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伤寒减毒活疫苗Ty21a免疫后小鼠小肠微皱褶细胞数量变化的观测

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上海免疫学杂志 2002年第2期22卷 102-103,106页

作者：陈洁高杰英彭虹舒翠莉王华军事医学科学院微生物流行病学研究所免疫室北京100071

本文拟建立一种分离滤泡相关上皮 (FAE )的稳定方法 ,并对微皱褶细胞 (M细胞 )的可诱导性作初步探讨。将BALB/c小鼠随机分为 2组 ,每组 11或 2 2只 ,以小鼠灌胃免疫为模型 ,采用Percoll非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠Payer结中的FAE ... 详细信息

本文拟建立一种分离滤泡相关上皮 (FAE )的稳定方法 ,并对微皱褶细胞 (M细胞 )的可诱导性作初步探讨。将BALB/c小鼠随机分为 2组 ,每组 11或 2 2只 ,以小鼠灌胃免疫为模型 ,采用Percoll非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠Payer结中的FAE ,经荧光标记的凝集素 (UEA1 FITC )染色后用流式细胞仪检测 ,SAS统计软件分析。结果表明伤寒沙门菌Ty2 1a免疫组与PBS对照组之间 ,有极显著性差异 (P 微皱褶细胞 (M细胞 )

关键词：伤寒减毒活疫苗 Ty21a 小肠微皱褶细胞数量变化流式细胞术

应用免疫冷冻超薄切片技术观察小鼠小肠微皱褶细胞

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上海免疫学杂志 2003年第1期23卷 10-12页

作者：陈洁高杰英常昕赵新荣胡白河军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 北京大学医药卫生分析中心电镜室北京100083

利用免疫冰冻超薄切片技术对小肠Peyer集合淋巴小结进行透射电镜 (TEM )的观察 ,结果表明 ,胶体金 (10nm )标记的荆豆凝集素 (UEA1)可以与小肠中的Peyer集合淋巴小结表面的微皱褶细胞特异性地结合 ,为探讨M细胞的形态结构和生物学功能 ... 详细信息

利用免疫冰冻超薄切片技术对小肠Peyer集合淋巴小结进行透射电镜 (TEM )的观察 ,结果表明 ,胶体金 (10nm )标记的荆豆凝集素 (UEA1)可以与小肠中的Peyer集合淋巴小结表面的微皱褶细胞特异性地结合 ,为探讨M细胞的形态结构和生物学功能 ,为口服疫苗的推广提供理论依据。

关键词：免疫冷冻超薄切片技术微皱褶细胞 M细胞 Peyer集合淋巴小结荆豆凝集素

两种肠道侵袭性菌与小鼠小肠微皱褶细胞相互作用的初步研究

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微生物学免疫学进展 2003年第1期31卷 1-4页

作者：陈洁彭虹王华高杰英军事医学科学院微生物流行病研究所免疫室北京100071

利用小鼠肠袢模型进行局部感染 ,在不同的时间取Peyer’s结对其进行扫描电镜和透射电镜的观察 ,并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明 ,鼠伤寒沙门氏菌 460 0 43和痢疾杆菌F2a 12两种肠道侵袭性菌与微皱褶细胞的粘附发生在局部感染 3 0... 详细信息

利用小鼠肠袢模型进行局部感染 ,在不同的时间取Peyer’s结对其进行扫描电镜和透射电镜的观察 ,并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明 ,鼠伤寒沙门氏菌 460 0 43和痢疾杆菌F2a 12两种肠道侵袭性菌与微皱褶细胞的粘附发生在局部感染 3 0min ,感染 60～ 90min在M细胞和淋巴细胞中可见到细菌 ,而在感染 6～ 8h后Peyer’s结中的细胞凋亡百分率与对照相比差异最为明显。提示 :鼠伤寒沙门氏菌 460 0 43和痢疾杆菌F2a 12均是借助于M细胞通过上皮屏障。

关键词：鼠伤寒沙门氏菌460043 痢疾杆菌F2a-12 微皱褶细胞细胞凋亡

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微皱褶细胞(M细胞)的研究进展

上海免疫学杂志 2001年第5期21卷 317-319页

作者：陈洁军事医学科学院微生物流行病学研究所免疫室北京100071

粘膜病原体侵入机体的过程是病原体与粘膜上皮细胞相互作用的结果。目前认为 :位于淋巴滤泡上皮中的特化的粘膜上皮细胞—微皱褶细胞 (M细胞 )是大多数粘膜病原体侵入机体的靶细胞。本文对M细胞的存在部位、起源发育。

关键词：粘膜微皱褶细胞 M细胞免疫系统

基于粘膜黏附/渗透纳米粒子的表面性质对其与Claudin-4蛋白相互作用的影响研究

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基于粘膜黏附/渗透纳米粒子的表面性质对其与Claudin-4蛋白相互作...

