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微泡造影剂结合超声介导一氧化氮合成酶基因转染防治移植静脉再狭窄

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中华实验外科杂志 2012年第4期29卷 595-598,F0003,F0004页

作者：胡敏张凯伦项飞翔潘铁成魏翔朱学海华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院心脏研究所

目的探讨微泡造影剂及超声辐照介导内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）基因转染防治移植静脉血管桥再狭窄的可行性。方法重组真核表达载体pcDNA3．1-eNOS经微泡造影剂及超声辐照介导体外转染大鼠颈外静脉，再将静脉段间置植入颈总动脉，建立S... 详细信息

目的探讨微泡造影剂及超声辐照介导内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）基因转染防治移植静脉血管桥再狭窄的可行性。方法重组真核表达载体pcDNA3．1-eNOS经微泡造影剂及超声辐照介导体外转染大鼠颈外静脉，再将静脉段间置植入颈总动脉，建立SD大鼠颈外静脉-颈总动脉移植模型。于术后4周取移植静脉标本分别进行苏木素-伊红（HE）染色，免疫组织化学染色及Westernblot法分析，观察eNOS基因在静脉桥中的功能表达和静脉桥新生内膜的增生。结果Westernblot法分析表明微泡造影剂及超声辐照介导eNOS基因转染组的移植血管桥内eNOS表达最明显；增殖细胞核抗原（PCNA）检测阳性率为（21．04±3．51）％，细胞凋亡指数为（12．11±1．23）％，新生内膜厚度（25．0±3．5）μm，内膜／中膜比值为0．43，均明显低于其他组（P〈0．05）。结论微泡造影剂及超声辐照介导eNOS基因转染可以有效抑制移植静脉桥新生内膜的增生。

关键词：超声微泡造影剂一氧化氮合成酶基因静脉桥

微泡造影剂联合高强度聚焦超声治疗兔肝VX-2肿瘤的声像图监测

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中国超声医学杂志 2006年第5期22卷 332-334页

作者：计晓娟卢岷邹建中王智彪李发琪吴春枝唐静重庆医科大学医学超声工程研究所重庆医科大学附属第二医院超声科

目的探讨微泡造影剂联合高强度聚焦超声治疗兔肝VX-2肿瘤时声像图的变化特征及超声监控能力。方法45只荷瘤兔随机分为3组,一组接受单纯高强度聚焦超声治疗,另两组为高强度聚焦超声联合微泡造影剂治疗。结果高强度聚焦超声联合微泡造影... 详细信息

目的探讨微泡造影剂联合高强度聚焦超声治疗兔肝VX-2肿瘤时声像图的变化特征及超声监控能力。方法45只荷瘤兔随机分为3组,一组接受单纯高强度聚焦超声治疗,另两组为高强度聚焦超声联合微泡造影剂治疗。结果高强度聚焦超声联合微泡造影剂治疗肝肿瘤可以大大缩短治疗时间。各治疗组声像图变化的病理学基础各不相同。联合治疗后10min靶区高回声面积与凝固性坏死面积相关性良好(r=0.986,P微泡造影剂增强高强度聚焦超声疗效切实可行,联合治疗的声像图特征性变化能够有效判断治疗效果。

关键词：兔/动物模型肝肿瘤微泡造影剂高强度聚焦超声声像图

微泡造影剂结合超声介导绿色荧光蛋白质粒转染大鼠移植静脉的实验研究

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华中科技大学学报（医学版） 2010年第2期39卷 239-242页

作者：胡敏张凯伦项飞翔华中科技大学同济医学院附属协和医院心脏外科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院超声影像科武汉430022

目的探讨微泡造影剂及超声辐照介导基因转染移植静脉桥的可行性。方法建立SD大鼠颈外静脉颈总动脉旁路移植模型,选择增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)为报告基因。将大鼠颈外静脉段浸泡入粘附质粒的微泡中,予超声照射,再将静脉段间置植入... 详细信息

目的探讨微泡造影剂及超声辐照介导基因转染移植静脉桥的可行性。方法建立SD大鼠颈外静脉颈总动脉旁路移植模型,选择增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)为报告基因。将大鼠颈外静脉段浸泡入粘附质粒的微泡中,予超声照射,再将静脉段间置植入颈总动脉,7 d后,取出静脉段行快速冰冻切片,荧光显微镜下观察血管平滑肌内荧光表达,同时进行苏木精-伊红染色行病理观察。结果微泡造影剂结合超声辐照组的荧光强度显著高于质粒浸泡+超声辐照组、质粒+微泡造影剂组及单纯质粒浸泡组(P微泡造影剂结合超声辐照可以实现基因靶向转染至大鼠移植静脉桥的血管平滑肌中。

