检索结果-南通市图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2023年第5期39卷 692-698页

作者：张雅婷李文娜彭伟盼天津大学生命科学学院天津300072

微rna(microrna,mirna)是一类内源性非编码小rna,在细胞增殖、分化及凋亡等生物过程中发挥重要调节作用,其异常表达与多种疾病的发生发展密切相关。因此,对特定mirna进行精准检测,有助于疾病的早期诊断与及时治疗。核酸生物传感器凭借... 详细信息

微rna(microrna,mirna)是一类内源性非编码小rna,在细胞增殖、分化及凋亡等生物过程中发挥重要调节作用,其异常表达与多种疾病的发生发展密切相关。因此,对特定mirna进行精准检测,有助于疾病的早期诊断与及时治疗。核酸生物传感器凭借化学性质稳定、设计简单、可编程性及易修饰等优点受到广泛关注。其中,G-四链体功能性核酸是一种富含鸟嘌呤的DNA通过Hoogsteen型氢键形成的特殊空间结构,因其可通过范德华力及疏水作用等相互作用力与卟啉、染料和氯化血红素(hemin)等小分子结合并增强其理化性质,而广泛应用于mirna检测领域。目前,G-四链体常与核酸扩增或纳米信号放大技术联用以提高灵敏度,既可用于目标识别,又可辅助信号输出。本文首先介绍了G-四链体的结构及其荧光增强及过氧化物酶活性提升的机制;其次,依据上述特性分别论述了G-四链体与荧光配体结合构建mirna荧光生物传感器的研究进展,以及基于G-四链体/Hemin的mirna生物传感平台,在比色、电化学及化学发光检测中的应用进展;最后讨论G-四链体在mirna检测领域所面临的挑战,并展望未来发展趋势,以期促进高灵敏度及特异性的核酸生物传感器的构建。

关键词： G-四链体微RNA检测功能性核酸生物传感器

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高通量SPRI技术与microrna检测

引用

中国生物化学与分子生物学报 2015年第2期31卷 146-152页

作者：彭芳顾大勇中山大学会共卫生学院卫生检验与检疫专业广州510000 深圳国际旅行卫生保健中心卫生检疫中心实验室深圳518000

mirna是一种内源性小分子非编码rna,含19-23个核苷酸,通过与mrna的3＇非编码区结合从而阻断翻译,调节植物或动物的基因表达,并在细胞发育过程中包括细胞裂解、增殖、凋亡及诱导疾病发挥重要的作用.因此,mirna迅速成为生命科学研究的新领... 详细信息

mirna是一种内源性小分子非编码rna,含19-23个核苷酸,通过与mrna的3＇非编码区结合从而阻断翻译,调节植物或动物的基因表达,并在细胞发育过程中包括细胞裂解、增殖、凋亡及诱导疾病发挥重要的作用.因此,mirna迅速成为生命科学研究的新领域.而检测mirna的表达是研究mirna功能的第一步.表面等离子体共振成像（surface plasmon resonance imaging,SPRI）技术是一种基于光学原理的传感检测技术,它利用表面等离子体共振原理,可将生物分子相互作用或生化反应的信号转化成光信号进行传感,具有无需标记、实时检测、快速、高通量检测等优点,在mirna的检测上将显示出巨大的发展潜力和应用价值.本文对目前mirna的检测方法,以及高通量SPRI技术在mirna检测中的应用发展趋势做一综述.

关键词：微rna 微RNA检测表面等离子体共振成像技术

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

纳米材料结合循环扩增反应用于金属离子、核酸分子的分析

纳米材料结合循环扩增反应用于金属离子、核酸分子的分析

引用

作者：李亚拿江苏科技大学

学位级别：硕士

金属离子(如铜、锌离子)和生物分子(如rna、DNA)在各种生物过程中发挥着重要的作用。近年来,高灵敏检测金属离子以及在疾病中具有指示性的生物分子微rna(mirna)引起了研究领域的浓厚兴趣。然而,金属离子浓度过低或过高都会对生物系统产... 详细信息

