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中华实验外科杂志 2020年第4期37卷 658-662页

作者：韩威利王凯李明勇赵英玲金胜王培山新乡市中心医院麻醉科 453000 湖北文理学院附属医院襄阳市中心医院麻醉科 441021

目的探讨舒芬太尼(SUF)对肝癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及其机制。方法 2018年12月至2019年8月,将Hep3B细胞(购自上海联迈生物工程有限公司)分为miR-NC组、miR-495组、SUF(购自德国IDT Biologika公司)+抗-miR-NC组、SUF+抗-miR-49... 详细信息

目的探讨舒芬太尼(SUF)对肝癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及其机制。方法 2018年12月至2019年8月,将Hep3B细胞(购自上海联迈生物工程有限公司)分为miR-NC组、miR-495组、SUF(购自德国IDT Biologika公司)+抗-miR-NC组、SUF+抗-miR-495组,采用不同浓度的SUF处理肝癌Hep3B细胞,检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测微小rna(mirna,miR)-495的表达水平。将miR-495模拟物(miR-495 mimics)转染Hep3B细胞,采用上述方法检测以上指标变化。将miR-495抑制物(抗miR-495)转染至Hep3B细胞,经10 μmol/L的SUF干预后,采用上述方法检测以上指标变化。蛋白质印迹法(Western blot)检测SUF对Hep3B细胞对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。两组间比较采用t检验。多组间比较采用单因素方差分析,进一步组间两两比较采用SNK-q检验。结果与干预前[(100.15±10.05)%、(225.36±22.53)个、(153.76±15.38)个、(6.73±0.67)%、1.00±0.10、1.05±0.11]比较,SUF(10.0 μmol/L)处理后Hep3B细胞存活率[(62.38±6.25)%]、迁移[(108.24±10.85)个]和侵袭[(80.42±8.05)个]细胞数显著降低,凋亡率[(20.36±2.05)%]、miR-495表达(2.99±0.31)显著升高,β-catenin蛋白(0.42±0.04)表达显著降低(t=9.574、14.051、12.674、18.959、18.328、16.147,P495后Hep3B细胞存活率[(52.08±5.20)%]、迁移[(124.38±12.46)个]和侵袭[(84.09±8.40)个]细胞数显著降低,凋亡率[(17.29±1.73)%]显著升高(t=12.897、12.168、12.471、16.881,P495联合SUF处理后Hep3B细胞存活率[(134.08±13.44)%]、迁移[(189.26±19.01)个]和侵袭[(131.24±13.15)个]细胞数显著升高,凋亡率[(10.22±1.05)%]显著降低,β-catenin(0.89±0.09)蛋白表达显著升高(t=5.923、10.613、8.841、14.657、12.821,P495抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡,其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。

关键词：舒芬太尼微小rna-495 肝癌细胞增殖迁移侵袭 Wnt/β-连环蛋白信号通路

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三阴性乳腺癌组织miR-495、HMGA2表达变化及其与临床病理特征和预后的关系

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山东医药 2024年第13期64卷 72-74,78页

作者：向超李哲重庆市万州区妇幼保健院乳甲外科重庆404100 陆军军医大学西南医院江北院区乳甲外科

目的观察三阴性乳腺癌(TNBC)组织微小rna-495(miR-495)、高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达变化,并探讨二者表达变化与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择TNBC患者83例,取术中切除的乳腺癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测... 详细信息

目的观察三阴性乳腺癌(TNBC)组织微小rna-495(miR-495)、高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达变化,并探讨二者表达变化与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择TNBC患者83例,取术中切除的乳腺癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测miR-495、HMGA2 mrna表达。比较乳腺癌组织与癌旁正常组织miR-495、HMGA2 mrna表达,分析乳腺癌组织miR-495表达与HMGA2 mrna表达的关系以及二者表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果乳腺癌组织miR-495相对表达量低于癌旁正常组织,HMGA2 mrna相对表达量高于癌旁正常组织(t分别为17.103、-5.428,P均495相对表达量与HMGA2 mrna相对表达量呈负相关关系(r=-0.503,P495、HMGA2 mrna表达与肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移有关(P均0.05)。以乳腺癌组织miR-495、HMGA2 mrna相对表达量的均值为临界值,将患者分为miR-495高表达者44例与低表达者39例,HMGA2 mrna高表达者38例与低表达者45例。生存分析发现,miR-495低表达者与高表达者术后3年累积生存率分别为69.2%、88.6%,miR-495低表达者术后3年累积生存率低于其高表达者(Log-rankχ^(2)=4.780,Prna低表达者与高表达者术后3年累积生存率分别为91.1%、65.8%,HMGA2 mrna低表达者术后3年累积生存率高于其高表达者(Log-rankχ^(2)=8.111,P495低表达、HMGA2高表达,二者表达变化与肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移等临床病理特征以及患者预后密切相关。

