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下调微小rna-146b表达对甲状腺癌细胞增殖与凋亡的影响

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中华实验外科杂志 2019年第4期36卷 626-628页

作者：曲鑫邸旭王佳鑫张海超李彩霞天津市第四中心医院乳腺甲状腺外科 300143 北京肿瘤医院头颈部肿瘤外科 100142

目的探讨下调微小rna(mirna,miR)-146b表达对甲状腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法应用Lipofectamine^TM 3000将miR-146b inhibitor、miR-146b NC转染到甲状腺癌细胞SW579,并测定miR-146b表达量,细胞活力,细胞凋亡,细胞周期及b细胞淋巴瘤... 详细信息

目的探讨下调微小rna(mirna,miR)-146b表达对甲状腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法应用Lipofectamine^TM 3000将miR-146b inhibitor、miR-146b NC转染到甲状腺癌细胞SW579,并测定miR-146b表达量,细胞活力,细胞凋亡,细胞周期及b细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax),细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达量及核转录因子-κb(NF-κb) p65磷酸化水平。结果miR-146b inhibitor组(0.38±0.05)miR-146b表达量低于miR-146b NC组(1.00±0.09)(P146b inhibitor组(0.36±0.04)细胞活力低于miR-146b NC组(0.59±0.06)(P146b inhibitor组细胞凋亡率(34.58±3.50)%高于miR-146b NC组(4.28±0.43)%(P146b inhibitor组细胞周期G1期(44.32±4.43)%长于miR-146b NC组(34.08±3.42)%(P146b inhibitor组中bcl-2、Cyclin D1、CDK4蛋白表达量及NF-κb p65磷酸化水平低于miR-146b NC组(P146b inhibitor组中bax表达量高于miR-146b NC组(P146b可能通过阻断NF-κb信号通路抑制SW579甲状腺癌细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。

关键词：微小rna-146b 甲状腺癌增殖凋亡

重症急性脑梗死继发肺部感染患者mirna-146b和mirna-29a-3p与mirna-21水平及其预测价值

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中华医院感染学杂志 2024年第3期34卷 337-340页

作者：韩雅男孙向红郭银华龚晓莹中国医科大学附属盛京医院第二重症监护病房辽宁沈阳110000 中国医科大学附属盛京医院第一重症监护病房辽宁沈阳110000

目的探讨重症急性脑梗死继发肺部感染患者血清微小rna-146b(mirna-146b)、mirna-29a-3p和mirna-21及其预测价值.方法选取2021年4月-2023年1月中国医科大学附属盛京医院收治的重症急性脑梗死继发肺部感染患者69例,根据临床肺部感染评分... 详细信息

目的探讨重症急性脑梗死继发肺部感染患者血清微小rna-146b(mirna-146b)、mirna-29a-3p和mirna-21及其预测价值.方法选取2021年4月-2023年1月中国医科大学附属盛京医院收治的重症急性脑梗死继发肺部感染患者69例,根据临床肺部感染评分分为轻度组36例、中度组26例和重度组7例,同期选择单纯重症急性脑梗死患者60例为未感染组,检测全部患者血清中mirna-146b、mirna-29a-3p和mirna-21,评估以上指标对继发肺部感染的诊断价值.结果感染组血清mirna-146b、mirna-29a-3p和mirna-21均高于未感染组(Prna-146b、mirna-29a-3p和mirna-21高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组(Prna-146b诊断重症脑梗死并发肺部感染的价值最高,其次为mirna-21、mirna-29a-3p;三项指标联合检测可明显提高诊断肺部感染的价值.结论血清mirna-146b、mirna-29a-3p和miR-NA-21水平与急性脑梗死继发肺部感染的程度呈正相关,联合检测对疾病的早期诊断和治疗有一定的临床价值.

