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微小rna-96通过抑制胰岛素样生长因子1受体调控七氟醚诱导新生大鼠认知功能障碍

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中华实验外科杂志 2020年第2期37卷 265-267页

作者：徐畅牛姣姣周俊飞艾艳秋郑州大学第一附属医院麻醉与围术期医学部 450052

目的探讨微小rna(mirna,miR)-96如何通过胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)调控七氟醚诱导新生大鼠认知功能障碍。方法将大鼠(购自上海斯莱克实验动物有限公司)随机分为6组,对照组大鼠吸入浓度为40%的O2,实验组小鼠吸入不同浓度的七氟烷麻... 详细信息

目的探讨微小rna(mirna,miR)-96如何通过胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)调控七氟醚诱导新生大鼠认知功能障碍。方法将大鼠(购自上海斯莱克实验动物有限公司)随机分为6组,对照组大鼠吸入浓度为40%的O2,实验组小鼠吸入不同浓度的七氟烷麻醉(购自上海雅培上海有限公司),包括1%七氟醚组,2%七氟醚组,4%七氟醚组,4%七氟醚+miR-96过表达组和4%七氟醚+miR-96抑制组。通过给予不同浓度的七氟醚(1%、2%和4%)联合miR-96激动或抑制剂,在mrna和蛋白水平检测IGF1R、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达,测定海马神经元凋亡情况。通过测定荧光素酶活性,验证miR-96是否靶向作用于IGF1R。采用Morris水迷宫测验评价学习记忆能力。测量数据用均值±标准差(Mean±SD)表示,采用t检验对正态分布和均方差的数据进行分析,在双因素相关分析中,则采用Spearman秩相关。结果对照组、4%七氟醚组、4%七氟醚+miR-96过表达组和4%七氟醚+miR-96抑制组miR-96相对表达量分别为0.37±0.01、2.09±0.06、2.84±0.12、1.71±0.03,IGF1R相对表达量分别为2.64±0.08、0.51±0.06、0.29±0.02、1.25±0.03,吸入七氟醚后miR-96表达显著增加(t=63.230、45.870、94.750,P96过表达组miR-96表达增强(t=12.500,P96抑制剂组中则相反(t=12.670、24.670,P96通过抑制IGF1R调控有关。

关键词：七氟醚微小rna-96 胰岛素样生长因子1受体认知功能障碍

微小rna-96靶向叉头框转录因子O1促进肺癌细胞增殖和迁移

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中华实验外科杂志 2020年第12期37卷 2259-2261页

作者：何剑营黄燕燕陈志军方可欣竺王玉浙江省舟山医院细胞分子生物实验室 316021 浙江省舟山医院胸心外科 316021

目的探讨微小rna(mirna,miR)-96通过靶向叉头框转录因子O1(FOXO1)促进肺癌细胞增殖和迁移的作用。方法应用茎环反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-96在肺癌细胞株中的表达;干扰慢病毒感染抑制miR-96表达后,分别利用细胞增... 详细信息

目的探讨微小rna(mirna,miR)-96通过靶向叉头框转录因子O1(FOXO1)促进肺癌细胞增殖和迁移的作用。方法应用茎环反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-96在肺癌细胞株中的表达;干扰慢病毒感染抑制miR-96表达后,分别利用细胞增殖试验(CCK-8)和划痕试验检测其对肺癌细胞增殖和迁移的影响;蛋白质印迹法(Western blot)和双荧光素酶活性试验验证miR-96靶基因FOXO1。应用GraphPad Prism 5统计学软件进行分析,计量资料比较采用t检验。结果CCK-8实验显示抑制H1299细胞miR-96表达后,实验组24、48、72 h吸光度值分别为1.293±0.019、1.684±0.038、2.180±0.034,明显低于对照组的1.655±0.056、1.880±0.020、2.493±0.060,差异有统计学意义(t=5.646、4.426、14.670,P96)%、(47.49±3.33)%,明显高于实验组[(5.80±2.94)%、(13.63±3.18)%],差异有统计学意义(t=4.748、7.352,P96靶基因FOXO1,将miR-96过表达后,肺癌细胞FOXO1表达明显降低;反之,抑制miR-96表达后,FOXO1表达明显增高。荧光素酶活性试验显示miR-96和FOXO13’非翻译区(3’UTR)野生型质粒共转染后,野生型为(22.5±7.6)%,与对照组的(97.2±13.2)%及突变型的(115.6±13.5)%比较,荧火虫/海肾荧光素酶比值明显降低(t=14.750、12.040,P值均96通过靶向调控FOXO1促进肺癌细胞增殖和迁移。