金属离子(如铜、锌离子)和生物分子(如rna、DNA)在各种生物过程中发挥着重要的作用。近年来,高灵敏检测金属离子以及在疾病中具有指示性的生物分子微rna(mirna)引起了研究领域的浓厚兴趣。然而,金属离子浓度过低或过高都会对生物系统产生不利影响。因此,迫切需要开发高灵敏度和选择性的方法来检测人体内的和日常饮食中的金属离子。组织或体液中与疾病相关的生物标志物通常在疾病的早期阶段表达水平比较低,难以用常规分析方法检测。因此,新型超灵敏检测策略和生物分析技术的发展备受关注。本论文主要介绍了几种用于高效检测金属离子和mirna的方法。主要内容如下:1.本论文提出了一种锌离子的荧光测定法。该方法依赖于(a)使用等温循环来放大荧光信号,和(b)使用磁性分离磁珠(MBs)以完全除去未反应的DNA检测探针降低背景干扰。首先将生物素和荧光基团标记的底物链(Zn-Sub)作为检测探针组装在MBs上。接着,将Zn(Ⅱ)-特异性DNAzyme(Zn-Enz)链与Zn-Sub链杂交。在Zn(Ⅱ)存在下,Zn-Sub链被剪切,这导致释放出较短的DNA片段(含有荧光标记)和Zn-Enz链的离解。离解的Zn-Enz链随后与剩余的Zn-Sub链杂交并以同样的方式剪切。从而实现靶循环扩增机制和累积信号放大过程。由此在Zn(Ⅱ)存在的情况下获得强烈放大的信号。未经剪切的Zn-Sub链可随MBs从溶液中磁性分离出来。该方法在信噪比为3时具有低至33 fM的检测限和在100fM至11 nM Zn(Ⅱ)浓度范围的线性响应。将其应用于加标自来水和海水样品中Zn(Ⅱ)的测定,所测定结果与ICP-MS分析得到的结果进行了比较。该方法还用于测定母乳粉和母乳中Zn(Ⅱ)的含量。2.本论文基于Cu(Ⅱ)特异性DNA酶(DNAzyme)和Ni/Fe水滑石(LDH)/G-四链体类过氧化物酶开发了灵敏的铜离子(Cu(Ⅱ))传感器。简而言之,在Cu(Ⅱ)存在时,短的富含鸟嘌呤(G)的片段标记的底物(Cu-Sub)链与Cu(Ⅱ)特异性DNAzyme(Cu-Enz)链杂交并被剪切,导致富含G的DNA片段的释放。同时,Cu-Enz链被解离并参与下一个杂交-剪切循环。累积的富含G的DNA片段进一步折叠成四链体结构。然后,使用链霉亲和素包被的磁珠方便地分离出所有未反应的Cu-Sub链、被剪切后的Cu-Sub链和Cu-Enz链。最后,将Ni-Fe-LDH纳米片与G-四链体(G-quadruplex,不含氯化血红素)结合用于催化比色反应,首次表现出增强的类过氧化物酶活性。这种新的Cu(Ⅱ)检测方法的检测限为0.29 pM,线性范围为1 pM至10μM(r>0.997)。所建立的基于双酶的传感器被应用于测定血清样品中的Cu(Ⅱ),并获得与电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)的相近的结果。由此,Ni/Fe-LDH/G-quadruplex被证明是一种可用于分析应用的新型高效DNAzyme。3.本论文开发出了pH依赖性选择性离子交换与苯胺的催化聚合相结合的方法,用于铜(Cu)和铁离子(Fe)的灵敏检测。镍离子(Ni)螯合的乙二胺四乙酸(EDTA)通过共沉淀反应插入水滑石中。随后将插层后的水滑石产物用作吸附剂,用于富集pH 6.5条件下的Cu和pH 4.5条件下的Fe。由于Cu和Fe均与EDTA具有更强的络合物形成常数,因此Cu和Fe选择性地将Ni置换出来。所得的含有Cu/Fe的吸附剂被分离并用于催化苯胺聚合反应,因为吸附剂可以在不同的pH值下有效地释放Cu/Fe,并且具有高的聚合反应催化能力。由于在不同pH值下产生的聚苯胺具有不同颜色,故可利用比色信号区分Cu和Fe。经优化萃取温度、萃取时间、催化时间和pH值后,该方法对Cu的检测限为0.1 nM(6.4 ng/L),Fe的检测限为1 nM(56 ng/L);宽线性范围(分别为0.0005-2.5μM和0.005-5μM)且线性(r值分别为0.9904和0.9965)良好。优化后的方法适用于河水样本中Cu和Fe的灵敏分析检测。以Cu/Fe为例,该工作为方便有效地检测水样中的金属离子提供了一种新型有趣方法。4.本论文设计了一种高灵敏检测microrna(mirna)let-7a的三重放大分析法。该方法依赖于与靶mirna相关的杂交链式扩增反应(HCR)引发的磁性DNA/FeO纳米片网状结构的形成。DNA/FeO网状结构中的FeO纳米片具有参与比色反应的类过氧化物酶催化活性,从而产生用于定量let-7a的高灵敏信号。在最佳条件下,该测定在信噪比为3时获得了13 aM的检测限,并且在0.05fM和12 nM之间获得了线性校准曲线。该三重放大方法成功运用于血清样品中let-7a的定量。该方法基于HCR、网状结构和催化反应的三重扩增策略,被证明是一种新型、快速、有效的mirna分析方法。