关键词：超声波微泡造影剂基因转染静脉桥

微泡造影剂联合超声辐照介导的绿色荧光蛋白质粒转染小鼠肝癌的实验研究

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中国超声医学杂志 2007年第2期23卷 95-97页

作者：聂芳徐辉雄吕明德汤庆中山大学附属第一医院超声科中山大学附属第一医院肝胆外科广州医学院附属第一医院超声科

目的探讨微泡造影剂SonoVue联合超声辐照在介导体内基因转染中的作用。方法建立小鼠肝癌皮下移植瘤模型,尾静脉注入绿色荧光蛋白质粒(pEGFP),添加或不添加SonoVue,脉冲多普勒超声辐照(1MHz,2W/cm2)瘤组织。持续时间1、5、10min,7d后流... 详细信息

目的探讨微泡造影剂SonoVue联合超声辐照在介导体内基因转染中的作用。方法建立小鼠肝癌皮下移植瘤模型,尾静脉注入绿色荧光蛋白质粒(pEGFP),添加或不添加SonoVue,脉冲多普勒超声辐照(1MHz,2W/cm2)瘤组织。持续时间1、5、10min,7d后流式细胞仪、荧光显微镜评价pEGFP转染率。HE染色行肿瘤病理学检查。结果SonoVue联合超声辐照组pEGFP的转染率显著高于单纯超声辐照组(P0.05);辐照时间5、10min时pEGFP表达明显高于1min(P0.05)。HE染色肿瘤组织无坏死灶出现。结论微泡造影剂联合超声辐照可明显提高基因转染率,且对组织无损害。

关键词：微泡造影剂超声基因转染肝癌

超声微泡造影剂对大鼠骨骼肌毛细血管通透性的影响

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南方医科大学学报 2008年第4期28卷 542-544页

作者：劳翼修建成谢昌联陈向辉吴爵非宾建平刘伊丽南方医科大学南方医院心内科广东广州510515

目的研究治疗剂量超声破坏微泡造影剂对大鼠骨骼肌毛细血管通透性的影响。方法以伊文思蓝(EB)为指示剂,18只清洁级SD大鼠,随机均分为EB组(E)、EB+超声组(E+U)和EB+超声+微泡组(E+U+M)共3组进行实验。给予相同参数条件的超声进行照射,经... 详细信息

目的研究治疗剂量超声破坏微泡造影剂对大鼠骨骼肌毛细血管通透性的影响。方法以伊文思蓝(EB)为指示剂,18只清洁级SD大鼠,随机均分为EB组(E)、EB+超声组(E+U)和EB+超声+微泡组(E+U+M)共3组进行实验。给予相同参数条件的超声进行照射,经颈动脉输/不输入微泡造影剂,在体荧光显微镜下观察EB外溢情况并行视觉评分;使用标准曲线和分光光度法测量各组大鼠脊斜肌中EB的含量。结果E+U+M组镜下可见微血管周围EB外溢,视觉评分等级为2级,显著高于E组(0级)及E+U组(0-1级)(P0.05)。E+U+M组脊斜肌中EB含量为(51.57±3.89)μg/g,比E组[(28.99±4.67)vg/g]及E+U组[(30.99±4.11)μg/g]明显增加(P0.05)。结论超声介导微泡造影剂破坏可使脊斜肌组织毛细血管通透性增加,可能是超声微泡造影剂增强基因转染的主要机制之一。

关键词：超声微泡造影剂伊文思蓝血管通透性

诊断超声介导自制微泡造影剂的溶栓效应及参数优化体外实验研究

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中国医学影像技术 2008年第1期24卷 9-12页

作者：陈冉任卫东吴瑕陈昕中国医科大学附属一院心脏血管检查中心辽宁沈阳110001 中国医科大学附属一院放射科辽宁沈阳110001

目的研究诊断超声介导自制微泡造影剂对血栓的溶解效应以及对影响溶栓效果的超声频率、机械指数、照射时间、微泡浓度四个参数进行探讨,确定最佳的溶栓参数组合。方法利用统计学L9（3-4）正交表确定不同的超声频率（1.8 MHz、5 MHz、11 ... 详细信息

目的研究诊断超声介导自制微泡造影剂对血栓的溶解效应以及对影响溶栓效果的超声频率、机械指数、照射时间、微泡浓度四个参数进行探讨,确定最佳的溶栓参数组合。方法利用统计学L9（3-4）正交表确定不同的超声频率（1.8 MHz、5 MHz、11 MHz）、不同机械指数（0.5、1.2、1.6）、不同照射时间（10 min、30 min、60 min）、不同微泡浓度（3.5×10^-9/ml、4.2×10^-9/ml、5.0×10^-9/ml）各参数不同水平间的组合,按照正交表所示组合参数条件进行体外溶栓,计算各组问的溶栓率P=[（W0-W1）/W0]×100%,所得数据进行极差分析,切片HE染色及电镜下观察溶栓后的血凝块结构。结果作用时间对其溶栓率的影响最大,其溶栓的最佳条件组合为超声频率A=1.8 MHz、机械指数B =1.6、作用时间C=60 min、微泡浓度D=5.0×10^-9/ml。HE切片染色及扫描电镜1000倍观察溶栓后血凝块内部结构松散,并伴有大量纤维素断裂,出现较大的空洞与裂隙。结论诊断超声介导下的超声微泡造影剂具有助溶作用,并在低频率、高机械指数、延长作用时间、高微泡浓度的参数条件下溶栓效果最佳。