作者：陈鹤宁吉林大学

学位级别：硕士

聚合物纳米粒子以可调的药代动力学以及良好的生物相容性和生物降解性为疫苗的递送带来了新的机遇。特别是对于鼻腔接种的疫苗,聚合物纳米粒子能通过粘液黏附或渗透作用增强抗原的生物利用度,并且相较于可溶性抗原更容易被微皱褶细胞(Mi... 详细信息

聚合物纳米粒子以可调的药代动力学以及良好的生物相容性和生物降解性为疫苗的递送带来了新的机遇。特别是对于鼻腔接种的疫苗,聚合物纳米粒子能通过粘液黏附或渗透作用增强抗原的生物利用度,并且相较于可溶性抗原更容易被微皱褶细胞(Microfolded cell,M cell)吸收,显著增强了细胞和体液免疫反应。M细胞是粘膜滤泡相关上皮(Follicular associated epithelium,FAE)中的一种专门的抗原采样细胞,负载抗原的纳米粒子能够被M细胞摄取对诱导更强的免疫反应至关重要。以Claudin-4为靶点靶向M细胞的纳米粒子设计策略在鼻内递送抗原中已经取得了有益的结果,未来还需要进一步改善和提高载体的M细胞靶向性,以增强鼻内接种疫苗的免疫诱导能力,促进疫苗的临床转化。目的:选取了两类常用于鼻腔递送的纳米粒子,包括均具有粘膜黏附性但正电性不同的壳聚糖(Chitosan,CS)和N-2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖(N-2-hydroxypropyltrimethylammonium chloride chitosan,HTCC),具有粘液渗透性的亲水性非离子的聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)嵌段聚乳酸(Polylactic acid,PLA)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(Poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA)。分析它们的表面性质对M细胞靶受体蛋白Claudin-4活性、稳定性和结构的影响,同时检测它们与靶受体蛋白Claudin-4的结合能力,以评估这四种纳米粒子对靶向配体与靶受体蛋白Claudin-4结合的影响。方法:(1)通过离子交联法制备CS及其衍生物HTCC纳米粒子,乳化-溶剂挥发法制备PEG-PLA和PEG-PLGA纳米粒子;(2)通过透射电子显微镜考察四种纳米粒子通过嗅觉途径入脑的情况,免疫荧光实验考察四种纳米粒子在鼻相关淋巴组织中蓄积的能力;(3)通过分子动力学模拟从分子角度分析四种纳米粒子与M细胞的靶受体蛋白Claudin-4的相互作用过程。结果:制备的四种纳米粒子粒径均分布在200 nm左右,zeta电位结果表明CS及HTCC纳米粒子均具有正电性,PEG-PLA和PEG-PLGA纳米粒子呈负电性。透射电子显微镜观察到鼻内给与四种纳米粒子后嗅上皮细胞形态完整,在细胞内、紧密连接和细胞表面未发现纳米粒子。免疫荧光实验结果表明四种纳米粒子在鼻相关淋巴组织(Nasal associated lymphoid tissue,NALT)中均有分布;分子动力学模拟中均方根偏差(Root-mean-square deviation,RMSD)结果显示HTCC体系中,Claudin-4的波动较其它三个体系大,但未长时间维持变化构象;蛋白质二级结构变化分析可以看出壳聚糖和HTCC体系的Claudin-4出现无规则卷曲结构的比例较PEG-PLA和PEG-PLGA体系更大;与Claudin-4接触次数以及建立氢键数目的统计表明与Claudin-4整体的相互作用程度HTCC>CS,PEG-PLA和PEG-PLGA相差不大。其中CS以及PEG-PLGA在模拟的过程中与活性域内大部分的残基都产生了一定的接触,HTCC体系在模拟过程中与Arg31、Gly60、Gln61、Met62、Cys64、Lys65、Val66、Tyr67 均有较强的接触,Lys65 接触最强。PEG-PLA体系中,发生较强相互作用的残基有Val32、Ser58、Val66、Tyr67以及Asp68。结论:粘膜黏附性的CS和HTCC纳米粒子以及粘液渗透性的PEG嵌段聚合物(PEG-PLA和PEG-PLGA)纳米粒子都能够作为有效递送鼻内疫苗的载体。通过分子动力学模拟分析了 CS、HTCC、PEG-PLA和PEG-PLGA纳米粒子对Claudin-4的构象、柔性以及二级结构的影响,可以看出四个纳米粒子对靶受体Claudin-4的稳定性没有明显影响,但蛋白的二级结构有轻微变化。而通过接触次数、建立氢键以及相互作用的具体氨基酸分析可以看出带有强正电性的HTCC相较于其它三种纳米粒子能与Claudin-4建立最强的相互作用,每种纳米粒子与Claudin-4建立相互作用时受自身性质的影响而有所差异,较强的相互作用可能对配体的靶向性有一定的促进作用。

