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丝裂霉素C葡聚糖微球体内药代动力学及...

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中华放射学杂志 1992年第7期26卷 482-485页

作者：朱建钢魏树礼

自制左氧氟沙星羧甲基壳聚糖缓释微球体内结肠靶向释放的实验

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第二军医大学学报 2006年第5期27卷 517-520页

作者：李扬王强钱方沈宏亮第二军医大学长征医院普通外科上海200003 长征医院药学部

目的:制备左氧氟沙星羧甲基壳聚糖(LVFX/CMC)微球并检测其在大鼠体内结肠靶向释药的性能。方法:色谱柱:KromasilRKR100-5C18(250 mm×4.6 mm),流动相:乙腈-0.1%三氟醋酸溶液(20:80),柱温:50℃,激发波长:295 nm,发射波长:495 nm,流速:1.0... 详细信息

目的:制备左氧氟沙星羧甲基壳聚糖(LVFX/CMC)微球并检测其在大鼠体内结肠靶向释药的性能。方法:色谱柱:KromasilRKR100-5C18(250 mm×4.6 mm),流动相:乙腈-0.1%三氟醋酸溶液(20:80),柱温:50℃,激发波长:295 nm,发射波长:495 nm,流速:1.0 ml/min。SD大鼠60只,随机分为2组,分别以LVFX/CMC微球(含40 mg左氧氟沙星)及等量左氧氟沙星溶剂灌胃,以高效液相色谱法对LVFX/CMC微球和左氧氟沙星(LVFX)灌胃后大鼠胃、小肠、盲肠、结肠及血液中药物浓度进行定量检测。结果:灌胃后LVFX/CMC微球组5 h盲肠、结肠药量分别达(3.394±0.197)和(1.873±0.216)mg,远高于LVFX组的(0.489±0.123)和(0.078±0.002)mg(P微球组盲肠和结肠药量仍分别达到(1.580±0.234)和(0.713±0.073)mg,明显高于LVFX组的(0.105±0.023)和(0.054±0.016)mg(P微球组血药浓度于5 h后达到最高,而LVFX组1 h后即达最高血药浓度峰。微球组盲肠和结肠内容物的药量在7、9 h时段均明显大于胃和小肠内的药量。结论:左氧氟沙星羧甲基壳聚糖微球在体内实验中的释放符合结肠靶向释药的特点。

关键词：左氧氟沙星羧甲基壳聚糖微球体结肠靶向释放实验

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大型海藻无性系微球体构建和反应器培养研究

海洋科学 2011年第2期35卷 17-21页

作者：王金霞李爱芬周百成中国科学院海洋研究所山东青岛266071 中国科学院研究生院北京100039 暨南大学水生生物研究中心广东广州510632

利用大型海藻细胞的全能性获得了蜈蚣藻(Grateloupia filicina)、多管藻(Polysiphonia urceolata)和孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)的无性系材料,在此基础上分别构建了绒球状微球体、网状微球体和簇生状微球体3种微球体形式,这种微球体形... 详细信息

利用大型海藻细胞的全能性获得了蜈蚣藻(Grateloupia filicina)、多管藻(Polysiphonia urceolata)和孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)的无性系材料,在此基础上分别构建了绒球状微球体、网状微球体和簇生状微球体3种微球体形式,这种微球体形式适合于大型海藻的生物反应器高密度培养。簇生状的孔石莼微球体在10 L藻类生物反应器中的培养密度达5.81 g/L鲜质量,最高生长速度达到0.36 g/L/d鲜质量,最大比生长速率为0.103/d。藻类生物反应器高密度培养海藻无性系可用于海藻育苗、水产养殖水处理以及天然活性物质生产等。

关键词：海藻无性系光生物反应器微球体高密度培养

盐酸氟西汀胃漂浮海藻酸钙缓释微球体内外研究

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福建医科大学学报 2016年第2期50卷 82-87,102页