关键词：三阴性乳腺癌微小rna-495 高迁移率族蛋白A2 临床病理特征预后

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miR-495调控MAPK/ERK信号通路对大鼠脊髓损伤后神经元自噬的影响

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中国免疫学杂志 2023年第8期39卷 1605-1610页

作者：王惟达蒋林(指导) 长沙市第一医院脊柱外科长沙410000

目的:探究微小rna-495(miR-495)调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对大鼠脊髓损伤(SCI)后神经元自噬的影响。方法:按每组10只随机将50只SD大鼠分为假手术组、SCI组、agomir-NC组、miR-495 agomir组、miR-49... 详细信息

目的:探究微小rna-495(miR-495)调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对大鼠脊髓损伤(SCI)后神经元自噬的影响。方法:按每组10只随机将50只SD大鼠分为假手术组、SCI组、agomir-NC组、miR-495 agomir组、miR-495 agomir+Anisomycin组(p38-MAPK特异性激活剂Anisomycin),击打T10段脊髓构建SCI模型,将agomirNC、miR-495 agomir、Anisomycin于造模前3 d(20 nmol/d)注入相应组大鼠脊髓T10段蛛网膜下腔,假手术组、SCI组注射等量生理盐水;qRT-PCR检测脊髓组织中miR-495的表达;运动功能BBB评分评估神经功能恢复情况;HE染色、吖啶橙染色分别观察大鼠脊髓组织病理学情况及神经元自噬;ELISA法检测脊髓组织中炎症因子表达;Western blot检测脊髓组织中自噬及MAPK/ERK通路蛋白表达。结果:与假手术组相比,SCI组大鼠miR-495表达、BBB评分显著降低,脊髓组织病理学程度、自噬小体数目、TNF-α、IL-1β、IL-6、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、p-ERK1/2/ERK1/2和p-c-fos/c-fos水平显著增加(P495 agomir组miR-495表达、BBB评分显著升高,脊髓组织病理学程度、自噬小体数目、TNF-α、IL-1β、IL-6、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、p-ERK1/2/ERK1/2和p-c-fos/c-fos水平显著降低(P495 agomir对大鼠SCI后神经元自噬的抑制作用。结论:miR-495过表达可能通过抑制MAPK/ERK信号通路激活来抑制大鼠SCI后神经元自噬。

关键词：微小rna-495 丝裂原活化蛋白激酶脊髓损伤细胞外信号调节激酶自噬

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miR-495在骨肉瘤细胞中表达变化、对MG-63细胞增殖的影响及其机制

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山东医药 2018年第23期58卷 18-21页

作者：王美凤邢国英宫锦蕾孙英华夏海王复超张兆卿潍坊医学院附属益都中心医院山东潍坊262500 大连医科大学附属第一医院

目的观察miR-495在骨肉瘤细胞中的表达变化及其对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响,并探讨可能的分子机制。方法采用real-time PCR法检测人骨肉瘤细胞系Saos-2、U20S、MG-63及人成骨细胞h FOB1.19中的miR-495。将MG-63细胞分为阴性对照组、miR... 详细信息

目的观察miR-495在骨肉瘤细胞中的表达变化及其对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响,并探讨可能的分子机制。方法采用real-time PCR法检测人骨肉瘤细胞系Saos-2、U20S、MG-63及人成骨细胞h FOB1.19中的miR-495。将MG-63细胞分为阴性对照组、miR-495 mimics组、miR-495 mimics+HMGA2组,分别转染mimics-NC、miR-495 mimics、miR-495 mimics+HMGA2表达质粒,转染24、48、72、96 h后,采用CCK-8法检测MG-63细胞增殖能力。应用靶基因在线预测数据库miRanda并结合基因的功能分析进行miR-495的靶基因预测。采用双荧光素酶报告实验验证miR-495与靶基因的结合位点。采用Western blotting法验证miR-495对高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达的靶向调控作用。结果 Saos-2、MG-63、U20S细胞中miR-495的相对表达量低于h FOB1.19细胞(P均495 mimics组MG-63细胞OD值低于阴性对照组组,miR-495 mimics+HMGA2组MG-63细胞OD值高于miR-495 mimics组(P均495可与HMGA2的3'UTR区特异性结合,从而显著抑制荧光素酶活性。miR-495 mimics组MG-63细胞中HMGA2蛋白的相对表达量低于mimics-NC组,miR-495 mimics+HMGA2组MG-63细胞中HMGA2蛋白的相对表达量高于miR-495 mimics组(P均495的表达水平低于正常成骨细胞;上调miR-495表达后骨肉瘤细胞增殖受到抑制;miR-495可能通过靶向调控HMGA2表达从而抑制骨肉瘤细胞的增殖。

关键词：骨肉瘤骨肉瘤细胞微小rna-495 细胞增殖高迁移率族蛋白A2

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