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炎症性肠病的微小rna-377、微小rna-31表达及其与肠道菌群相关性

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安徽医药 2022年第7期26卷 1325-1328页

作者：李国东梁博何明璇崔昭刘亚维保定市第一中心医院消化三科河北保定071000 保定市第二医院消化内科河北保定071000 河北大学附属医院中西医结合科河北保定071030

目的探讨微小rna-377(miR-377)、微小rna-31(miR-31)在炎症性肠病血清中的表达及其与肠道菌群相关性。方法选取2016年5月至2019年6月保定市第一中心医院收治的110例炎症性肠病病人为研究组,其中活动期69例、缓解期41例,同时选取同院体... 详细信息

目的探讨微小rna-377(miR-377)、微小rna-31(miR-31)在炎症性肠病血清中的表达及其与肠道菌群相关性。方法选取2016年5月至2019年6月保定市第一中心医院收治的110例炎症性肠病病人为研究组,其中活动期69例、缓解期41例,同时选取同院体检的健康志愿者60例为对照组;采用qRT-PCR法检测血清miR-377、miR-31的表达量;根据表达量平均值将病人分为miR-377低表达组53例、miR-377高表达组57例、miR-31低表达组57例、miR-31高表达组53例,比较分析miR-377、miR-31表达量与肠道菌群[肠球菌(EC)、酵母菌(SB)、双歧杆菌(BL)、消化球菌(PS)、小梭菌(CD)、肠杆菌(EMB)、葡萄球菌(SP)、拟杆菌(BD)、乳杆菌(LC)、真杆菌(ES)]数量的相关性;采用ELISA法检测血清白细胞介素-34(IL-34)、C反应蛋白(CRP)的水平;采用电化学发光法检测血清降钙素原(PCT)的水平;采用Pearson法分析miR-377、miR-31表达量与IL-34、CRP、PCT水平的相关性。结果与对照组比较,研究组血清中miR-377、miR-31的表达水平显著升高[(0.96±0.16)比(2.23±0.50)、(0.97±0.24)比(2.39±0.41)](P377与IL-34、CRP、PCT水平呈正相关(r=0.99、0.50、0.86,均P377低表达组比较,miR-377高表达组SB、BL、LC、EC、BD、PS、SC的数量明显升高(P377、miR-31在炎症性肠病血清中的表达水平升高,二者均与炎性反应及肠道菌群有关。

关键词：炎性肠疾病微小rna-377 微小rna-31 炎性反应肠道菌群白细胞介素34 C反应蛋白

血清外泌体微小rna-338在食管癌中的表达及临床意义

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中华实验外科杂志 2022年第2期39卷 362-365页

作者：王敏刘雪娜刘公哲李大宏山东第一医科大学附属济南人民医院检验科 271199 山东第一医科大学附属济南人民医院心胸外科 271199

目的观察血清外泌体微小rna-377(miR-377)在食管癌(EC)中的表达水平,并探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测OE33、Eca9706细胞株、5例EC癌组织中miR-377表达水平。选取2016年4月至2019年3月经山东第一医科... 详细信息

目的观察血清外泌体微小rna-377(miR-377)在食管癌(EC)中的表达水平,并探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测OE33、Eca9706细胞株、5例EC癌组织中miR-377表达水平。选取2016年4月至2019年3月经山东第一医科大学附属济南人民医院确诊并住院治疗的EC患者40例作为观察组,另选取同期本院体检健康者40例作为对照组,RT-qPCR检测血清外泌体中miR-377表达水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)水平;采用χ^(2)检验分析EC患者血清外泌体中miR-377、血清VEGF水平与临床病理特征的关系;Pearson法分析EC患者血清外泌体中miR-377、血清VEGF表达相关性;受试者工作特征(ROC)曲线预测miR-377、VEGF表达水平对EC的诊断价值。结果与正常食管上皮细胞株HEEC细胞中miR-377表达水平(1.07±0.20)比较,OE33、Eca9706癌细胞中miR-377表达水平(0.74±0.21和0.68±0.19)显著降低(F=6.604,P377表达水平(1.10±0.23)比较,癌组织中miR-377表达水平(0.69±0.18)显著降低(t=3.319,P377表达水平(0.76±0.22)明显低于对照组血清外泌体中miR-377表达水平(1.04±0.25,t=5.318,P377及血清VEGF表达水平与TNM分期、分化程度和淋巴结转移均有关(miR-377:χ^(2)=6.172、8.780、13.864,P377与血清VEGF表达呈负相关(r=-0.641,P377诊断EC的ROC曲线下面积为0.835(95%CI:0.684~0.933),灵敏度为69.50%,特异性为88.20%;血清VEGF诊断EC的ROC曲线下面积为0.909(95%CI:0.775~0.977),灵敏度为89.65%,特异性为76.50%;miR-377联合VEGF诊断EC的ROC曲线下面积为0.949(95%CI:0.829~0.994),灵敏度为95.70%,特异性为88.21%。

