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miR-29a对Dicer基因敲除小鼠心脏重构的调节作用

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中国急救医学 2021年第9期41卷 797-802页

作者：申翔梁隆斌徐尚刚黄洋辉罗斌余明海成都大学附属医院急诊科四川成都610081

目的探讨微小RNA-29a(miR-29a)对Dicer基因敲除小鼠心脏重构的影响。方法将Myh6-Dicer ERT/Dicerloxp/loxp小鼠随机分为正常对照组、模型组、miR-29a过表达(miR-29a agomir)组和miR-29a阴性对照(miR-29a NC)组,每组12只。除正常对照组腹腔注射玉米油外,其余各组均经腹腔注射他莫昔酚(TMX)溶液诱导建立心肌特异性Dicer基因敲除心力衰竭(HF)模型,miR-29a agomir组尾静脉注射miR-29a agomir 6 mg/kg,连续注射3 d,1次/d,miR-29a NC组尾静脉注射miR-29a NC 6 mg/kg,连续注射3 d,1次/d。末次给药1周后,小动物超声多普勒血流仪检测左心室功能,记录左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS);酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清脑钠肽(BNP)及N端脑钠肽前体(NT-pro BNP);苏木精-伊红(HE)、马森(Masson)染色及天狼猩红染色观察小鼠心肌组织形态;实时荧光定量PCR检测心肌组织miR-29a表达水平;蛋白免疫印迹法检测小鼠心肌组织纤维化指标Ⅰ型胶原蛋白(collagen I)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达。结果与模型组比较,miR-29a agomir组小鼠心肌病理损伤减轻,LVEDD、LVESD、血清BNP、NT-pro BNP水平及心肌组织Ⅰ型胶原蛋白、MMP-9蛋白表达降低[LVEDD(mm):5.78±0.70 vs. 8.68±0.61,LVESD(mm):3.53±0.74 vs. 5.92±0.58,BNP(pg/m L):168.89±30.16 vs. 817.14±84.05,NT-pro BNP(pg/m L):193.02±33.07 vs. 990.36±96.18,Ⅰ型胶原蛋白蛋白:0.73±0.09 vs. 1.26±0.11,MMP-9蛋白:0.77±0.12 vs. 1.29±0.13,均P 重构,改善心脏功能。

关键词：微小RNA-29a Dicer基因敲除心脏重构心力衰竭(HF)

原发性高血压患者心脏重构与房室性心律失常的相关性研究

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中国综合临床 2008年第2期24卷 133-135页

作者：林文辉陈君柱温州医学院附属温岭医院心血管内科浙江省温岭市317500 浙江大学医学院附属第一医院心血管内科

目的探讨原发性高血压患者心脏重构对房、室性心律失常发生及其严重程度的影响。方法入选原发性高血压患者130例，均经超声心动图检查左房内径（LAD）、左室质量指数（LVMI）；24h动态心电图检查判定心律失常；用放射免疫法测定血清Ⅲ... 详细信息

目的探讨原发性高血压患者心脏重构对房、室性心律失常发生及其严重程度的影响。方法入选原发性高血压患者130例，均经超声心动图检查左房内径（LAD）、左室质量指数（LVMI）；24h动态心电图检查判定心律失常；用放射免疫法测定血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）浓度。结果①130例中检出左心房扩大87例（65．5％），左心室重构67例（51．5％），差异有统计学意义（P〈0．05）；房性心律失常91例（70．0％），室性心律失常72例（55．4％）差异亦有统计学意义（P〈0．05）。②不管是房性心律失常、复杂房性心律失常，还是室性心律失常、复杂室性心律失常，它们在心脏重构组的发生率均显著高于正常房室构型组（P〈0．05）。③LAD、LVMI和血清PCⅢ均在房、室性心律失常分级各级别间差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论原发性高血压患者房性心律失常多于室性心律失常，此与左心房扩大多于左心室重构有关，心脏重构对高血压患者发生房、室性心律失常起重要作用，心肌细胞肥大和心肌纤维化越严重越易发生复杂房、室性心律失常。