关键词：等温循环信号放大 Zn(Ⅱ)检测类过氧化物酶催化活性 Cu(Ⅱ)检测杂交链式扩增反应微RNA检测 Fe(Ⅲ)检测 pH依赖性离子交换

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

具有类过氧化酶特性的纳米材料的制备与催化应用

具有类过氧化酶特性的纳米材料的制备与催化应用

引用

作者：孙俊江苏科技大学

学位级别：硕士

随着材料科学的发展,催化剂领域的材料和技术也发生着巨大的变化。为发展新型纳米催化剂及拓展相关应用,我们在阅读大量文献的基础上,合成了镍铁水滑石(Layered double hydroxides,LDH)和氧化锡锑(Antimony doped tin oxide,ATO)纳米材... 详细信息

随着材料科学的发展,催化剂领域的材料和技术也发生着巨大的变化。为发展新型纳米催化剂及拓展相关应用,我们在阅读大量文献的基础上,合成了镍铁水滑石(Layered double hydroxides,LDH)和氧化锡锑(Antimony doped tin oxide,ATO)纳米材料,研究了材料的类过氧化物酶相关的催化性能,并应用于多类物质的分析检测和催化降解。1.我们通过水热合成法制备了不同Ni/Fe比(3:1,4:1,5:1)LDH[Ni-Fe]作为类过氧化酶模拟物。以此材料为催化剂,开发了一种基于注射剂针头的新型微采样法结合液相微萃取用以测定香蕉中的D-葡萄糖。这种新型的采样和测试方法解决了传统水果检测的不足,如预处理涉及碾碎(混合或者均质化),提取和稀释等复杂的步骤等。论文中讨论了溶剂,溶剂体积,萃取时间对于萃取效果的影响。此外,方法中LDH[Ni-Fe]的催化应用为水果中的D-葡萄糖的检测提供了低的检测限(0.025μg/mL),宽线性范围(0.1?3000μg/mL),以及良好的线性(r=0.9998)。此项工作展示了一个新的进行方便高效检测水果样品的方法,并引入了LDH[Ni-Fe]作为类过氧化酶模拟物。2.同样以课题一中的镍铁水滑石作为类过氧化酶模拟物。结合杂交链式反应(Hybridization chain reaction,HCR)和LDH[Ni-Fe]纳米片催化的比色反应应用于检测微rna(mirna),let-7b。来自HCR的DNA发夹通过分离然后被吸附于LDH表面,我们发现吸附DNA发夹的LDH的过氧化物酶活性得到了增强。论文中讨论了影响催化活性的因素如Ni/Fe比,DNA发夹浓度等,同时我们通过元素能谱分析研究了可能的增强机理。对let-7b新的检测方法提供了低的检测限(0.36 fM),宽的线性范围(0.01 pM至200 pM)和好的线性(r=0.9968)。最终优化的方法进行了实际样品(肺癌细胞)let-7b的检测。此项工作将LDH[Ni-Fe]用作mirna的吸附剂及增强型的催化剂,发展出了一种新的高效的检测mirna的方法。3.本文通过水热合成法合成了不同Sb掺杂量的ATO纳米颗粒。我们发现ATO纳米颗粒在没有光/电化学协助的情况下呈现出类过氧化物酶活性。论文中讨论了与ATO类过氧化酶活性相关的因素,如Sb掺杂量,pH,Na离子浓度等。同时通过元素能谱分析,我们发现了Sb的+3价态与+5价态的转换可能是ATO产生催化性能的原因。此项工作首次证明了含有主族元素Sb的ATO纳米颗粒具有作为HRP(Horseradish Peroxidase)模拟物的良好潜力。4.我们研究了ATO纳米颗粒在紫外光和过氧化氢协助下的类芬顿效应。讨论了ATO纳米颗粒类芬顿光催化效应的影响因素,如Sb掺杂量,双氧水浓度,有机染料溶液pH。同时通过捕获实验,XPS(X-ray photoelectron spectroscopy)等研究了ATO纳米颗粒类芬顿光催化的机理。本工作展现了ATO纳米颗粒类芬顿光催化高效降解亚甲基蓝(Methylene blue,MB)以及其他污染物的能力以及其在水污染降解应用中的巨大潜力。

关键词：针样取样镍铁水滑石 D-葡萄糖类过氧化酶微RNA检测杂交链式反应氧化锡锑类芬顿光催化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：