关键词：食管癌血清外泌体微小rna-377 诊断价值

加味真武汤通过调控miR-377表达水平对糖尿病肾病的影响

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国际泌尿系统杂志 2023年第2期43卷 322-326页

作者：陈东孟元祝丙华张洁中国人民解放军第305医院肾脏内科北京100017 首都医科大学附属北京中医医院肾病科北京100010 中国人民解放军第305医院感染控制北京100017

目的探讨加味真武汤通过调控miR-377表达水平对糖尿病肾病(DN)细胞炎症水平和免疫功能的影响及分子机制.方法选取40只SPF级雄性大鼠,对其中30只大鼠进行腹腔注射链脲佐菌素,建立大鼠DN模型,并随机分为模型对照组、加味真武汤低剂量组... 详细信息

目的探讨加味真武汤通过调控miR-377表达水平对糖尿病肾病(DN)细胞炎症水平和免疫功能的影响及分子机制.方法选取40只SPF级雄性大鼠,对其中30只大鼠进行腹腔注射链脲佐菌素,建立大鼠DN模型,并随机分为模型对照组、加味真武汤低剂量组、加味真武汤高剂量组,每组各10只.同时设置空白对照组(10只).建立HK-2细胞的DN模型,分为miR-NC+DN组(将miR-NC转染至建模后的HK-2细胞)、miR-377+DN组(将miR-377转染至建模后的HK-2细胞)、anti-miR-NC+DN组(将anti-miR-NC转染至建模后的HK-2细胞)、an-ti-miR-377+DN组(将anti-miR-377转染至建模后的HK-2细胞)、加味真武汤+miR-NC+DN组(将miR-NC转染至建模后的HK-2细胞,再用高剂量加味真武汤处理)、加味真武汤+miR-377+DN 组(将miR-377转染至建模后的HK-2细胞,再用高剂量加味真武汤处理).采用实时荧光定量PCR检测miR-377表达水平;采用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平;采用流式细胞仪检测CD4^(+)、CD8^(+)和Th1水平.结果与空白对照组比较,模型对照组的TNF-α、IL-6、IL-8、CD4^(+)、miR-377水平升高,CD8^(+)和Th1水平降低,差异均有统计学意义(均P377水平降低,CD8^(+)和Th1水平升高,差异均有统计学意义(均P377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4^(+)水平升高,CD8^(+)和Th1水平降低(均P377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4^(+)水平降低,CD8^(+)和Th1水平升高(均P377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4^(+)水平降低,CD8^(+)和Th1水平升高(均P377表达减轻DN细胞炎症水平,增强患者的免疫功能,值得临床推广应用.

关键词：糖尿病肾病微小rna-377 加味真武汤

急性淋巴细胞白血病患者miR377-和SMYD3表达水平与临床预后意义

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国际检验医学杂志 2023年第17期44卷 2129-2133页

作者：徐丹丹刘洋中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院检验科安徽合肥230031

目的探讨急性淋巴细胞白血病患者微小rna-377(miR-377)和SET及MYND结构域包含蛋白3(SMYD3)表达水平及临床预后意义。方法选择2016年3月至2020年6月该院收治的135例急性淋巴细胞白血病患者作为观察组,同时选择同期120例体检健康者作为对... 详细信息