作者：沈龙华邓艳平汪效英吴宏霞余祥彬福建医科大学药学院福州350108

目的制备盐酸氟西汀海藻酸钙胃漂浮微球,考察胃漂浮制剂的体内滞留及生物利用度。方法采用离子凝胶-烘干法制备海藻酸钙胃漂浮微球,以百忧解为参比制剂,测定微球体外释放情况,并采用残余药量法考察微球胃肠转运行为,建立柱前衍生-HPLC... 详细信息

目的制备盐酸氟西汀海藻酸钙胃漂浮微球,考察胃漂浮制剂的体内滞留及生物利用度。方法采用离子凝胶-烘干法制备海藻酸钙胃漂浮微球,以百忧解为参比制剂,测定微球体外释放情况,并采用残余药量法考察微球胃肠转运行为,建立柱前衍生-HPLC荧光检测法测定胃漂浮微球大鼠体内血药浓度,计算药代动力学参数和生物利用度。结果胃漂浮微球体外释放较慢,释放曲线符合Higuchi方程,在胃中的滞留时间>8h,血药浓度更平稳,生物利用度明显提高。结论所制胃漂浮微球具有缓释的效果,可以延长胃中滞留时间,提高药物的生物利用度。

关键词：胃药用制剂微球体剂量效应关系,药物生物利用度

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人鼻咽癌干细胞微球体培养并鉴定其生物特性

医学研究生学报 2014年第11期27卷 1133-1138页

作者：李亚军郭颖吴顺龙甘生敏陆松梅李少林重庆医科大学基础医学院重庆医学博士研究生400016

目的目前分离和鉴定鼻咽癌干细胞的方法仍不成熟。探索鼻咽癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对CNE-2细胞微球体是否具有肿瘤干细胞生物特性(干性)进行鉴定。方法人鼻咽癌细胞CNE2、C666-1细胞在含生长因子的无血清培养基(serum-free med... 详细信息

目的目前分离和鉴定鼻咽癌干细胞的方法仍不成熟。探索鼻咽癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对CNE-2细胞微球体是否具有肿瘤干细胞生物特性(干性)进行鉴定。方法人鼻咽癌细胞CNE2、C666-1细胞在含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)中悬浮培养。流式细胞术、Transwell小室实验、裸鼠成瘤实验、分别检测CNE2贴壁细胞(CNE2 monolayer,CNE2-MN)及CNE2微球体细胞(CNE2 sphere cells,CNE2-SC)CD133+标记细胞比例,体外侵袭能力、体内成瘤能力;CNE2-SC在含血清培养基中贴壁培养观察其分化能力;实时荧光定量PCR分析CNE2-MN及CNE2-SC相关干性基因Bmi-1、Oct4、Twist1RNA的表达。结果 2种细胞系均能在特殊配制的SFM中形成可以稳定传代的微球体,SFM新鲜配制、用细胞分离剂Accutase替代胰酶传代以及保持细胞的悬浮状态均有利于微球体的形成和增殖;在含血清培养基中培养能贴壁分化成CNE2-MN而无明显差异;CNE2-SC中CD133+细胞比例(98.79%)显著高于CNE2-MN(0.98%),差异有统计学意义(P微球体富集了肿瘤干细胞,将为后续鼻咽癌干细胞研究打下基础。

关键词：鼻咽癌肿瘤干细胞微球体悬浮培养无血清培养基

沙利度胺对三阴乳腺癌干细胞微球体的干预研究

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实用医学杂志 2012年第3期28卷 361-363页

作者：耿杰张洁韩正祥高向阳杜秀平徐州医学院附属医院肿瘤科 221002

目的:以紫杉醇为对照,研究沙利度胺(thalidomide,TLD)对三阴乳腺癌干细胞(TNBCSCs)微球体的干预情况。方法:(1)采用微球体形成试验、CCK-8法、Transwell侵袭试验,研究TLD对TNBCSCs生物学行为的影响作用。(2)采用逆转录聚合酶链反应法(RT... 详细信息