关键词：诊断超声微泡造影剂溶栓参数优化

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中华医学杂志 2008年第26期88卷 1846-1850页

作者：夏金堂徐波王劭晟赖越元伍兆锋李书华李雯广州医学院附属广州市第一人民医院肝胆外科 510180 中山大学附属第一医院普通外科实验室

目的探讨携带可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（sTRAIL）基因的重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL对肝癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用，以及采用超声辐照联合微泡造影剂介导rAAV-sTRAIL转染肝癌细胞的有效性。方法单纯重组腺相关病毒r... 详细信息

目的探讨携带可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（sTRAIL）基因的重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL对肝癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用，以及采用超声辐照联合微泡造影剂介导rAAV-sTRAIL转染肝癌细胞的有效性。方法单纯重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL感染肝癌细胞株HepG2，以及利用超声辐照联合微泡造影剂介导重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL感染HepG2细胞，分别以RT-PCR方法和Westen印迹法检测细胞内sTRAIL基因mRNA及蛋白表达量，噻唑蓝法检测细胞的增殖抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡率。结果重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL可有效转染HepG2细胞，sTRAIL mRNA表达水平在微泡造影剂组高于单纯病毒组，二者差异有统计学意义（P〈0．05）；rAAV-sTRAIL可抑制HepG2细胞增殖，其抑制率在微泡造影剂组高于单纯病毒组，二者差异有统计学意义（P〈0．05）；rAAV-sTRAIL可诱导HepG2细胞凋亡，其凋亡率在微泡造影剂组高于单纯病毒组，二者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论构建出的重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL在肝癌细胞中能有效表达，sTRAIL基因对肝癌细胞有明显的抑制增殖和促凋亡作用；联合超声微泡造影剂及低强度超声，可有效提高腺相关病毒载体在肝癌细胞中的感染率，从而增强sTRAIL对肝癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。

关键词：肿瘤坏死因子超声微泡造影剂肝细胞癌

微泡造影剂超声辐照介导自杀基因系统治疗肝癌实验研究

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广东医学 2017年第21期38卷 3235-3238页

作者：何炼图汤庆何小洪何玮华汤佳馨李婷廖丽斯李颖珊杜继业广州医科大学附属第一医院超声科广东广州510120 中山大学附属第一医院检验科广东广州510080

目的探讨微泡造影剂超声辐照介导自杀基因系统治疗体内肝癌肿瘤的作用。方法采用小鼠肝癌瘤体内直接注射KDR-TK、AFP-TK基因和微泡造影剂SonoVue后加以超声辐照的介导方式,并通过给予GCV和5-FC两种前药,观察肿瘤生长体积、抑瘤率、生存... 详细信息

目的探讨微泡造影剂超声辐照介导自杀基因系统治疗体内肝癌肿瘤的作用。方法采用小鼠肝癌瘤体内直接注射KDR-TK、AFP-TK基因和微泡造影剂SonoVue后加以超声辐照的介导方式,并通过给予GCV和5-FC两种前药,观察肿瘤生长体积、抑瘤率、生存时间、肿瘤细胞凋亡指标。结果 (1)治疗组小鼠皮下肝癌移植瘤体生长体积与对照组之间差异无统计学意义,但治疗组的抑瘤率有增加,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05);(3)治疗组诱导肿瘤组织内的细胞凋亡增多,与对照组差异有统计学意义(P微泡造影剂超声辐照介导自杀基因治疗系统具有抑制小鼠体内肝癌实体瘤的生长速率的趋势,可能的机制是诱导肿瘤细胞凋亡。

关键词：基因治疗肝癌超声空化效应微泡造影剂

微泡造影剂增效HIFU治疗子宫肌瘤的临床研究

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微泡造影剂增效HIFU治疗子宫肌瘤的临床研究

作者：唐晓旭重庆医科大学

学位级别：硕士

研究背景：子宫肌瘤发病率高达30%-40%,为妇科最为常见的良性肿瘤之一,其确切发病机制尚未明了。子宫肌瘤治疗方式较多,包括诸如传统开腹手术、腹腔镜、宫腔镜、子宫动脉栓塞术(UAE)等。但这些治疗方式均为有创治疗,各有优缺点。HIFU作... 详细信息

