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婴儿右心室心内膜起搏5例临床分析

国际儿科学杂志 2024年第7期51卷 499-502页

作者：史宏岩刘菁晶王雅洁林文华泰达国际心血管病医院心内一科，天津　300457

目的:探讨婴儿心内膜起搏的可行性、安全性及长期预后。方法:回顾性分析2004年7月至2019年9月因先天性心脏病在泰达国际心血管病医院儿外科行矫治手术、术后发生完全性房室传导阻滞、经左侧锁骨下静脉植入右心室心尖部单腔永久起搏器的... 详细信息

目的:探讨婴儿心内膜起搏的可行性、安全性及长期预后。方法:回顾性分析2004年7月至2019年9月因先天性心脏病在泰达国际心血管病医院儿外科行矫治手术、术后发生完全性房室传导阻滞、经左侧锁骨下静脉植入右心室心尖部单腔永久起搏器的5例婴儿的临床资料。收集起搏器术中、术后1、3、6个月及每年起搏器参数和不良事件。结果:5例婴儿中，男2例、女3例，月龄3~10（5.6±2.7）个月，身长56~66（62.6±3.8）cm，体重5.0~7.6（6.0±1.0）kg。5例患儿手术均获成功。病例1电话随访19年，因起搏器电池耗竭于术后第6年和第14年两次更换起搏器;病例2门诊随访13年，术后第9年更换起搏器，术后第12年因电极导线感知功能障碍发生意识丧失1次后再次入院，造影发现左侧锁骨下静脉闭塞，经右侧锁骨下静脉植入双腔起搏器;病例3门诊随访13年，术后第9年更换起搏器;病例4失访;病例5门诊随访4年。4例随访患儿均未发生心力衰竭。结论:右心室心内膜起搏在婴儿中也是可行和有效的，可以作为心外膜起搏的一种替代方法。随访期间要密切关注三尖瓣反流、电极导线功能、心力衰竭、锁骨下静脉闭塞等问题，远期潜在风险有待进一步观察研究。

关键词：儿童起搏器心内膜婴儿

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心内膜细胞体外模型的建立与鉴定

心内膜细胞体外模型的建立与鉴定

作者：许飞北京协和医学院

学位级别：硕士

研究背景:心内膜是一种特化的内皮细胞,分布在心脏的内表面。研究表明小鼠心内膜参与成体心肌梗死、心脏损伤等疾病修复过程,成人心内膜功能障碍在冠心病、心力衰竭等心脏疾病中具有重要影响。虽然人和小鼠心内膜在成体心脏疾病与损伤... 详细信息

