卷 294-296+318+327页

作者：王冰燕朱延馨朱紫芳北京医科大学口腔医学院

对口腔白色念珠菌病的病原菌检查方法进行了比较,认为该病的实验室检查应以涂片检查为主,只要有明显的临床症状,涂片检查又支持念珠菌者,诊断就可成立。涂片方法以PAS染色效果最好,但氢氧化钾消化操作简便、迅速。对涂片检查不能确定为... 详细信息

对口腔白色念珠菌病的病原菌检查方法进行了比较,认为该病的实验室检查应以涂片检查为主,只要有明显的临床症状,涂片检查又支持念珠菌者,诊断就可成立。涂片方法以PAS染色效果最好,但氢氧化钾消化操作简便、迅速。对涂片检查不能确定为念珠菌者,要进行培养鉴定。Sabouraud培养基培养阳性者还应进行芽管试验,有芽管生成者可以认为是白色念珠菌,否则要观察厚膜孢子形成并作生化试验进一步鉴定。

关键词：念珠菌,白色念珠菌病,口腔实验室诊断