目的:以紫杉醇为对照,研究沙利度胺(thalidomide,TLD)对三阴乳腺癌干细胞(TNBCSCs)微球体的干预情况。方法:(1)采用微球体形成试验、CCK-8法、Transwell侵袭试验,研究TLD对TNBCSCs生物学行为的影响作用。(2)采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测TLD对TNBCSCs的血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。结果:与空白对照组相比,TLD处理后的微球体形成率明显减少,同时干细胞的增殖、侵袭能力均降低,VEGF的表达下降明显,差异有统计学意义。结论:TLD可以影响干细胞微球体的形成,抑制其体外增殖、侵袭及VEGF的表达。

关键词：乳腺肿瘤干细胞微球体沙利度胺

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顺铂明胶微球体内释药特性的实验研究

介入放射学杂志 2004年第3期13卷 263-265页

作者：王新木封兴华刘芳马威魏建华第四军医大学口腔医学院颌外科西安市70033 北京解放军空军总医院检验科

目的　对比顺铂不同给药方法的效果 ,以了解顺铂明胶微球在体内的释药特点。方法　在X线监视下 ,将顺铂明胶微球超选择栓塞在犬颈外动脉及其分支 ,以顺铂溶液灌注颈外动脉或在股静脉点滴作为对照 ,不同时间点取血样测试血药浓度。取栓... 详细信息

目的　对比顺铂不同给药方法的效果 ,以了解顺铂明胶微球在体内的释药特点。方法　在X线监视下 ,将顺铂明胶微球超选择栓塞在犬颈外动脉及其分支 ,以顺铂溶液灌注颈外动脉或在股静脉点滴作为对照 ,不同时间点取血样测试血药浓度。取栓塞组织石蜡切片 ,常规苏木精伊红染色 ,光镜观察。结果　动脉灌注法可以产生局部较高的血药浓度 ,但维持时间较短 ;静脉滴注法血药浓度维持时间较长 ,但局部与全身血药浓度无显著差异 ;使用顺铂明胶微球进行栓塞可以在较小的用药剂量上在局部维持相对较长时间较高的血药浓度。结论　顺铂明胶微球进行动脉栓塞可以显著降低全身血药浓度及用药剂量。

关键词：顺铂明胶微球体释药特性药物浓度动脉化疗

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肝癌微球体细胞特异性结合七肽的筛选

肝癌微球体细胞特异性结合七肽的筛选

作者：刘扬贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:筛选能够与高转移性HCCLM3肝癌微球体特异性结合的环七肽,为后续的生物医学应用提供靶向分子。方法:利用超低吸附培养瓶和无血清培养基对HCCLM3进行培养,诱导其形成肝癌微球体。以肝癌微球体为靶细胞,HCCLM3和LO2为吸附细胞,应用... 详细信息

目的:筛选能够与高转移性HCCLM3肝癌微球体特异性结合的环七肽,为后续的生物医学应用提供靶向分子。方法:利用超低吸附培养瓶和无血清培养基对HCCLM3进行培养,诱导其形成肝癌微球体。以肝癌微球体为靶细胞,HCCLM3和LO2为吸附细胞,应用噬菌体环七肽库进行全细胞差减筛选。四轮筛选后,随机挑选噬菌体单克隆进行测序;根据测序结果,采用cell-ELISA对不同类型噬菌体克隆与肝癌微球体结合的亲和力和特异性进行检测。根据特异性最高的噬菌体克隆的融合蛋白基序来合成对应的环七肽。使用竞争抑制试验检验合成多肽对噬菌体克隆与靶细胞结合的抑制作用。运用激光共聚焦显微镜进一步验证合成多肽与肝癌微球体结合的特异性。细胞毒性试验检测多肽的生物学活性。结果:通过悬浮培养,LM3细胞成功聚集成球形成微球体,四轮差减筛选后,噬菌体克隆在肝癌微球体的富集率从(8.50×10-5±1.70×10-5)%提高到(1.0×10-2±4.08×10-4)%(P微球体结合的特异性最高,其展示多肽的氨基酸序列为NTGSPYE(命名为NTG肽)。竞争抑制试验结果表明:NTG肽对P26噬菌体与肝癌微球体的结合有抑制作用(P微球体特异性结合,而与无关细胞则不发生结合。细胞增殖试验显示:NTG肽对细胞生长没有增殖活性。结论:用干细胞培养体系对肝癌细胞系进行悬浮培养能稳定获得肝癌微球体。筛选到的P26号噬菌体与肝癌微球体的结合具有最高特异性,其展示的环七肽序列为NTGSPYE。合成的NTG肽具有与肝癌微球体靶向结合的能力,且对细胞的生长无影响。因此,NTG肽作为介导与肝癌干细胞特异性结合的靶向载体,在今后肝癌早期诊断和靶向治疗的应用上具有进一步开发的潜质。