关键词：重症急性脑梗死肺部感染微小rna-146b 微小rna-29a-3p 微小rna-21 预测价值

慢性心力衰竭并发肺部感染患者外周血miR-183与miR-21-3p和miR-146b的变化及意义

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中华医院感染学杂志 2021年第19期31卷 2993-2997页

作者：王晓明杨鹏伟汪玲谢力民李楠王记培河南省胸科医院心血管内科河南郑州450008 河南省胸科医院检验科河南郑州450008

目的分析慢性心力衰竭(CHF)并发肺部感染患者外周血微小rna-183(miR-183)、miR-21-3p、miR-146b水平变化及意义。方法选择2019年1-12月河南省胸科医院收治的CHF患者为研究对象。按是否发生肺部感染分为CHF组(n=114)、CHF并发肺部感染组(... 详细信息

目的分析慢性心力衰竭(CHF)并发肺部感染患者外周血微小rna-183(miR-183)、miR-21-3p、miR-146b水平变化及意义。方法选择2019年1-12月河南省胸科医院收治的CHF患者为研究对象。按是否发生肺部感染分为CHF组(n=114)、CHF并发肺部感染组(n=46),另按性别、年龄匹配原则选取同期于医院接受健康体检的健康志愿者30名作为对照组;分析CHF并发肺部感染患者检出病原菌情况,并比较三组外周血miR-183、miR-21-3p、miR-146b水平,比较不同肺部感染严重程度的CHF患者外周血miR-183、miR-21-3p、miR-146b水平;Logistic逐步回归分析外周血miR-183、miR-21-3p、miR-146b与CHF并发肺部感染的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血miR-183、miR-21-3p、miR-146b及平行试验、序列试验对CHF并发肺部感染的预测价值。结果46例CHF并发肺部感染患者共培养分离病原菌79株,主要致病菌为肺炎克雷伯菌(21.52%)、铜绿假单胞菌(17.72%);CHF、CHF并发肺部感染组患者外周血miR-183、miR-21-3p、miR-146b均高于对照组(P146b均高于CHF组(P146b上升(P146b与白细胞介素-6(IL-6)是CHF患者并发肺部感染的影响因素(P146b的曲线下面积值(AUC)高于单一miR-183、miR-21-3p预测及平行试验、序列试验预测(AUC:0.795、0.756、0.626、0.741、0.576),以6.21为miR-146bcut-off,敏感度、特异性分别为52.17%、96.49%。结论外周血miR-183、miR-21-3p、miR-146b在CHF并发肺部患者中呈高表达,且随肺部感染程度加重而上升,miR-146b可作为预测CHF并发肺部感染的特异性指标。

关键词：慢性心力衰竭肺部感染微小rna-183 微小rna-21-3p 微小rna-146b

IL-6-STAT3-microrna146b信号通路在动脉血栓性疾病中的作用研究

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IL-6-STAT3-microRNA146b信号通路在动脉血栓性疾病中的作用研究

作者：赵洪宇上海交通大学

学位级别：硕士

目的(1)比较动脉血栓患者和正常对照组外周血微小rna-146b(micro rna-146b,mi R-146b)、相关炎症因子的水平差异,分析信号转导与转录激活子3(Signal Transducers and Activators of Transcription 3,STAT3)与其相关性,以更深入了解动脉血栓发生机制。(2)研究单核细胞IL-6-STAT3信号传导通路对COX-2(Cyclooxygenase-2)表达和单核-内皮细胞粘附性的影响。(3)探讨mi R-146b表达的调控及其对靶细胞功能的影响。方法(1)应用全自动血液分析仪对103例入选者进行血常规检测;全自动生化分析仪测定血脂、肝肾功能、血糖等指标。(2)采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PbMCs);免疫蛋白印迹(Western blot)法检测磷酸化STAT3(phosphorylated STAT3,p-STAT3)蛋白水平;实时荧光定量聚合酶链反应(Real Time-q PCR)法检测mi R-146b表达量。(3)采用酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)法检测动脉血栓组和正常对组血浆白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-a(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)和白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)及COX-2的水平。(4)体外培养人单核细胞株(THP-1)、人主动脉内皮细胞株(HAECs),采用慢病毒感染法建立高表达和低表达mi R-146b单核细胞系,Real Time-q PCR检测THP-1细胞COX-2 m rna的表达,Western blot检测COX-2和p-STAT3蛋白含量;荧光显微镜下细胞计数法检测慢病毒感染后单核-内皮细胞粘附性的变化。结果(1)与正常对照组相比,动脉血栓患者血浆IL-6、TNF-a、IL-1β及COX-2水平均较对照组显著增加;PbMC中STAT3蛋白磷酸化水平显著上调(P146b表达水平较正常对照组下降(Prna及蛋白水平,且具有时效性;同时,单核细胞向内皮细胞的粘附明显增加。应用STAT3磷酸化及二聚体化特异性抑制剂S3I-201预处理THP-1细胞后,COX-2 m rna、蛋白的表达量显著下降(P146b表达量在IL-6刺激后显著增加(P146b组THP-1细胞COX-2 m rna/蛋白表达量均明显下降,内皮细胞上粘附的单核细胞数减少(P均146b组细胞COX-2水平及单核细胞粘附数均显著增加(P146b的表达水平显著下降,提示动脉血栓形成中存在IL-6-STAT3信号通路,mi R-146b与动脉血栓性疾病的发生相关,有望作为一个生物标志物用于血栓性疾病的预防和治疗。(2)IL-6能够引起STAT3磷酸化,上调单核细胞COX-2表达、促进单核细胞向血管内皮细胞的粘附,表明炎症在血栓性疾病的的形成中起重要作用。(3)在不同mi R-146b表达水平的单核细胞中,COX-2 m rna、蛋白表达及血管内皮细胞粘附的单核细胞数出现明显变化,呈现出负性相关现象,提示mi R-146b在动脉血栓的形成过程中可能起负性调控作用。