关键词：纳米粒子微皱褶细胞 Claudin-4 分子动力学模拟鼻内抗原递送

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M细胞及其在病原入侵中的作用研究进展

动物医学进展 2017年第9期38卷 105-108页

作者：李任峰王自良赵坤王丽荣张守平王三虎河南科技学院动物科技学院河南新乡453003

M细胞又称微皱褶细胞(microfold cell)或膜性细胞(membranous cell),是组成黏膜免疫屏障的一类重要上皮细胞,在黏膜免疫和病原入侵方面发挥重要功能。论文就M细胞的形态、功能及其在病原入侵中的作用进行综述,以期拓展对M细胞的认识以... 详细信息

M细胞又称微皱褶细胞(microfold cell)或膜性细胞(membranous cell),是组成黏膜免疫屏障的一类重要上皮细胞,在黏膜免疫和病原入侵方面发挥重要功能。论文就M细胞的形态、功能及其在病原入侵中的作用进行综述,以期拓展对M细胞的认识以及引起兽医领域对M细胞研究的关注。

关键词：微皱褶细胞黏膜免疫病原入侵

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肠道M细胞研究进展

国外医学(消化系疾病分册) 1987年第3期 139-142页

作者：余书勤郭仁强南京医学院组织学胚胎学教研室南京医学院组织学胚胎学教研室

消化道的粘膜属于机体的第一道防线.抗原物质如细菌、病毒及大分子异物需通过这层屏障结构,刺激位于消化道壁的淋巴组织以引起免疫反应.Owen等发现回肠Peyer淋巴集结表面覆盖一种特殊的上皮细胞,因其游离面为不规则的微皱褶而非微绒毛... 详细信息

消化道的粘膜属于机体的第一道防线.抗原物质如细菌、病毒及大分子异物需通过这层屏障结构,刺激位于消化道壁的淋巴组织以引起免疫反应.Owen等发现回肠Peyer淋巴集结表面覆盖一种特殊的上皮细胞,因其游离面为不规则的微皱褶而非微绒毛,命名为微皱褶细胞(microfold cell),简称为M细胞.随后对M细胞的形态和功能进行了广泛研究.从而

关键词：微皱褶细胞淋巴集结抗原物质游离面第一道防线 M细胞免疫反应淋巴组织微绒毛终末网

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肠道粘膜免疫研究进展

中国畜牧兽医 2004年第2期31卷 27-29页

作者：马玉龙许梓荣浙江大学饲料科学研究所杭州310029

肠道粘膜不仅是机体消化、吸收营养物质的场所 ,而且还具有重要的免疫功能。分泌型免疫球蛋白 A、上皮内淋巴细胞、微皱褶细胞和细胞因子 ,共同组成肠道粘膜免疫系统 ,以阻止食物大分子和外来微生物抗原的侵入 ,保护肠道的结构和正常生... 详细信息

肠道粘膜不仅是机体消化、吸收营养物质的场所 ,而且还具有重要的免疫功能。分泌型免疫球蛋白 A、上皮内淋巴细胞、微皱褶细胞和细胞因子 ,共同组成肠道粘膜免疫系统 ,以阻止食物大分子和外来微生物抗原的侵入 ,保护肠道的结构和正常生理功能。

关键词：肠道粘膜免疫分泌型免疫球蛋白A 上皮内淋巴细胞微皱褶细胞细胞因子抗原