关键词：噬菌体展示差减筛选肝癌微球体环七肽靶向载体1

盐霉素对前列腺癌PC-3细胞及微球体的体外增殖抑制作用

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盐霉素对前列腺癌PC-3细胞及微球体的体外增殖抑制作用

作者：蒋先训南华大学

学位级别：硕士

目的：观察盐霉素对人前列腺癌PC-3细胞体外增殖的影响;观察盐霉素对PC-3细胞中CD44+及CD133+双阳性细胞及其形成微球体的影响;从PC-3细胞中筛选出与盐霉素作用密切相关的基因组。材料与方法：1：采用MTT法检测不同浓度盐霉素作用后... 详细信息

目的：观察盐霉素对人前列腺癌PC-3细胞体外增殖的影响;观察盐霉素对PC-3细胞中CD44+及CD133+双阳性细胞及其形成微球体的影响;从PC-3细胞中筛选出与盐霉素作用密切相关的基因组。材料与方法：1：采用MTT法检测不同浓度盐霉素作用后PC-3细胞的活性，酶标仪在570nm波长下测定其吸光值，绘制曲线并计算出IC50;2:将培养的PC-3细胞分为A、B、C三组，A组为空白对照组，B组为加9uM DMSO溶媒对照组，C为加9uM盐霉素的实验组，各组内再分别予CD133鼠抗人单抗、CD44鼠抗人单抗及两种抗体同时标记，予流式细胞仪检测盐霉素作用前后各组细胞的阳性比例，统计学软件进行数据分析;3:将分选的干细胞培养成肿瘤微球体，显微镜下观察肿瘤微球体的变化，并观察盐霉素作用后微球体的解聚情况;4：通过microarray技术检测盐霉素作用前后PC-3细胞的基因表达谱，并采用Treeview软件对基因表达谱进行差异性分析，以上调或下调10倍以上为标准，筛选出与盐霉素作用密切相关的靶基因组，统计学分析筛选出最具代表性的2个靶基因，探讨基因的功能。结果：（1）不同浓度的盐霉素对PC-3均有抑制作用，其IC50为9.12μmol/ml。（2）与空白对照组相比较，盐霉素组中CD44+、CD133+细胞及双阳性细胞的比例均降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）与DMSO组相比较，盐霉素组CD44+、CD133+细胞及双阳性细胞的比例均降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。（4）与空白对照组相比较，DMSO组CD44+、CD133+细胞及双阳性细胞的比例无明显降低，差异无统计学意义（P＞0.05）。（5）盐霉素能促进肿瘤微球体的解聚，使细胞体积增大，肿胀而死亡。（6） microarray检测结果显示：表达10倍以上下调的基因15个，表达10倍以上上调基因的34个，其中， POSTN基因下调13.2倍，CALB2基因上调47.55倍。结论：（1）盐霉素能有效抑制体外人前列腺癌PC-3细胞的增殖。（2）盐霉素能明显降低PC-3细胞中CD44+及CD133+细胞的比例，并能促使肿瘤干细胞形成的肿瘤微球体的解聚，其可能是通过杀灭前列腺癌肿瘤干细胞来抑制PC-3细胞的生长。（3）盐霉素能改变PC-3细胞的基因表达，明显上调CALB2基因的表达及下调POSTN基因的表达。

关键词：微球体盐霉素肿瘤干细胞前列腺癌