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干细胞核心基因NANOG在乳腺癌干细胞及非干细胞中的表达与定位

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上海交通大学学报（医学版） 2015年第7期35卷 927-932页

作者：张志影徐亮徐迎春徐海燕张凤春徐州医学院研究生院徐州221000 上海交通大学医学院附属苏州九龙医院肿瘤科苏州215021 上海交通大学医学院附属瑞金医院肿瘤科上海200025 上海交通大学医学院附属仁济医院肿瘤科上海200001

目的研究干细胞核心基因NANOG在乳腺癌干细胞（BCSCs）和非乳腺癌干细胞（Non-BCSCs）中的表达及定位差异以及BCSCs在MCF-7微球体中的分布情况。方法应用免疫荧光、免疫细胞化学及NANOG与Hoechst33342荧光染料双染色方法检测BCSCs和Non-... 详细信息

目的研究干细胞核心基因NANOG在乳腺癌干细胞（BCSCs）和非乳腺癌干细胞（Non-BCSCs）中的表达及定位差异以及BCSCs在MCF-7微球体中的分布情况。方法应用免疫荧光、免疫细胞化学及NANOG与Hoechst33342荧光染料双染色方法检测BCSCs和Non-BCSCs中NANOG的表达及其定位。结果免疫细胞化学及免疫荧光染色显示,MCF-7中存在两种细胞：一种细胞胞体大、细胞质丰富,NANOG主要表达其细胞质中,这部分细胞占绝大多数;另一种细胞胞体小而圆、细胞质少,NANOG主要表达其细胞核中,这部分细胞占少数。NANOG和Hoechst33342免疫荧光双染显示：NANOG表达于Hoechst33342拒染的细胞核中;而在Hoechst33342核染色的细胞中,NANOG主要表达于细胞质中。微球体呈球囊性、中心部呈空腔状,细胞沿着球壁分布,球壁多为1~3层细胞组成;在MCF-7微球体中,BCSCs主要分布在囊性微球体的内侧壁。结论 NANOG在BCSCs中主要表达在细胞核,而在Non-BCSCs中主要表达在细胞质,而BCSCs主要分布在囊性微球体的内侧壁,这可为BCSCs的进一步研究和乳腺癌的临床靶向治疗提供实验依据。

关键词： NANOG BCSCs 微球体亚细胞定位

布比卡因聚乳酸微球在家兔体内的缓释效应(英文)

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中国临床康复 2006年第25期10卷 181-183页

作者：傅强王新华邹最俞媛高申钟延强张宏解放军总医院麻醉科北京市100853 同济大学附属东方医院麻醉科上海市200120 解放军第二军医大学长征医院麻醉科上海市200003 解放军第二军医大学药学院药剂教研室上海市200433

背景:布比卡因广泛应用于治疗及缓解因手术、炎症、肿瘤等引起的急、慢性疼痛,其镇痛作用时间不能满足临床对药物缓慢释放延长镇痛时间的要求。目的:采用高效液相色谱法和仿豚鼠皮丘法,检测以高分子聚合物——聚乳酸为载体制成的布比卡... 详细信息