关键词：肺癌微小rna-96 叉头框转录因子O1 增殖迁移

脑卒中后认知功能障碍与血清胰岛素样生长因子1、微小rna-96的关系

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国际精神病学杂志 2023年第1期50卷 89-92页

作者：赵静雅河南大学淮河医院开封475000

目的探讨脑卒中后认知功能障碍(PSCI)与血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、微小rna-96的相关性。方法选择2019年4月~2022年1月我院94例脑卒中患者为研究对象,采用蒙特利尔认知量表(MoCA)评估患者认知功能,并设为PSCI组以及非PSCI组,调查两... 详细信息

目的探讨脑卒中后认知功能障碍(PSCI)与血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、微小rna-96的相关性。方法选择2019年4月~2022年1月我院94例脑卒中患者为研究对象,采用蒙特利尔认知量表(MoCA)评估患者认知功能,并设为PSCI组以及非PSCI组,调查两组患者性别、年龄等一般资料,比较两组患者的血清IGF-1、微小rna-96水平,分析血清IGF-1、微小rna-96水平与MoCA评分的相关性,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IGF-1、微小rna-96水平对PSCI的诊断价值。结果94例脑卒中发生PSCI 42例,PSCI组年龄、血清微小rna-96水平显著高于非PSCI组,受教育年限、美国国立卫生院神经功能缺损评分、血清IGF-1水平显著低于非PSCI组(P0.05);血清微小rna-96表达水平与MoCA评分呈正相关,血清IGF-1水平与MoCA评分呈负相关;ROC曲线提示血清IGF-1、微小rna-96表达水平对PSCI具有较高的预测价值。结论脑卒中患者中PSCI具有较高的发生率,血清IGF-1、微小rna-96表达水平对其具有一定的辅助诊断价值。

关键词：脑卒中认知功能障碍胰岛素样生长因子1 微小rna-96

微小rna-96对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1表达的影响

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临床肿瘤学杂志 2017年第10期22卷 869-873页

作者：赵靓夏春军吴堂兵谷文龙肖艳华南京医科大学附属脑科医院物理诊断科南京210029 南通大学附属建湖医院肿瘤放疗科 224700

目的探讨微小rna-96(miR-96)对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1(SPIN1)表达的影响。方法采用脂质体法将miR-96模拟物(mimics)及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞(miR-96转染组和miR-96对照组),以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时... 详细信息

目的探讨微小rna-96(miR-96)对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1(SPIN1)表达的影响。方法采用脂质体法将miR-96模拟物(mimics)及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞(miR-96转染组和miR-96对照组),以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时定量PCR(QPCR)检测各组转染48 h后细胞中miR-96的表达情况,MTT及流式细胞仪分别检测各组转染48 h后的增殖及凋亡情况,分别采用QPCR和Western blotting检测转染48 h后各组细胞的SPIN1 mrna和蛋白水平,通过双荧光素酶靶标实验验证miR-96与SPIN1之间的关系。结果转染48 h后未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的miR-96水平依次为1.068±0.053、1.175±0.084和2.434±0.088,miR-96转染组的miR-96水平高于其余两组,差异有统计学意义(P96对照组和miR-96转染组的增殖率依次为(99.633±5.059)%、(97.727±3.079)%和(62.023±5.425)%,凋亡率依次为(7.515±0.924)%、(8.123±1.247)%和(26.845±4.126)%,与其余两组相比,miR-96转染组的增殖率降低而凋亡率升高,差异有统计学意义(P96对照组和miR-96转染组的SPIN1 mrna水平依次为0.965±0.046、0.917±0.044和0.549±0.039,SPIN1蛋白水平依次为0.667±0.042、0.715±0.045和0.384±0.038,miR-96转染组的SPIN1 mrna和蛋白水平均低于其余两组,差异有统计学意义(P96抑制含有野生型SPIN1-3’UTR质粒细胞的荧光素酶活性,却对含有突变型质粒细胞的荧光素酶活性无影响。结论过表达miR-96可抑制宫颈癌细胞的增殖凋亡并降低SPIN1表达水平,miR-96对SPIN1有靶向调控作用,可作为治疗宫颈癌的有效靶点。