研究背景:心内膜是一种特化的内皮细胞,分布在心脏的内表面。研究表明小鼠心内膜参与成体心肌梗死、心脏损伤等疾病修复过程,成人心内膜功能障碍在冠心病、心力衰竭等心脏疾病中具有重要影响。虽然人和小鼠心内膜在成体心脏疾病与损伤修复中起着重要的作用,但是心内膜在其中发挥作用的具体分子机制尚不清楚。已有心内膜相关研究以动物在体实验为主,但在由多种细胞类型和基质组成的复杂体内系统中,研究心内膜在心脏疾病和损伤修复中的具体机制仍存在困难。因此,构建心内膜体外培养模型是研究心内膜细胞功能及分子机制的重要路径。原代细胞具有和体内细胞密切接近的生理特征,可作为其体内细胞功能特性的良好指标。然而,原代细胞分离耗时长,所获得的细胞数量少且传代次数有限。目前,人和小鼠心内膜都缺少可以在体外长期培养的细胞系。心内膜细胞体外模型主要停留在小鼠原代心内膜的分离与短期培养上。与原代小鼠心内膜相比,人原代心内膜细胞受伦理和资源的限制更加难以获得,且其在体外难以培养。为了克服这些问题,构建可在体外长期培养的人和小鼠心内膜细胞模型就尤为重要。细胞永生化可以延长原代细胞的寿命,同时保留其特性和功能。细胞永生化可以使那些体外传代次数受限、容易衰老的细胞获得无限增殖的能力,从而为研究人员提供更好的细胞模型。为了获得能够在体外长期培养的小鼠心内膜细胞系,本研究利用永生化的方法构建了小鼠永生化心内膜细胞体外模型。人多能干细胞是利用重编程技术将成人的体细胞恢复到类似胚胎干细胞的多能细胞状态。通过重编程技术,可以将其诱导分化产生各种细胞类型。为了获得能够在体外长期培养的人心内膜细胞系,本研究通过体外诱导分化建立了人心内膜细胞体外模型。由于人和小鼠之间心脏的保守性,在一定程度上可以使用小鼠心内膜细胞模型对人类心脏疾病和损伤修复进行研究。但是,由于人和小鼠的基因组之间存在差异,许多基因调节是人类特有的,人类和非人类心脏之间存在相当大的功能物种差异,基于动物模型的药物及治疗手段在临床应用中转化效率不尽人意。因此,本研究构建的人和小鼠心内膜细胞不仅有望用于心脏疾病发生和心脏损伤修复的研究,而且通过比较两者之间的特异性和保守性,有助于更好的开发新的人类疾病治疗策略。研究目的:(1)本研究旨在通过a.感染SV40-LT-GFP-PURO病毒使原代心内膜细胞永生化,构建小鼠永生化心内膜体外模型;b.诱导分化人iPSCs,构建人心内膜体外模型。通过构建的人和小鼠心内膜细胞体外模型,促进心内膜在心脏疾病和心脏损伤修复中的研究。(2)通过比较人和小鼠心内膜细胞之间的特异性和保守性,促进更好的开发人类心脏疾病治疗策略。研究方法:1.小鼠永生化心内膜细胞系的建立与鉴定(1)摸索不同消化时间和消化酶浓度,确定小鼠心内膜细胞分离的最佳消化条件;(2)对分离得到的小鼠原代心内膜细胞进行鉴定。通过显微镜观察对分离得到的细胞进行形态学观察;利用实时荧光定量PCR和免疫荧光检测分离得到的细胞中心内膜特异性基因的表达情况;(3)通过对分离得到的原代心内膜细胞进行连续传代,观察其在体外的扩增能力;(4)通过SV40-LT-GFP-PURO病毒感染小鼠原代心内膜细胞,获得小鼠永生化心内膜细胞;多次体外扩增,使细胞量达到105以上;通过CD31磁珠分选,获得纯化的小鼠永生化心内膜细胞;(5)对得到的小鼠永生化心内膜细胞进行形态学观察和基因表达鉴定。通过对小鼠永生化心内膜细胞系连续传代,观察其经过多次扩增后是否能维持典型的鹅卵石样内皮形态;通过实时荧光定量PCR鉴定永生化心内膜细胞心内膜细胞中心内膜特异性基因表达情况;(6)通过体外血管生成和乙酰化低密度脂蛋白吸附实验对永生化小鼠心内膜细胞进行功能鉴定。技术路线如下:2.人心内膜细胞系的建立与鉴定(1)通过明场显微镜和实时荧光定量PCR对所使用的人iPS细胞系进行形态学观察和多能性基因表达情况鉴定;(2)将人iPSCs诱导分化形成内皮细胞,通过CD144磁珠分选对诱导分化得到的内皮细胞(hiPSC-ECs)进行纯化;(3)对hiPSC-ECs的分化效率进行鉴定。通过实时荧光定量PCR和免疫荧光对其内皮特异性基因表达进行鉴定;通过体外血管生成和乙酰化低密度脂蛋白对hiPSC-ECs进行功能鉴定;(4)通过实时荧光定量PCR对人iPS细胞诱导分化形成的心内膜细胞(hiPSC-ENs)中心内膜特异性基因表达进行鉴定。技术路线如下:研究结果:1.小鼠永生化心内膜细胞系的建立与鉴定(1)原代心内膜分离条件确定:根据消化所得细胞数量和细胞贴壁率情况,确定小鼠原代心内膜细胞消化分离的最佳条件是liberase浓度0.5mg/mL,消化时间 5min;(2)原代心内膜鉴定与传代:分离得到的小鼠原代心内膜细胞呈现典型的鹅卵石样细胞形态,表达心内膜特异性基因和蛋白,但是数量少且传代次数有限;(3)