关键词：原发性高血压心脏重构心律失常心肌纤维化

高血压病合并心律失常患者血清脂联素与心脏重构的研究

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高血压病合并心律失常患者血清脂联素与心脏重构的研究

作者：潘昱吉林大学

学位级别：硕士

脂联素(APN)在心血管疾病中有重要作用。脑钠肽(BNP)和C-反应蛋白(CRP)已开始用于心血管系统疾病病情的危险分层预测。近年临床研究中尚未见有关高血压病合并心律失常患者血清APN水平变化,以及APN与BNP、CRP在心律失常患者血清变化的相... 详细信息

脂联素(APN)在心血管疾病中有重要作用。脑钠肽(BNP)和C-反应蛋白(CRP)已开始用于心血管系统疾病病情的危险分层预测。近年临床研究中尚未见有关高血压病合并心律失常患者血清APN水平变化,以及APN与BNP、CRP在心律失常患者血清变化的相关性方面的研究。本文目的是探讨高血压病及高血压合并心律失常患者血清脂联素水平的变化,以及其与血清BNP、CRP及心脏重构之间的关系及其临床意义。选取原发性高血压病病人51例,其中合并心律失常25例。分为合并心律失常组及单纯高血压组。正常对照组选取健康人24例。测定患者血清脂联素、BNP、CRP、等指标。计算体重指数(BMI)、左室重量指数(LVMI)。结果:合并心律失常组及单纯高血压组血清脂联素显著低于正常对照组,合并心律失常组血清脂联素显著低于单纯高血压组。合并心律失常组及单纯高血压组血清BNP及CRP水平均显著高于正常对照组,合并心律失常组血清BNP及CRP水平高于单纯高血压组。合并心律失常组血清脂联素与血清BNP、CRP呈负相关。单纯高血压组血清脂联素浓度与血清BNP、CRP呈负相关。合并心律失常组及单纯高血压组血清脂联素与左室重量指数(LVMI)、左室内径呈负相关。合并心律失常组与E/A比值呈正相关。结论:在高血压病患者,血清脂联素降低、CRP及BNP水平的升高与高血压病及其心律失常合并症的发生、发展密切相关,对于心律失常合并症的预测具有临床意义。

关键词：高血压病心律失常脂联素心脏重构

肾动脉射频消融对压力负荷性高血压及心脏重构的防治作用研究

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肾动脉射频消融对压力负荷性高血压及心脏重构的防治作用研究

作者：于亮第四军医大学

学位级别：硕士

背景:我国高血压治疗现状存在知晓率低、服药率低及控制率低的“三低”特点,高血压控制率低于10%,而且难治性高血压比例较高,更易造成靶器官的损害,严重地威胁着人类的健康;迫切需要开创新的高血压治疗途径,以提高患者的依从性,弥补药... 详细信息