研究背景：子宫肌瘤发病率高达30%-40%,为妇科最为常见的良性肿瘤之一,其确切发病机制尚未明了。子宫肌瘤治疗方式较多,包括诸如传统开腹手术、腹腔镜、宫腔镜、子宫动脉栓塞术(UAE)等。但这些治疗方式均为有创治疗,各有优缺点。HIFU作为一种新兴的非侵入性的治疗技术,在子宫肌瘤的治疗中开始逐渐扮演重要角色。临床上针对于如何提高HIFU治疗子宫肌瘤疗效的研究一直不断。大量基础研究表明,微泡造影剂能在HIFU的治疗中起增效作用,而针对于微泡造影剂增效HIFU治疗子宫肌瘤的临床研究尚处于起步阶段。目的：探讨微泡造影剂增效HIFU治疗子宫肌瘤的效果、安全性及增效时机。资料和方法：选择2012年3月至2014年7月在遂宁市中心医院确诊为单发性子宫肌瘤的患者共94例,使用重庆海扶医疗科技股份有限公司生产的JC200型聚焦超声肿瘤治疗系统进行治疗。将患者随机分为观察组(60例)和对照组(34例),对照组标记为C组,C组患者在HIFU治疗前不使用微泡造影剂(声诺维)。其中观察组又随机分为A组(30例)和B组(30例),A组患者于HIFU治疗前静脉推注声诺维,给药3分钟后即开始行HIFU治疗;B组患者同样于HIFU治疗前静脉推注声诺维,给药8分钟后开始行HIFU治疗。采用两两比较的方法,使用秩和检验比较3组的平均功率、辐照时间、治疗强度、治疗剂量、出现团状强回声的时间、消融率,使用卡方检验比较3组的肌瘤位置、肌瘤信号、术中出现团状强回声的比率及HIFU治疗中不良反应发生率等。结果：(1)将A组、B组及C组的患者和肌瘤一般情况进行比较,其中3组患者的年龄、肌瘤位置、肌瘤体积、肌瘤在T2WI上的信号均无统计学差异。(2)A组：30例患者中有26例患者(86.7%)在治疗中出现团状强回声,团状强回声出现时间的中位数为26(14-267)s,治疗强度中位数为576(516-639)s/h,治疗剂量中位数为232800(91350-402700)J,消融率中位数为91.25(85.40-102.19)%。(3)B组：30例患者中有18例患者(60.0%)在治疗中出现团状强回声,团状强回声出现时间的中位数为99(24-188)s,治疗强度中位数为654(539-737)s/h,治疗剂量中位数为320600(207775-511700)J,消融率中位数为95.93(80.50-99.79)%。(4)C组：34例患者中有12例患者(40.0%)在治疗中出现团状强回声,团状强回声出现时间的中位数为828(216-1044)s,治疗强度中位数为729(638-792)s/h,治疗剂量中位数为340000(179479-557525)J,消融率中位数为84.06(69.86-92.10)%。(5)A组与B组比较,其中治疗强度、治疗剂量、团状强回声出现比率比较的P值分别为0.028、0.048、0.039,差异具有统计学意义;以上数据说明微泡造影剂(声诺维)对于A组的增效效果高于B组。(6)A组与C组比较,其中治疗强度、治疗剂量、团状强回声出现比率、团状强回声出现时间、消融率比较的P值分别为0.000、0.046、0.000、0.000、0.002,差异具有统计学意义;综上,微泡造影剂(声诺维)能明显达到临床增效效果。(7)比较B组与C组,其中治疗强度、团状强回声出现比率、团状强回声出现时间、消融率比较的P值分别为0.038、0.048、0.012、0.006,差异具有统计学意义;综上,微泡造影剂(声诺维)可明显增强HIFU治疗子宫肌瘤的疗效。(8)在整个治疗过程中,出现放射痛的A组患者有6例(20.0%),B组患者有5例(16.7%),C组患者有5例(14.7%);出现骶尾部疼痛的A组患者有15例(50.0%),B组患者有21例(70.0%),C组患者有22例(64.7%);出现治疗区皮肤烫感的A组患者有23例(76.7%),B组患者有20例(66.7%),C组患者有22例(64.7%);出现治疗区疼痛的A组患者有21例(70.0%),B组患者有20例(66.7%),C组患者有23例(67.6%)。将三组不良反应发生的比率进行两两比较,P值均大于0.05,差异无统计学意义;由此可见微泡造影剂的使用并未增加患者治疗中不良反应的发生率。结论：微泡造影剂增效HIFU治疗子宫肌瘤是安全有效的,且增效时机和给药后开始行HIFU治疗的间隔时间有密切关系。在微泡的浓度在循环中达到峰值后,间隔时间越短,增效的效果越好。而增效的最佳时机有待深入研究。

关键词：微泡造影剂子宫肌瘤 HIFU 增效