背景:布比卡因广泛应用于治疗及缓解因手术、炎症、肿瘤等引起的急、慢性疼痛,其镇痛作用时间不能满足临床对药物缓慢释放延长镇痛时间的要求。目的:采用高效液相色谱法和仿豚鼠皮丘法,检测以高分子聚合物——聚乳酸为载体制成的布比卡因聚乳酸微球在家兔体内所具有的缓释效应。设计:完全随机对照动物实验。单位:解放军第二军医大学药学院。材料:新西兰兔16只,体质量(2.58±0.17)kg。干预:实验于2002-09/11在解放军第二军医大学药学院药剂教研室完成。①采用仿豚鼠皮丘法建立动物模型。①新西兰兔16只,随机分为两组,每组8只。注射组皮下注射布比卡因注射液5mg/kg;微球组皮下植入布比卡因微球5mg/kg。注射组兔于射液后5,10,20,30,45min,1,2,3,4,6,8,12,24h及微球组兔于给药后0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24,36,48和60h耳缘静脉采血1.5mL进行指标测定。③高效液相色谱法测定血浆中布比卡因浓度及进行药物缓释作用测定。主要观察指标:血浆中布比卡因浓度的变化和局麻药作用直径。结果:16只兔进入结果分析。①血药浓度变化结果:注射组血药浓度迅速达到峰值,且浓度较高,为2.4664mg/L,随后浓度快速下降。微球组血药浓度相对较平稳,达峰较晚,峰浓度=0.7781mg/L,且血药浓度一直维持较低水平,平均滞留时间明显延长(P微球组的镇痛作用时间较布比卡因注射液组明显延长(P微球制剂在家兔体内具有缓慢释放镇痛效应的作用。

关键词：布比卡因微球体药代动力学药理学时间因素

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壳聚糖对肝素微胶囊性能的影响(英文)

中国临床康复 2006年第33期10卷 161-164,i0006页

作者：丁珊李立华周长忍广州暨南大学材料科学与工程系广东省广州市510630

背景:壳聚糖、海藻酸钠是良好的天然的微胶囊制备材料,在组织工程中应用广泛。本课题组以往制备的抗凝血材料主要是运用材料的惰性以及模仿血管内壁的液晶态,而本实验是在此基础上,利用低分子肝素的生物抗凝活性及其他特异性能,对肝素... 详细信息

背景:壳聚糖、海藻酸钠是良好的天然的微胶囊制备材料,在组织工程中应用广泛。本课题组以往制备的抗凝血材料主要是运用材料的惰性以及模仿血管内壁的液晶态,而本实验是在此基础上,利用低分子肝素的生物抗凝活性及其他特异性能,对肝素进行微胶囊化,以期使肝素在体内的释放达到一种缓释的效果。目的:以天然的壳聚糖、海藻酸钠为微胶囊的包囊材料,对低分子肝素进行微胶囊化,以保证肝素在体内的稳定性,分析壳聚糖含量对肝素微胶囊性能的影响。设计:开放性实验。单位:广州暨南大学材料科学与工程系。材料:实验于2004-10/2005-06在暨南大学材料科学与工程系生物材料实验室完成。肝素(山东福瑞达生物化工有限公司,分子量微球之间有相互黏结的现象。将壳聚糖的浓度控制在质量比为2%较好。⑤随着壳聚糖含量的增大,肝素的释放速度变慢。⑥当微囊中的壳聚糖含量质量比达到20%时,肝素的包封率可以达到58%。单纯利用壳聚糖包埋肝素,肝素的包封率可以达到79.9%。⑦含有壳聚糖的微胶囊表面比较致密,同时随着戊二醛含量的增大,微胶囊会粘连在一起。结论:壳聚糖在一定浓度下对微胶囊的均匀性和成球性存在影响,壳聚糖的用量可以改变肝素的包封率,且随着壳聚糖用量的增加肝素的包封率随之提高,同时肝素的缓释速率相应降低。

关键词：肝素胶囊微球体质量控制壳多糖藻酸盐

单克隆抗体C225对乳腺癌干细胞的抑制作用

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上海交通大学学报（医学版） 2009年第11期29卷 1311-1315页

作者：史亚飞黄明主张凤春张雁云曹明智青岛大学医学院附属医院乳腺外科青岛266003 上海交通大学医学院仁济医院肿瘤科上海200127 中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所免疫学联合实验室上海200025

目的研究表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体西妥昔单抗(C225)对乳腺癌细胞系MCF-7中乳腺癌干细胞的抑制作用。方法MTT法检测C225对MCF-7细胞增殖的影响。将MCF-7进行微球体培养,根据培养液中是否加入表皮生长因子(EGF)和C225分为对照... 详细信息