背景:我国高血压治疗现状存在知晓率低、服药率低及控制率低的“三低”特点,高血压控制率低于10%,而且难治性高血压比例较高,更易造成靶器官的损害,严重地威胁着人类的健康;迫切需要开创新的高血压治疗途径,以提高患者的依从性,弥补药物疗法的不足。Krum等于2009年首次开创经皮肾交感神经射频消融（Renal Sympathetic Denervation,RSD）治疗难治性高血压,该技术显示出卓越的降压效果。但目前该技术仍处于探索阶段,其降压作用尚需进一步验证,病例筛选标准尚不明确,以及是否可改善心脏重构等靶器官损害目前尚无报道。目的:以压力负荷动物模型为研究对象,观察RSD的降压作用;研究RSD对高血压心脏重构的防治作用;通过观察去甲肾上腺素、醛固酮、血管加压素、血管紧张素II等神经体液因子的变化,初步探讨其分子机制,并期望发现有效的临床病例筛选指标。方法:采用腹主动脉缩窄术建立压力负荷性高血压兔模型,建模2个月后使用临床常用的射频消融导管经腹进行双侧肾动脉外膜消融去除肾交感神经（RSD）,术后继续饲养2个月,通过颈动脉插管测定血压数值,通过测定左室质量指数（LVMI）、心脏超声测定室壁厚度以及采用天狼猩红染色法测定心肌纤维化等指标来评估心脏重构程度,采用ELISA法检测血浆中去甲肾上腺素（Norepinephrine,NE）、血管加压素（Arginine vasopressin,AVP）、血管紧张素II（Angiotensin II,Ang II）、醛固酮（Aldosterone,Ald）的变化。结果:基于前期建立高血压模型的文献报道方法进行高血压模型的建立,使腹主动脉内径缩窄50%~60%,术后1周手术组血压水平较对照组、假手术组明显增高（P＜0.05）,术后2月手术组左室质量指数及左室后壁厚度、室间隔厚度较对照组、假手术组明显增高（P＜0.05）,成功建立了兔高血压模型。行RSD 2个月后,四组兔子的心率无明显区别,高血压组的血压仍然明显高于对照组（P＜0.05）,然而,高血压+射频组的血压低于高血压组（P＜0.05）;同时对照+射频组与对照组的血压无明显差异。高血压组与对照组比较,左室后壁厚度（Left ventricular posterior wall depth,LVPWD）、室间隔厚度（Interventricular septum depth,IVSD）、左室质量指数（Left ventricular mass index,LVMI）明显增加（P＜0.05）,高血压+射频组与高血压组比较,上述数值明显下降（P＜0.05）。通过测定组织胶原含量来观察心脏纤维化的程度,发现心肌胶原容积分数（Collagen volume fraction,CVF）在高血压组是升高的,经消融后也得以降低（P＜0.05）。表明心脏重构的程度有所缓解。压力负荷高血压动物模型血浆内NE、Ang II、Ald、AVP较对照组明显升高（P＜0.05）,双侧肾动脉射频消融后NE、AVP较高血压组明显下降（P＜0.05）,但Ald、Ang II无明显差异。结论:通过腹主动脉缩窄术可以稳定地建立新西兰兔压力负荷高血压模型。RSD可以降低压力负荷导致的血压升高,对于改善心脏长期负荷是有益的,而且还降低了心脏的肥厚程度和心肌纤维化,从某种意义上来说缓解了心脏重构。结果还显示,RSD可以下调NE、AVP水平,提示在压力负荷高血压动物模型中,RSD可能是通过降低肾动脉交感神经节传入纤维活性,调节血管加压素、去甲肾上腺素水平,达到降低血压和防治心脏重构的治疗效果。

关键词：压力负荷性高血压肾交感神经射频消融去甲肾上腺素血管加压素心脏重构

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N-乙酰半胱氨酸对高血压心脏重构的影响

N-乙酰半胱氨酸对高血压心脏重构的影响

作者：李小波南京医科大学

学位级别：硕士

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对高血压大鼠心脏重构的影响及其作用机理。方法结扎SD大鼠腹主动脉造成高血压模型，随机分为四周组及八周组，前者再次随机分为手术组及非手术组，而后者进一步随机分为手术组、非手术组及手术+NAC组(NAC 7... 详细信息