关键词：宫颈癌微小rna-96 增殖凋亡 Spindlin1

血清外泌体miR-96、RANKL在老年骨质疏松患者中表达及其与骨代谢标志物的相关性

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中国老年学杂志 2024年第18期 4427-4431页

作者：方勇强柯瑟章肖古裕邱艳华福建医科大学附属漳州市医院健康管理中心福建医科大学附属漳州市医院老年医学科福建医科大学附属漳州市医院全科医学科福建医科大学附属漳州市医院医学影像科

目的分析血清外泌体miR-96、核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)在老年骨质疏松患者中表达及与骨代谢标志物的相关性。方法选取130例老年骨质疏松患者为研究组，另外选取80例正常体检者为对照组。观察两组血清外泌体miR-96、RANKL水... 详细信息

目的分析血清外泌体miR-96、核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)在老年骨质疏松患者中表达及与骨代谢标志物的相关性。方法选取130例老年骨质疏松患者为研究组，另外选取80例正常体检者为对照组。观察两组血清外泌体miR-96、RANKL水平及骨代谢标志物指标，分析血清外泌体miR-96、RANKL水平与骨代谢标志物的相关性，多因素分析骨质疏松发生的危险因素。结果研究组超敏C反应蛋白(hs-CRP)、糖化血红蛋白(HbA1c)、葡萄糖(GLU)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)水平显著高于对照组(P96、RANKL水平较高(P96、RANK与骨代谢标志物具有一定相关性，miR-96、RANK与PⅠNP、PTH、β-CTX正相关，miR-96、RANK与BGP、25(OH)D3负相关(P96、RANKL、PⅠNP、PTH、BGP、β-CTX、25(OH)D3为影响骨质疏松发生的危险因素。结论在老年骨质疏松患者血清外泌体中，miR-96、RANKL表达水平较高，且骨质疏松的发生可影响骨代谢标志物水平，hs-CRP、HbA1c、GLU、LDL-C、TG、miR-96、RANKL、PⅠNP、PTH、BGP、β-CTX、25(OH)D3为导致骨质疏松发生的危险因素。

关键词：骨质疏松外泌体微小rna-96 核因子(NF)-κB受体活化因子配体骨代谢标志物

胃镜活检组织SF3B4及miR-96表达在胃癌病情及预后评估中的临床价值

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疑难病杂志 2024年第1期23卷 46-51页

作者：董杰杨松肖俊李鹏程湖北省洪湖市人民医院普外科 433200 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化肿瘤外科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心武汉430022

目的分析胃镜活检组织剪接因子3b亚基4(SF3B4)及微小rna-96(miR-96)表达在胃癌病情及预后评估中的临床价值。方法选择2017年1—12月湖北省洪湖市人民医院普外科诊治胃癌患者95例为胃癌组,胃良性疾病患者60例为非胃癌组,采用实时荧光定量... 详细信息