目的探讨急性淋巴细胞白血病患者微小rna-377(miR-377)和SET及MYND结构域包含蛋白3(SMYD3)表达水平及临床预后意义。方法选择2016年3月至2020年6月该院收治的135例急性淋巴细胞白血病患者作为观察组,同时选择同期120例体检健康者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测研究对象外周血miR-377、SMYD3表达水平。随后比较不同组别、不同临床特征及不同疗效的患者miR-377、SMYD3表达水平差异,并采用Kaplan-Meier法和多因素Cox回归模型分析miR-377、SMYD3与急性淋巴细胞白血病患者预后的关系。结果观察组miR-377表达水平低于对照组,SMYD3表达水平高于对照组(P377高表达组患者的危险度分型,白细胞计数(WBC)(入院时、入院1月后),乳酸脱氢酶(LDH)(入院时、入院1月后),骨髓原幼细胞比例均明显低于miR-377低表达组(P377、SMYD3表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),miR-377表达水平从低到高依次为未缓解(NR)组、部分缓解(PR)组、CR组、对照组(P377高表达组总生存率(65.33%)明显高于miR-377低表达组(41.67%)(P377、SMYD3均为影响急性淋巴细胞白血病患者预后的危险因素(P377呈低表达水平,SMYD3呈高表达水平,且二者表达水平与患者临床特征、疗效及预后均密切相关,因此可作为评估患者临床预后的有效指标。

关键词：急性淋巴细胞白血病微小rna-377 SET及MYND结构域包含蛋白3 预后

血清miR-377、α-SMA水平在急性肾功能衰竭患者治疗前后变化及对转化慢性肾脏病的预测价值

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广东医学 2022年第12期43卷 1546-1550页

作者：邵洁赵静危娜西安市第九医院血液透析室陕西西安710054

目的分析血清微小rna-377(miR-377)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平在急性肾功能衰竭(ARF)患者治疗前后的变化情况,评价血清miR-377、α-SMA对ARF转化慢性肾脏病(CKD)的预测价值。方法选取ARF患者157例为研究对象,另选取同期健康体检者... 详细信息

目的分析血清微小rna-377(miR-377)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平在急性肾功能衰竭(ARF)患者治疗前后的变化情况,评价血清miR-377、α-SMA对ARF转化慢性肾脏病(CKD)的预测价值。方法选取ARF患者157例为研究对象,另选取同期健康体检者157例为对照。比较ARF患者治疗前后与健康对照者血清miR-377、α-SMA水平,统计3个月后CKD发病率。收集并比较是否发生CKD的ARF患者一般资料,采用logistic回归方程对ARF转化CKD进行多因素分析,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-377、α-SMA对ARF转化CKD的预测价值。结果ARF患者治疗前及治疗2周血清miR-377、α-SMA水平均高于健康对照者,且ARF患者治疗前血清miR-377、α-SMA水平高于治疗2周(P377、α-SMA水平与ARF患者转化CKD有关(P377(95%CI为1.793~5.036,OR=3.005,P=0.001)、α-SMA(95%CI为2.786~7.118,OR=4.453,P377、α-SMA水平联合预测ARF转化CKD的AUC为0.930,对应敏感度为77.78%、特异度为94.17%。结论治疗前ARF患者血清miR-377、α-SMA水平异常升高,治疗后有所降低;血清miR-377、α-SMA水平联合检测预测ARF转化CKD风险具有较高价值,可作为ARF转化为CKD的预警因子。

关键词：急性肾功能衰竭慢性肾脏病微小rna-377 α-平滑肌肌动蛋白纤维化

MiR-377调节甘油三酯代谢与动脉粥样硬化的作用及机制

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MiR-377调节甘油三酯代谢与动脉粥样硬化的作用及机制

作者：陈凌燕南华大学

学位级别：硕士

[背景与目的]:动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是冠心病、心肌梗死和脑梗死等心脑血管疾病的共同病理学基础,其中脂质代谢紊乱是AS发生发展的重要危险因素,严重危害人类健康。新近流行病学调查证实甘油三酯(triglycerides,TG)是AS的... 详细信息