关键词：心内膜细胞分离永生化 iPSCs 细胞模型损伤修复

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心内膜对大鼠肥厚心肌力学的影响(英文)

中国药理学报 1995年第4期16卷 352-356页

作者：储国祥凌琦郭兆贵湖南医科大学药理研究室

目的:观察心内膜对大鼠肥厚心肌力学的影响.方法:采用两肾一夹肾性高血压大鼠离体乳头肌标本,化学去内膜法. 结果:肾血管性高血压大鼠肥厚乳头状肌等长收缩静息张力、发展张力与假手术组相似,±dT/dt_(max)降低,+dT/dt_(max)及—dT/dt_(... 详细信息

目的:观察心内膜对大鼠肥厚心肌力学的影响.方法:采用两肾一夹肾性高血压大鼠离体乳头肌标本,化学去内膜法. 结果:肾血管性高血压大鼠肥厚乳头状肌等长收缩静息张力、发展张力与假手术组相似,±dT/dt_(max)降低,+dT/dt_(max)及—dT/dt_(max)时程、收缩峰值时间及半数舒张时间延长.去除心内膜心肌标本收缩峰值时间及半数舒张时间显著缩短,—d7/dt_(max)显著升高而+dTdt_(max)无改变,因而两者比值显著下降. 结论:心内膜主要影响心肌舒张反应及舒张早期充盈,在心肌肥厚代偿机制中起到一定作用.

关键词：心内膜高血压心脏肥厚心肌收缩乳头状肌

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选择性集成学习方法提取超声心动图的心内膜

声学学报 2012年第3期37卷 244-251页

作者：郭翌汪源源孔德红舒先红复旦大学电子工程系上海200433 复旦大学附属中山医院心内科上海200032

针对超声心动图特点,提出了一种选择性集成学习方法心内膜提取算法。先在超声心动图中根据形状先验知识确定感兴趣区域(ROI);然后对ROI中的每个候选像素点,提取多个不同性质的特征参数;将其输入选择性集成学习算法,得到模糊分类结果;最... 详细信息

针对超声心动图特点,提出了一种选择性集成学习方法心内膜提取算法。先在超声心动图中根据形状先验知识确定感兴趣区域(ROI);然后对ROI中的每个候选像素点,提取多个不同性质的特征参数;将其输入选择性集成学习算法,得到模糊分类结果;最后将分类结果作为活动轮廓算法的外能,进一步获得光滑完整的心内膜边缘。对超声心动图分别采用本文方法和其他边缘提取方法进行比较实验。结果表明,相对于传统活动轮廓模型,本文方法分割图像的最小距离绝对差减少了2.56个像素点,面积重叠百分比提高了17.80%。可见,本文方法对噪声和初始轮廓不敏感,提取的心内膜边缘与医生手工勾画边缘最接近,性能优于现有算法。

关键词：超声心动图选择性集成提取算法学习方法心内膜活动轮廓模型模糊分类感兴趣区域

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心内膜心肌活检439例次的安全性分析

中华心血管病杂志 2010年第1期38卷 43-46页

作者：黄洁杨跃进尹栋丰雷廖中凯王勇徐波刘焱胡盛寿中国医学科学院北京协和医学院心血管病研究所阜外心血管病医院心脏移植中心 100037

目的回顾性分析心内膜心肌活检（EMB）的主要和次要并发症，提供EMB的安全性信息。方法入选阜外心血管病医院2004年5月至2008年11月的439例次右心室EMB病例。采用Cordis公司改良的长45em的Caves-Shulz一次性活检钳，透视下，从右颈内静... 详细信息