目的研究表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体西妥昔单抗(C225)对乳腺癌细胞系MCF-7中乳腺癌干细胞的抑制作用。方法MTT法检测C225对MCF-7细胞增殖的影响。将MCF-7进行微球体培养,根据培养液中是否加入表皮生长因子(EGF)和C225分为对照组、C225组、EGF组、EGF+C225组;培养13d,观察四组微球体形成大小及数量,计算微球体形成率(MFE);流式细胞术检测微球体细胞及常规培养MCF-7中CD44+CD24-细胞比例。结果MCF-7细胞增殖抑制率随C225质量浓度的增加而上升。与对照组比较,C225组微球体体积明显减小,且MFE和微球体中CD44+CD24-细胞比例明显降低,分别为(0.61±0.04)%vs(1.44±0.09)%(P微球体体积明显减小,且MFE和微球体中CD44+CD24-细胞比例明显降低,分别为(0.68±0.04)%vs(1.61±0.05)%(P微球体形成大小、MFE以及微球体中CD44+CD24-细胞比例的比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论C225对MCF-7中CD44+CD24-细胞有明显抑制作用。

关键词：乳腺癌干细胞微球体表皮生长因子受体单克隆抗体 C225

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艾塞那肽缓释微球的制备和体外释放的研究

第二军医大学学报 2011年第7期32卷 772-775页

作者：宣吉明高静黄景彬林亚玲鲁莹钟延强第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433

目的制备载艾塞那肽的聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolicacid),PLGA]微球,并对其体外释药特性进行考察。方法以聚乳酸-羟基乙酸共聚物为载体,采用凝聚法(W/O/O)制备载艾塞那肽缓释注射微球,建立了高效液相色谱测定艾塞那... 详细信息

目的制备载艾塞那肽的聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolicacid),PLGA]微球,并对其体外释药特性进行考察。方法以聚乳酸-羟基乙酸共聚物为载体,采用凝聚法(W/O/O)制备载艾塞那肽缓释注射微球,建立了高效液相色谱测定艾塞那肽含量的方法和微球中药物提取方法,考察微球粒径大小、外观、包封率、载药量等理化性质,并对微球体外释放特性进行了考察。结果微球球形较圆整,平均粒径为(51.2±1.97)μm,实际载药量为(4.50±0.13)%,包封率在(96.5±2.68)%,首日突释率为(13.19±1.39)%,28 d的体外累积释放率可达(88.6±0.73)%。结论以生物可降解的PLGA为载体,用W/O/O法制备的艾塞那肽微球工艺稳定可控,重现性好,可在体外缓释一个月,在糖尿病治疗中具有良好的应用前景。

关键词：艾塞那肽微球体聚乳酸-羟基乙酸共聚物高压液相色谱法体外释放迟效制剂

可显影碘化油-氟尿嘧啶聚乳酸微球介入治疗兔肝癌模型的研究

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第二军医大学学报 2014年第4期35卷 362-365页

作者：王新霞程明和钟延强赵亮徐爱民张国庆第二军医大学东方肝胆外科医院药材科上海200438 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433 第二军医大学东方肝胆外科医院微创二科上海200438

目的研究可显影碘化油-氟尿嘧啶聚乳酸微球介入治疗新西兰兔肝癌模型的疗效。方法将肝肿瘤模型兔随机分为3组,分离右侧后肢的股动脉,经股动脉插入微导管至肝动脉,经导管将各组药物分别注入肝脏肿瘤组织周围动脉:空白组不给予任何药物治... 详细信息