目的分析胃镜活检组织剪接因子3b亚基4(SF3B4)及微小rna-96(miR-96)表达在胃癌病情及预后评估中的临床价值。方法选择2017年1—12月湖北省洪湖市人民医院普外科诊治胃癌患者95例为胃癌组,胃良性疾病患者60例为非胃癌组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测组织SF3B4、miR-96表达,比较不同临床病理资料中SF3B4、miR-96表达的差异;采用ROC曲线分析SF3B4及miR-96预测胃癌1年预后不良的价值;多因素Logistic回归分析胃癌患者死亡的危险因素;Kaplan-Meier法分析SF3B4、miR-96表达与生存期的关系。结果胃癌组肿瘤组织SF3B4、miR-96表达均显著高于癌旁组织、非胃癌组病灶组织(F/P=516.766/96表达显著高于胃癌中-高分化、肿瘤最大直径96:t/P=4.543/96及二者联合预测胃癌1年预后不良的AUC分别为0.785、0.779、0.952,二者联合优于各自单独预测效能(Z/P=3.451/0.017、3.565/0.014)。多因素Logistic回归分析显示SF3B4≥1.51、miR-96≥1.28、肿瘤分化程度低分化、肿瘤最大直径≥5 cm、肿瘤浸润深度T3-4、有淋巴结转移、cTNM分期Ⅲ~Ⅳ期为胃癌1年死亡的独立危险因素[OR(95%CI)=4.225(1.034~4.623)、3.877(1.142~6.189)、2.261(1.275~5.726)、2.487(1.338~7.516)、2.088(1.023~5.367)、2.779(1.161~4.591)、3.013(1.416~5.791)]。95例胃癌患者随访至终点时存活36例,死亡59例。SF3B4≥1.51且miR-96≥1.28胃癌患者中位生存期(23.7±5.4)个月低于SF3B49696表达显著升高,与病情严重程度、预后及生存期密切相关,可作为胃癌病情及预后评估的标志物,且二者联合检测时可提高预测胃癌预后不良的敏感度及特异度。

关键词：胃癌剪接因子3b亚基4 微小rna-96 病情预后

慢性缺氧通过激活缺氧诱导因子1α/microrna-96通路诱导小管上皮细胞自噬异常参与肾间质纤维化

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肾脏病与透析肾移植杂志 2024年第1期33卷 22-28页

作者：魏琪王菊宁刘利敏西安培华学院西安710125 西北大学西安710069

目的:研究慢性缺氧诱导肾脏纤维化的机制。方法:缺氧诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2),Western Blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)和p62的表达及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测microrna-96(miR-96)的... 详细信息

目的:研究慢性缺氧诱导肾脏纤维化的机制。方法:缺氧诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2),Western Blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)和p62的表达及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测microrna-96(miR-96)的表达。采用sirna-HIF-1α(siHIF-1α)和pcDNA-HIF-1α处理缺氧诱导的肾小管上皮细胞,利用RT-qPCR检测miR-96的表达,探讨过表达和干扰HIF-1α对miR-96表达的影响。miR-96mimic处理常氧肾小管上皮细胞,Western Blot检测促纤维化因子α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白1(COL4A1)蛋白的变化,RT-qPCR检测自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ和p62的表达。小鼠腹腔注射miR-96 inhibitor的病毒载体,通过Masson染色检测各模型肾脏纤维化的程度及纤维化因子COL4A1的表达。结果:在缺氧诱导的肾小管上皮细胞中HIF-1α和miR-96表达均增加(P96的表达,siHIF-1α处理缺氧诱导的HK-2细胞,发现沉默HIF-1α可降低由缺氧引起的miR-96的增加,常氧条件下过表达miR-96诱导HK-2的纤维化因子α-SMA和COL4A1的增加,同时自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ水平升高p62水平降低(P96可降低自噬关键分子的LC3Ⅰ/Ⅱ表达水平,恢复p62的表达(P96 inhibitor的病毒载体,与注射了对照病毒的小鼠相比可以抑制单侧输尿管梗阻(UUO)引起的肾脏纤维化,减低纤维化因子COL4A1的表达。结论:缺氧通过激活HIF-1α/miR-96信号通路诱导肾小管上皮细胞自噬异常、促纤维化因子增加,促进了肾脏纤维化。

关键词：缺氧缺氧诱导因子1α 微小rna-96 自噬肾脏纤维化

microrna-96与脓毒症新生儿炎症反应的关系研究

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国际检验医学杂志 2022年第17期43卷 2131-2134,2140页