目的回顾性分析心内膜心肌活检（EMB）的主要和次要并发症，提供EMB的安全性信息。方法入选阜外心血管病医院2004年5月至2008年11月的439例次右心室EMB病例。采用Cordis公司改良的长45em的Caves-Shulz一次性活检钳，透视下，从右颈内静脉入径行右心室室间隔EMB。操作者共4人，均在有EMB经验人员指导下完成50例后开始独立操作。术中和术后12h进行血压和心电监测，术后作胸片观察有无气胸和血胸，作心电图和超声心动图与术前对照评价有否新出现的传导阻滞、心包积液和瓣膜反流。结果4．5年间147例患者共进行了439次EMB。其中15例心肌病和1例怀疑心脏肿瘤的患者各进行了1次EMB；131例原位心脏移植的患者共进行423次EMB，平均3．2次／人。未发生心肌穿孔、血性胸腔积液和气胸等主要并发症。次要并发症中持续〉24h的右束支传导阻滞1例（0．23％），暂时（持续〈24h）右束支传导阻滞2例（0．47％），无房室传导阻滞、非持续室性心动过速或心房颤动发生。其他并发症——超声心动图发现4例患者（0．91％）新出现三尖瓣轻至中量关闭不全。所有并发症长期随访均未发现后遗症。结论熟练的操作者在透视下经右颈内静脉行EMB的并发症非常少见。

关键词：心内膜手术中并发症活检

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小鼠永生化心内膜细胞系的建立与鉴定

中国分子心脏病学杂志 2023年第2期23卷 5318-5325页

作者：许飞张慧国家心血管病中心、北京协和医学院、中国医学科学院、阜外医院心血管疾病国家重点实验室北京市100037

目的构建小鼠心内膜体外培养模型,促进心内膜在心脏损伤和修复中的机制研究。方法利用酶消化法获得心室游离壁原代心内膜细胞,利用RT-qPCR和免疫荧光对心内膜相关标志物进行鉴定;之后通过SV40-LT-GFP-PURO慢病毒感染分离得到的原代心内... 详细信息

目的构建小鼠心内膜体外培养模型,促进心内膜在心脏损伤和修复中的机制研究。方法利用酶消化法获得心室游离壁原代心内膜细胞,利用RT-qPCR和免疫荧光对心内膜相关标志物进行鉴定;之后通过SV40-LT-GFP-PURO慢病毒感染分离得到的原代心内膜细胞,经过嘌呤霉素筛选、传代扩增、CD31磁珠分选纯化后,获得永生化的小鼠心内膜细胞系,并对其进行形态学评估、分子标志物检测和功能学验证。结果分离得到的原代心内膜细胞呈现鹅卵石样细胞形态,表达心内膜特异性基因和蛋白,但是数量少且传代次数有限。永生化的小鼠心内膜细胞系表达心内膜特异性基因,保留了体外血管生成和乙酰化低密度脂蛋白摄取的功能特性,且能维持与原代心内膜相似的鹅卵石样形态至少传代15次。结论本研究成功构建了能多次传代且保留心内膜特异性基因表达特征和内皮细胞功能特性的小鼠永生化心内膜细胞系。

关键词：细胞分离细胞模型心内膜永生化

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心内膜三维标测系统的信号处理

中国组织工程研究与临床康复 2011年第26期15卷 4850-4853页

作者：陈中中朱蛟英苏智剑夏振宏郑州大学机械工程学院河南省郑州市450001 河南华南医电科技有限公司河南省郑州市450001

背景:信号处理是普通导管心内膜三维标测中一项关键技术,需根据其特征设计处理流程,传统处理方法无法消除信号中的大量噪声。目的:进行心内膜三维标测原理的体外模拟实验及信号处理。方法:设计专用压控恒流源做电场激励源以降低噪声,并... 详细信息