目的研究可显影碘化油-氟尿嘧啶聚乳酸微球介入治疗新西兰兔肝癌模型的疗效。方法将肝肿瘤模型兔随机分为3组,分离右侧后肢的股动脉,经股动脉插入微导管至肝动脉,经导管将各组药物分别注入肝脏肿瘤组织周围动脉:空白组不给予任何药物治疗;药物对照组给予氟尿嘧啶注射液和碘化油注射液;实验组给予自制可显影碘化油-氟尿嘧啶聚乳酸微球。定期影像学评价,观察肿瘤生长和药物栓塞情况。结果发现可显影碘化油-氟尿嘧啶聚乳酸微球能有效栓塞在肝肿瘤组织周围,肿瘤细胞明显凋亡,具显影效果,治疗作用更持久。结论可显影碘化油-氟尿嘧啶聚乳酸微球具有一定的缓释作用,显影效果较好,有广阔的临床应用前景。

关键词：肝肿瘤治疗性栓塞氟尿嘧啶可显影微球体碘化

聚乳酸-羟基乙酸共聚物作为曲安奈德控释载体的评价

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中国临床康复 2006年第37期10卷 48-50页

作者：赵东旭封兴华吴红范黎胡彬梁志波解放军第四军医大学口腔医学院颌面外科陕西省西安市710032 解放军第四军医大学化学教研室陕西省西安市710032

目的:通过制备新型的曲安奈德缓释系统,对其形态、载药及体外释药性进行检测,评估应用生物可降解的聚乳酸-羟基乙酸共聚物作为曲安奈德控释载体的可行性。方法:实验于2005-08/2006-02在解放军第四军医大学化学教研室完成。①以包封率为... 详细信息

目的:通过制备新型的曲安奈德缓释系统,对其形态、载药及体外释药性进行检测,评估应用生物可降解的聚乳酸-羟基乙酸共聚物作为曲安奈德控释载体的可行性。方法:实验于2005-08/2006-02在解放军第四军医大学化学教研室完成。①以包封率为指标,应用单因素试验粗选制备工艺条件,再应用正交设计实验,通过选择聚乳酸-羟基乙酸共聚物用量、曲安奈德用量、聚乙烯醇浓度等3个因素进行制备工艺优化。②以聚乙烯醇作为乳化剂,以乳化-溶剂挥发法制备具有控制释放功能的负载曲安奈德的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球。采用扫描电镜、激光粒度分析仪等对微球的理化特性及体外释药性质进行分析。结果:①曲安奈德微球及其冻干粉剂一般性质:微球表面光滑圆整,球体均匀度好,粒径分布范围较窄,平均粒径为(17.751±2.154)μm。冻干粉剂为白色疏松粉末,无塌陷或萎缩现象,加双蒸水后为白色乳状溶液,再分散性良好。②微球载药率与包封率测定情况:曲安奈德微球的载药率和包封率分别为(26.28±0.51)%和(66.73±1.24)%。③药物释放实验结果:微球体外释药规律符合Higuichi方程,28d内无突释现象,28d后其释放度达81.2%。结论:曲安奈德微球及其冻干粉剂制备工艺良好;微球中曲安奈德生物活性保存良好,体外具有明显缓释作用应用。这种新型药物控制释放系统在激素类药物给药途径中具有潜在价值。

关键词：曲安奈德/分析聚合物聚乙醇酸乳酸微球体迟效制剂

海藻酸钙微球与海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹对不同种类细胞生长的影响

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中国临床康复 2006年第9期10卷 51-53页

作者：高宇红田磊崔忻薛毅珑解放军总医院老年医学研究所细胞生物学研究室北京市100853

目的:观察海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹对不同特性细胞生长的影响。方法:实验于2004-04/2005-04在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学研究室完成。细胞:牛肾上腺嗜铬细胞、Swiss小鼠胚胎成纤维细胞株(3T3)、人... 详细信息