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对高血压大鼠心脏重构的影响及其作用机理。方法结扎SD大鼠腹主动脉造成高血压模型，随机分为四周组及八周组，前者再次随机分为手术组及非手术组，而后者进一步随机分为手术组、非手术组及手术+NAC组(NAC 75mg／d，共4周)。两组大鼠分别于四周及八周时分别测定心脏功能、颈动脉血压、左室质量，观察心脏组织中还原型谷胱甘肽及基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分布，并测定心脏组织胶原含量的变化。结果与手术组相比，手术+NAC组大鼠收缩压明显降低[(161±6)vs(198±10)mmHg，P＜0.05]、左心室收缩功能明显改善[EF(77.2±6.4)％vs(90.6±2.7)％，SF(56.53±4.37)％vs(41.02±5.84)，P均＜0.05]、心肌组织中还原型谷胱甘肽的含量显著增加[(84.5±7.1)％vs(38.6±3.4)％P＜0.05]，而左室质量(1.33±0.05 vs 1.46±0.1g，P＜0.05)及心肌组织中的基质金属蛋白酶分布均显著降低[MMP-2(56.9±6.1)％vs(96.8±4.8)％，P＜0.05;MMP-9(43.7±8.1)％vs (90.6±6.7)％]、心肌胶原含量明显减少。结论N-乙酰半胱氨酸通过增加心肌组织还原型谷胱甘肽含量，改善心肌组织氧化还原状态，从而减缓高血压大鼠心脏的进一步重构。

关键词： N-乙酰半胱氨酸谷胱甘肽高血压心脏重构

胰岛素抵抗与脂联素基因敲除对小鼠心脏重构的影响

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胰岛素抵抗与脂联素基因敲除对小鼠心脏重构的影响

作者：徐璐宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的:观察野生小鼠和脂联素基因敲除(APNKO)小鼠是否可导致心脏重构,以及胰岛素抵抗(IR)和脂联素(APN)缺乏是否可进一步加重所致的心脏重构。方法:选择16只野生C57小鼠随机分为对照组(Control组)和胰岛素抵抗组(IR组),16只脂联素基因敲... 详细信息

目的:观察野生小鼠和脂联素基因敲除(APNKO)小鼠是否可导致心脏重构,以及胰岛素抵抗(IR)和脂联素(APN)缺乏是否可进一步加重所致的心脏重构。方法:选择16只野生C57小鼠随机分为对照组(Control组)和胰岛素抵抗组(IR组),16只脂联素基因敲除小鼠随机分为脂联素基因敲除组(APNKO组)和脂联素基因敲除+胰岛素抵抗(APNKO+IR组),其中Control组和APNKO组给予普通饲料,其余两组给予高脂饲料诱导产生胰岛素抵抗。饲养各组小鼠12周,测量小鼠体重(BW),给予禁食禁水12小时,采集鼠尾末端测量空腹血糖(FPG),取血清测量用自动生化仪测量血清甘油三酯(TG)及胆固醇(TC)的浓度,用Elisa法测量空腹胰岛素(FINS)以及血清APN的浓度,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。取出心脏,分离左心室,称取全心重量(HW)以及左心室重量(LVW),并计算全心重量指数(HWI)和左心重量指数(LVWI)。用分离的左心室做HE染色观察心肌结构的改变情况,用Masson染色观察心肌纤维化的程度,并计算心肌胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA)的含量以评价血管周围纤维化程度。用免疫组化和Western Blot的方法检测心肌APN及脂联素受体1(Adipo R1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平。采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)测定心肌APN及Adipo R1的m RNA表达。对心肌MMP-9的表达与HOMA-IR、血清APN水平、心肌APN和Adipo R1的关系用相关性分析。结果:1、析因分析结果如下。脂联素基因敲除与胰岛素抵抗对BW、HW、LVW、HWI和LVWI无交互效应(P>0.05)。脂联素基因敲除与胰岛素抵抗对FPG、FINS、CVF、PVCA、血清及心肌APN,心肌APN受体1、心肌MMP-9有交互效应(P>0.05)。2、HE染色:Control组小鼠可观察到排列整齐、形态正常、界限清晰的心肌细胞及胞间结构。IR组和APNKO组小鼠心肌细胞胞间结构界限模糊,排列紊乱。而APNKO+IR组心肌细胞核固缩,碎裂,溶解,消失,胞间界限更加模糊,心肌细胞排列更加紊乱,并出现炎性细胞浸润。3、Masson染色:与Control组相比较,IR组和APNKO组CVF和PVCA显著增大,与IR组和APNKO组比较,APNKO+IR组CVF和PVCA显著增多。4、免疫组化:(1)心肌APN和Adipo R1阳性染色结果为棕黄色,主要分布为心肌细胞膜和细胞质。与Control组比较,IR组小鼠心肌APN和Adipo R1表达减低。与IR组比较,APNKO组小鼠心肌APN和Adipo R1蛋白表达水平均显著降低(P>0.05)。APNKO+IR组心肌APN和Adipo R1表达明显降低,与IR组和APNKO组比较差异显著;(2)心肌MMP-9阳性染色结果为棕黄色,主要分布为心肌细胞膜、细胞质和血管周边基质细胞。与Control组比较,IR组小鼠心肌MMP-9表达增加。与IR组比较,APNKO组小鼠心肌MMP-9蛋白表达水平均显著增加(P心脏重构,两者在心脏重构过程中起协同促进作用。