背景:信号处理是普通导管心内膜三维标测中一项关键技术,需根据其特征设计处理流程,传统处理方法无法消除信号中的大量噪声。目的:进行心内膜三维标测原理的体外模拟实验及信号处理。方法:设计专用压控恒流源做电场激励源以降低噪声,并利用MATLAB信号处理功能对数据进行处理,分别采用带通滤波、包络提取、小波降噪、求均值等方法计算出标测距离,并与实际距离进行对比。结果与结论:该方法有效地降低噪声、直流分量等干扰因素,得到了正确的标测向量,解决了普通导管心内膜三维标测中的信号处理问题,并减小了由呼吸及心跳所引起的定位误差,由此计算所得标测向量误差ε心内膜三维标测系统的信号处理。

关键词：心内膜标测信号处理包络检波小波降噪

培养的牛心内膜内皮细胞水解细胞外腺苷酸<英文>

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中国药理学报 1999年第8期20卷 745-749页

作者：易富贤刘文兰谌立伟曾珊郭兆贵湖南医科大学分子药理研究室长沙中国410078

目的:研究牛心内膜内皮细胞(BEEC)腺苷三磷酸双磷酸酶(apyrase)的特性并比较牛心内膜及血管内皮细胞的胞外腺苷酸酶活性。方法:以反相HPLC测定核苷酸含量,以磷离子释放法检测apyrase活性。结果:叠氮钠10mmol·L^(-1)和氟化钠20mmol·L^(... 详细信息

目的:研究牛心内膜内皮细胞(BEEC)腺苷三磷酸双磷酸酶(apyrase)的特性并比较牛心内膜及血管内皮细胞的胞外腺苷酸酶活性。方法:以反相HPLC测定核苷酸含量,以磷离子释放法检测apyrase活性。结果:叠氮钠10mmol·L^(-1)和氟化钠20mmol·L^(-1)分别抑制BEEC apyrase 51％及38％活性,而Na^+/K^+ -ATP酶抑制剂哇巴因则对BEEC apyrase活性无影响。过氧化氢0.5mmol·L^(-1)呈时间依赖性地抑制心内膜内皮细胞apyrase活性。BEEC的apyrase活性低于主动脉内皮细胞的apyrase活性,而BEEC的胞外AMP酶则远较血管内皮细胞的活性高。结论:BEEC apyrase具有叠氮钠和氟化钠敏感的、哇巴因不敏感的特性;与血管内皮细胞相比,BEEC apyrase活性较高而胞外AMP酶活性较低。

关键词：心内膜血管内腺苷酸类叠氮钠 apyrase

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心内膜微波消融治疗永久性心房颤动

中华心血管病杂志 2008年第5期36卷 402-403页

作者：周勇李莉徐志云王志农赵峰上海第二军医大学长海医院胸心外科

本研究观察心内膜微波消融治疗永久性心房颤动（房颤）的中远期疗效。资料与方法1．一般资料：2001年10月至2005年7月，36例风湿性心脏瓣膜病（均有术后病理证实）患者在我院接受心脏外科手术。消融组22例（男15例，女7例）联合微波消... 详细信息

本研究观察心内膜微波消融治疗永久性心房颤动（房颤）的中远期疗效。资料与方法1．一般资料：2001年10月至2005年7月，36例风湿性心脏瓣膜病（均有术后病理证实）患者在我院接受心脏外科手术。消融组22例（男15例，女7例）联合微波消融术，年龄（48．7±8．8）岁，房颤持续时间（3．9±1．4）年；二尖瓣置换术17例，

关键词：永久性心房颤动微波消融治疗心内膜风湿性心脏瓣膜病心脏外科手术房颤持续时间二尖瓣置换术中远期疗效