作者：张春磊李秀婷刘娜张成元潍坊市妇幼保健院儿科山东潍坊261011

目的分析微小rna-96(miR-96)与新生儿脓毒症(NS)炎症反应的关系。方法将2018年6月至2020年4月在该院治疗的65例NS患儿作为NS组,将同期65例非感染性全身炎症反应综合征(SIRS)患儿作为非感染性SIRS组,另选50例健康体检儿童作为健康组。采... 详细信息

目的分析微小rna-96(miR-96)与新生儿脓毒症(NS)炎症反应的关系。方法将2018年6月至2020年4月在该院治疗的65例NS患儿作为NS组,将同期65例非感染性全身炎症反应综合征(SIRS)患儿作为非感染性SIRS组,另选50例健康体检儿童作为健康组。采用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定miR-96水平,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清炎性因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,采用Pearson相关分析miR-96与炎症反应指标的相关性;随访后,将NS组分为存活组、死亡组,对比不同预后患儿血清各指标差异,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-96对NS患儿预后的预测价值。结果NS组序贯器官衰竭评估评分、急性生理学和慢性健康评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分比非感染性SIRS组高,差异均有统计学意义(P96水平比非感染性SIRS组、健康组低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平比非感染性SIRS组、健康组高,差异均有统计学意义(P96水平与IL-1β、IL-6、TNF-α均呈负相关(r96水平比存活组低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平比存活组高,差异均有统计学意义(P96预测NS患儿病死的AUC为0.903(95%CI:0.846~0.978),以0.75为临界值,其灵敏度、特异度分别为0.894、0.855,约登指数为0.749。结论NS患儿miR-96水平下调,炎性因子水平上调,二者呈负相关;且miR-96水平对NS预后有一定的预测价值。

关键词：微小rna-96 新生儿脓毒症炎症反应预后

血清外泌体miR-96表达与老年糖尿病患者骨质疏松的相关性

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海南医学 2023年第8期34卷 1139-1143页

作者：吴丽明宋成福金鹿杨紫姣杨浦区中心医院老年科上海200090

目的检测血清外泌体miR-96在老年糖尿病患者中的表达水平,并分析其与骨质疏松(OP)的相关性。方法回顾性分析2019年1月至2021年5月杨浦区中心医院老年科收治的171例年龄≥60岁的2型糖尿病患者,根据骨质疏松诊断标准分为OP组(82例)和非OP... 详细信息

目的检测血清外泌体miR-96在老年糖尿病患者中的表达水平,并分析其与骨质疏松(OP)的相关性。方法回顾性分析2019年1月至2021年5月杨浦区中心医院老年科收治的171例年龄≥60岁的2型糖尿病患者,根据骨质疏松诊断标准分为OP组(82例)和非OP组(89例);检测并比较两组患者血清外泌体miR-96表达水平、血清25-羟维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]、I型胶原羧基端肽交联(β-CTX)、甲状旁腺激素(PTH)、骨钙素(BGP)和I型前胶原氨基末端前肽(PINP)水平;多因素Logistic回归分析老年糖尿病患者发生骨质疏松的相关因素;采用Pearson系数分析miR-96表达水平与各指标的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-96对老年糖尿病合并骨质疏松的诊断效能。结果OP组患者的β-CTX、HbA1c、PINP、PTH水平明显高于非OP组,而BMI、25(OH)D3、BGP明显低于非OP组,差异均有统计学意义(P96表达水平为1.42±0.31,高于非OP组的1.01±0.25,差异有统计学意义(P96与BMI、BGP、25(OH)D3呈负相关(r=-0.504、-0.425、-0.541,P96与β-CTX、PTH、Hb A1c、PINP呈正相关性(r=0.463、0.479、0.447、0.392,P96、BMI、HbA1c、BGP、25(OH)D_(3)、β-CTX、PTH、PINP是老年糖尿病患者发生骨质疏松的影响因素(P96诊断老年糖尿病患者合并骨质疏松的曲线下面积为0.878(95%CI:0.828~0.927)。结论老年糖尿病合并骨质疏松患者血清外泌体中miR-96表达水平升高,miR-96表达水平与骨质疏松密切相关,并对骨质疏松有较高的诊断效能。

关键词：老年 2型糖尿病骨质疏松外泌体微小rna-96 相关性