关键词：脂联素胰岛素抵抗心脏重构

活血解毒降糖方对糖尿病急性冠脉综合征经皮冠脉介入术后心脏重构的影响

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中国中西医结合急救杂志 2016年第2期23卷 117-121页

作者：符显昭许靖李春燕黄文华李星婵邱石源广西壮族自治区右江民族医学院附属医院中医科广西壮族自治区百色533000

目的探讨活血解毒降糖方对糖尿病并发急性冠脉综合征（ACS）患者经皮冠脉介入术（PCI）后心脏重构以及心功能预后的影响，并探讨其可能作用机制。方法采用前瞻性研究方法，选择2014年2月至2015年8月广西壮族自治区右江民族医院附属医院... 详细信息

目的探讨活血解毒降糖方对糖尿病并发急性冠脉综合征（ACS）患者经皮冠脉介入术（PCI）后心脏重构以及心功能预后的影响，并探讨其可能作用机制。方法采用前瞻性研究方法，选择2014年2月至2015年8月广西壮族自治区右江民族医院附属医院中医科收治的65例已行PCI术的糖尿病ACS患者，按计算机随机排序法分为观察组33例和对照组32例。观察组在标准化西医治疗基础上加用活血解毒降糖方；对照组给予单纯的西医标准化治疗，疗程均为2个月。治疗前后用心脏彩色超声检测左心室舒张期末直径（LVEDD）、左室收缩期末直径（LVESD）、左室舒张期末室间隔厚度（LVEST）、左室后壁厚度（LVPWT）、左室短轴缩短率（AFS）、每搏量（SV）、心排血量（CO）、心排血指数（CI）、左室射血分数（LVEF）、二尖瓣快速充盈期与心房收缩期血流速度比值（E／A）；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清血管紧张素-Ⅱ（Ang-Ⅱ）、C-反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，并评价心功能和临床疗效。结果观察组临床总有效率明显高于对照组[87．88％（29／33）比68．75％（22／32），P〈0．05]；两组治疗后血清炎性介质（IL-6、TNF-α、CRP）及Ang-Ⅱ水平均较治疗前明显降低，且观察组的降低程度较对照组更显著[IL-6（ng／L）：128．72±32．79比144．48±37．69，TNF-α（ng／L）：28．45±7．55比36．14±13．83，CRP（ng／L）：4．69±1．02比7．98±2．16，Ang-Ⅱ（ng／L）：72．98±18．53比83．47±22．39，均P〈0．05]；治疗后观察组左室形态学指标LVEDD、LVESD均低于对照组[LVEDD（mm）：51．85±2．82比58．45±2．93，LVESD（mm）：36．85±3．68比41．85±3．45．均P〈0．05]，而左室功能指标△Fs、SV、CO、CI、LVEF、E／A明显高于对照组[△FS（％）：32．86±5．02比26．7±4．86，SV（mL）：68．77±4．28比48．66±3．86，CO（L／min）：5．87±0．82比5．21±0．38，CI（mL·s^-1·m^-2）：55．56±8．82比47．85±8．38，LVEF：0．598±0．039比0．520±0．038，E／A：1．48±0．17比1．08±0．19，P〈0．05或P〈0．01]。结论活血解毒降糖方能够改善糖尿病ACS患者PCI术后心脏重构，提高心功能，从而改善预后，治疗作用部分来自于抗炎和调节Ang-Ⅱ水平。