[背景与目的]:动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是冠心病、心肌梗死和脑梗死等心脑血管疾病的共同病理学基础,其中脂质代谢紊乱是AS发生发展的重要危险因素,严重危害人类健康。新近流行病学调查证实甘油三酯(triglycerides,TG)是AS的独立危险因素,其引发的高甘油三酯血症能促进AS发生发展。近年来,国内外大量研究表明micro rnas在脂质代谢和AS发生发展过程中发挥重要作用。本课题组先前研究证实mi R-186、mi R-134、mi R-467b等多种micro rnas参与巨噬细胞内脂质蓄积和炎症反应。MiR-377作为一个多功能的micro rna,它参与炎症、氧化应激和血管生成,并与心肌再生关系密切。更为重要的是,有研究报道mi R-377与体内脂质水平具有一定相关性,这表明循环mi R-377可能在调节体内脂质代谢过程中扮演重要角色。并且,目前尚无相关研究报道mi R-377在AS发生发展过程中的作用。DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferases 1,DNMT1)属于DNMTs家族。作为最重要的DNA甲基转移酶,DNMT1在DNA复制后把这种甲基化状态传递给子代细胞,具有维持甲基化状态的作用。过表达DNMT1能诱导巨噬细胞内炎症因子生成,进而促AS发生发展。最近,有研究报道,DNMT1与血浆TG水平上升密切相关,但其具体分子机制未明。糖基化磷脂酰肌醇锚定高密度脂蛋白结合蛋白1(glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein binding protein 1,GPIHBP1)转运并结合脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)至血管腔面,脂解血浆中富含甘油三酯脂蛋白(triglyceride rich lipoprotein,TRLs),如乳糜微粒(chylomicrons,CM)、极低密度脂蛋白(very low-density lipoprotein,VLDL),降低血浆TG水平,发挥抗AS作用。因此,本研究主要探讨的是mi R-377调节TG代谢与动脉粥样硬化的分子机制。我们的研究结果表明,mi R-377通过沉默DNMT1抑制GPIHBP1启动子DNA甲基化,上调GPIHBP1表达,增加内皮细胞表面GPIHBP1与LPL结合量,降低血浆TG水平,抑制apo E-/-小鼠AS发展。这表明mi R-377可能作为防治动脉粥样硬化新的干预途径和治疗新靶点。[方法]:收集和整理冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease,CHD)患者临床数据资料,分为冠心病合并高脂血症和冠心病无高脂血症两组。采用RT-q PCR法检测血浆中多种脂质相关micro rnas m rna水平,分析出mi R-377低表达与血浆高TG水平相关。在此基础上,进一步采用Micro rna靶标预测网站和数据库比对不同物种mi R-377序列、保守性及靶点基因,并分析mi R-377与潜在靶点DNMT1结合位点及结合自由能评分等。采用荧光素酶报告基因检测法分别验证mi R-377与DNMT1、mi R-377与GPIHBP1、mi R-377与LPL之间的结合情况;培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),采用腺病毒载体分别转染不同浓度(0,10,20,40,80 n M)mi R-377 mimic和mi R-377inhibitor或转染不同时间(0,6,12,24,48 h),采用DNA甲基转移酶-1活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒检测mi R-377对细胞中DNMT1活性的影响;通过RT-q PCR法检测DNMT1 m rna水平,Western blot检测DNMT1蛋白水平。采用生物信息学方法并利用NCBI数据库、cpgislands在线网站分析GPIHBP1启动子区Cp G岛及Cp G岛内CG位点序列;腺病毒载体分别转染DNMT1或sh DNMT1,或用DNMT1抑制剂5-氮杂-2’脱氧胞苷(5-Aza-Cd R)处理细胞,亚硫酸盐测序检测GPIHBP1基因启动子DNA甲基化水平,RT-q PCR、Western blot分别检测GPIHBP1 m rna、蛋白表达水平;利用腺病毒载体分别转染mi R-377 mimic、DNMT1、mi R-377 mimic+DNMT1和mi R-377 inhibitor+sh DNMT1后,亚硫酸盐测序检测GPIHBP1启动子DNA甲基化水平,RT-q PCR、Western blot分别检测GPIHBP1m rna、蛋白表达水平;采用GPIHBP1与LPL结合试验检测GPIHBP1与LPL结合量。雄性8周龄a

关键词：微小rna-377 DNA甲基化转移酶1 糖基化磷脂酰基醇锚定高密度脂蛋白结合蛋白1 脂蛋白脂酶动脉粥样硬化

miR-377和FNBP1 mrna在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义

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疑难病杂志 2021年第11期20卷 1095-1099页

作者：王欣如张丽肖太武李强杜卉高磊山东省聊城市人民医院血液科 252000

目的检测弥漫大B细胞淋巴瘤组织中微小rna-377(miR-377)和形成素结合蛋白1(FNBP1)信使核糖核酸(mrna)表达及其在发病过程中的作用及临床意义。方法选取2015年2月—2018年3月聊城市人民医院血液科确诊的弥漫大B细胞淋巴瘤患者130例为观察... 详细信息