目的:观察海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹对不同特性细胞生长的影响。方法:实验于2004-04/2005-04在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学研究室完成。细胞:牛肾上腺嗜铬细胞、Swiss小鼠胚胎成纤维细胞株(3T3)、人早幼粒白血病细胞株。仪器和试剂:加拿大Sun氏静电微囊发生仪;体视显微镜;海藻酸钠,聚赖氨酸、氯化钙、柠檬酸钠。制备海藻酸钙微球和海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊,分别用其包裹3T3细胞、牛肾上腺嗜铬细胞及人早幼粒白血病细胞。按照细胞的不同及包裹材料的不同,分为裸细胞组、海藻酸钙微球组、海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊组。在光镜下观察体外培养的微球、微囊及细胞的形态、存活率、增殖率。细胞增殖率=培养后细胞数-培养前细胞数/培养前细胞数×100%。结果:光镜下见包裹后即刻海藻酸钙微球和海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊呈大小均一的半透明圆球,直径150～300μm,表面光滑。培养24h时,牛肾上腺嗜铬细胞、3T3或人早幼粒白血病细胞均呈单个细胞,均匀分散于微球或微囊内。培养120h时,牛肾上腺嗜铬细胞、3T3和人早幼粒白血病细胞在海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内聚集成团块,而在海藻酸钙微球内仍呈单个细胞散在分布。①海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内高增殖活性的3T3或人早幼粒白血病细胞的存活率显著高于牛肾上腺嗜铬细胞(74.38±7.72,89.08±3.05,87.48±3.43,92.40±7.56,72.67±2.08,89.33±5.13,P微球内同一种细胞的存活率(87.88±3.38,89.08±3.05,89.63±5.55,85.33±4.86,92.40±7.56,95.08±3.81,83.67±5.51,89.33±5.13,85.33±2.08,P微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内同种细胞的增殖率显著高于裸细胞组(2.54±0.65,5.20±2.38,2.30±0.70,2.26±0.83,3.89±1.89,13.37±16.14,P0.05)。③在相同状态下,培养72和120h时,人早幼粒白血病细胞增殖率明显高于3T3或牛肾上腺嗜铬细胞(18.66±7.76,39.11±16.06,P0.05)。④对同一种细胞,培养24,72和120h时,海藻酸钙微球与海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊相比,其细胞的增殖率差异均无显著性(P>0.05)。结论:在培养条件下,海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹似更利于该3种细胞的生长;海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹较海藻酸钙微球包裹更利于同种细胞的生长。

关键词：白血病,裸细胞微球体细胞存活

明胶海绵颗粒与Embosphere微球治疗肝癌破裂出血有效性和安全性的对比分析

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中国介入影像与治疗学 2015年第12期12卷 723-727页

作者：余强彭晓明杨斌张敏孙萌周霖王华明中国人民解放军第302医院介入科北京100039

目的对比分析明胶海绵颗粒及Embosphere微球栓塞肝癌破裂出血靶血管的安全性和临床疗效。方法采用经导管肝动脉栓塞术（TAE），对422例破裂出血的肝癌患者行肝癌出血靶动脉栓塞止血，其中198例采用明胶海绵颗粒栓塞（明胶海绵组），224... 详细信息

目的对比分析明胶海绵颗粒及Embosphere微球栓塞肝癌破裂出血靶血管的安全性和临床疗效。方法采用经导管肝动脉栓塞术（TAE），对422例破裂出血的肝癌患者行肝癌出血靶动脉栓塞止血，其中198例采用明胶海绵颗粒栓塞（明胶海绵组），224例采用Embosphere栓塞微球栓塞（微球组），术后结合生化及影像学检查观察和分析临床疗效与不良反应。结果本组422例均有效止血。明胶海绵组中，34例栓塞术后24～36h有复发出血，122例肝转氨酶有不同程度升高（31例转氨酶升至1000U／L以上），198例胆红素均有不同程度上升；微球组中，术后肝功能指标与术前比较差异无统计学意义。结论与明胶海绵栓塞剂比较，Embosphere栓塞微球颗粒治疗肝癌破裂出血具有很好的疗效及安全性，不良反应轻，再通出血概率低，对术后肝功能的损害甚微，有利于围．术期患者的良性恢复，值得在临床上推广应用。

关键词：肝肿瘤出血栓塞治疗性微球体止血