关键词：活血解毒降糖方糖尿病急性冠脉综合征经皮冠脉介入术心脏重构

权重基因共表达网络分析发现心肌梗死后心脏重构的关键调控通路与基因

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中国病理生理杂志 2010年第A10期26卷 1995-1996页

作者：钟诗龙余细勇郑志伟杨敏符永恒广东省医学科学院心血管病研究所广东省人民医院医学研究中心广东广州510080

目的:心肌梗死后的心脏重构是发生慢性心力衰竭的主要病理基础,其分子机制仍不清楚。本文采用权重基因共表达网络分析方法(WGCNA)挖掘心肌梗死后心脏重构的关键调控通路与关键调控基因。方法:从NCBI的GEO下载2个心肌梗死后心脏重构的全... 详细信息

目的:心肌梗死后的心脏重构是发生慢性心力衰竭的主要病理基础,其分子机制仍不清楚。本文采用权重基因共表达网络分析方法(WGCNA)挖掘心肌梗死后心脏重构的关键调控通路与关键调控基因。方法:从NCBI的GEO下载2个心肌梗死后心脏重构的全基因组表达数据GSE14267和GSE738。数据初处理,用WGCNA构建基因共表达网络,分析模块向量基因,识别与心脏重构相关的模块,然后对相关模块进行信号通路分析和可视化分析。结果:分析发现在GSE14267,17个模块中有6个模块与心脏重构显著相关,模块基因显著富集于16条KEGG信号通路。在GSE738,5个模块与心脏重构显著相关,模块基因显著富集于15条K

关键词：心脏重构调控通路网络分析慢性心力衰竭信号通路可视化分析氧化磷酸化连通性

MicroRNA-137与AngⅡ在自发性高血压大鼠心脏重构中的作用

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中国比较医学杂志 2016年第7期26卷 52-56页

作者：侯永兰李石林刘玲玲河南省新乡市中心医院心内一科河南新乡453000

目的探讨微小核糖核酸195(MicroRNA-137,miRNA-137)、TGF-β1/Smads信号转导通路及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在自发性高血压大鼠(SHR)心脏重构中的作用。方法取雄性SHR大鼠16只,随机分为SHR干预组(卡托普利10 mg/kg·d)和SHR对照组(蒸馏水)各... 详细信息

目的探讨微小核糖核酸195(MicroRNA-137,miRNA-137)、TGF-β1/Smads信号转导通路及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在自发性高血压大鼠(SHR)心脏重构中的作用。方法取雄性SHR大鼠16只,随机分为SHR干预组(卡托普利10 mg/kg·d)和SHR对照组(蒸馏水)各8只,另取Wistar大鼠8只为正常对照组,分别给予SHR大鼠卡托普利10 mg/kg·d和蒸馏水灌服,共持续8周。造模前后测大鼠尾动脉血压,8周后股动脉放血处死大鼠,HE染色观察大鼠心脏形态学改变,实时荧光定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)法检测大鼠心脏中miRNA-137的表达,Western-blot检测转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、Smad蛋白3(small mother against decapen-taplegic protein three,Smad3)、I型胶原(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)蛋白表达水平。结果 SHR大鼠心脏miRNA-137、AngⅡ、TGF-β1、Smad3、Col-Ⅰ及Col-Ⅲ的表达量均高于Wistar大鼠(P心脏重构;卡托普利干预可抑制miRNA-137表达。

关键词：心脏重构 miRNA-137 自发性高血压大鼠 TGF-β1/Smads信号通路