目的检测弥漫大B细胞淋巴瘤组织中微小rna-377(miR-377)和形成素结合蛋白1(FNBP1)信使核糖核酸(mrna)表达及其在发病过程中的作用及临床意义。方法选取2015年2月—2018年3月聊城市人民医院血液科确诊的弥漫大B细胞淋巴瘤患者130例为观察组,同期选取在医院就诊的淋巴结反应性增生患者55例为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测弥漫大B细胞淋巴瘤组织和淋巴结反应性增生组织中miR-377、FNBP1 mrna表达水平;分析二者之间的相关性及与患者临床病理参数之间的关系;使用Kaplan-Meier曲线分析弥漫大B细胞淋巴瘤患者3年总生存率;Cox回归模型分析影响弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后的因素。结果观察组miR-377表达水平显著低于对照组,FNBP1 mrna表达水平显著高于对照组(t/P=7.366/0.000、14.162/0.000)。miR-377低表达亚组临床Ⅲ~Ⅳ期、病理非生发中心型、有全身症状患者比例明显高于miR-377高表达亚组(χ^(2)/P=6.660/0.010、5.004/0.025、6.635/0.010),FNBP1 mrna低表达亚组临床Ⅲ~Ⅳ期、病理非生发中心型、有全身症状患者比例明显低于FNBP1 mrna高表达亚组(χ^(2)/P=9.076/0.003、18.593/0.000、10.916/0.001)。miR-377与FNBP1 mrna表达水平呈负相关(r/P=-0.355/0.000)。治疗后3年总生存率比较,miR-377高表达亚组高于miR-377低表达亚组,FNBP1 mrna高表达亚组低于FNBP1 mrna低表达亚组(χ^(2)/P=4.964/0.026、4.550/0.033)。miR-377低表达、FNBP1 mrna高表达、临床分期Ⅲ~Ⅳ期是影响弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后的独立危险因素[OR(95%CI)=2.001(1.412~2.836)、1.855(1.278~2.692)、1.594(1.136~2.237)]。结论弥漫大B细胞淋巴瘤组织中miR-377表达明显降低,FNBP1 mrna表达明显升高,且其表达与患者预后密切相关,miR-377和FNBP1 mrna可作为弥漫大B细胞淋巴瘤病情评估及不良预后预测的潜在生物学指标。

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤微小rna-377 形成素结合蛋白1 预后相关性

miR-377过表达对胶质母细胞瘤细胞增殖、凋亡、迁移的影响及机制

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山东医药 2019年第13期59卷 39-42页

作者：朱洁于辉张磊中国人民武装警察部队特色医学中心天津300162

目的探讨微小rna-377(mirna-377)过表达对胶质母细胞瘤细胞增殖、凋亡、迁移的影响,并探讨其作用机制。方法常规培养胶质母细胞瘤细胞系A172、U373、U87、U251及正常脑胶质细胞系HEB。用qRTPCR法检测细胞中miR-377的表达。将U251细胞随... 详细信息

目的探讨微小rna-377(mirna-377)过表达对胶质母细胞瘤细胞增殖、凋亡、迁移的影响,并探讨其作用机制。方法常规培养胶质母细胞瘤细胞系A172、U373、U87、U251及正常脑胶质细胞系HEB。用qRTPCR法检测细胞中miR-377的表达。将U251细胞随机分为miR-377组、miR-CON组及Blank组,分别转染miR-377mimics、Scramble及空白对照,用qRT-PCR法检测转染效率。用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术测定细胞凋亡能力,用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。用Western blotting法检测细胞内组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)和E26转录因子1(ETS-1)蛋白表达。结果转染24 h,miR-377组miR-377相对表达量高于miR-CON组、Blank组(P均377组细胞增殖能力低(P均377组HDAC9、ETS-1蛋白相对表达量均低于miRCON组、Blank组(P均377过表达可抑制胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移,并促进其凋亡,其机制可能与下调HDAC9、ETS-1蛋白表达有关。

关键词：胶质母细胞瘤微小rna-377 细胞增殖细胞凋亡细胞迁移组蛋白去乙酰化酶9 E26转录因子1