关键词：动脉血栓形成白介素-6 STAT3 微小rna-146b 环氧化酶-2 单核-内皮细胞粘附

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作者：邢子禾江苏大学

学位级别：硕士

目的前期研究结果显示顺铂诱导的肾损伤大鼠模型中miR-146b表达上调,而间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植后下调,提示MSC能降低miR-146b表达而对顺铂诱导的急性肾损伤起保护、修复作用。结合临床肾病患者血清miR-146b较健康... 详细信息

目的前期研究结果显示顺铂诱导的肾损伤大鼠模型中miR-146b表达上调,而间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植后下调,提示MSC能降低miR-146b表达而对顺铂诱导的急性肾损伤起保护、修复作用。结合临床肾病患者血清miR-146b较健康人表达明显上升,预测miR-146b可能成为肾损伤的早期分子标志物之一。在此基础上,本课题构建了人脐带间充质干细胞来源的外泌体(exosomes derived from human umbilical cord mesenchymal stem cell,hucMSC-exosomes)介导的小鼠脓毒症相关急性肾损伤修复模型,揭示miR-146b在脓毒症相关急性肾损伤中的作用及机制,并检测临床不同病因导致的急性肾损伤患者AKI早期血清miR-146b水平,以评估其作为AKI早期诊断标志物的应用价值。方法盲肠结扎穿刺术法构建小鼠脓毒症相关急性肾损伤模型(CLP模型),以假手术组(Sham组)为对照组,修复组(hucMSC-exosomes组)术后腹腔注射hucMSC-exosomes,损伤组(CLP组)术后腹腔注射等量PbS。收集术后Oh、24h各组小鼠的血清标本及24h各组小鼠的肾脏标本,结合小鼠症状表现及肾功能(血清肌酐、尿素氮)变化、组织病理学结果验证造模成功。PCNA免疫组织化学染色检测各组肾组织细胞增殖能力,Western blot分析增殖凋亡相关蛋白Caspase 3的表达,综合判断hucMSC-exosomes对脓毒症相关急性肾损伤的损伤肾组织的保护及修复作用。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组肾组织中miR-146b的表达水平,探讨脓毒症相关急性肾损伤中miR-146b的反应性。结合大量文献资料,预测miR-146b在hucMSC-exosomes介导的小鼠脓毒症相关急性肾损伤修复中作用的靶基因IRAK1和TRAF6,qRT-PCR检测模型中各组肾组织中IRAK1和TRAF6及下游NF-κb通路相关蛋白的表达水平,初步揭示miR-146b在hucMSC-exosomes介导的小鼠脓毒症相关急性肾损伤修复中的作用机制。针对不同临床病因导致的急性肾损伤患者的血清标本进行分类预收集,Taq-man qRT-PCR检测确诊AKI患者明确诊断前至少3天的血清中miR-146b及血清肌酐、尿素氮的表达水平,评估miR-146b在临床早期诊断AKI中的应用价值。结果模型中各组的血清肌酐和尿素氮水平及肾组织切片HE染色结果表明,利用CLP法可成功构建小鼠脓毒症相关急性肾损伤模型,PCNA免疫组织化学染色及Western blot结果显示hucMSC-exosomes能刺激损伤的肾组织细胞增殖再生,并减弱受损肾组织细胞的凋亡。此外,miR-146b在脓毒症相关的急性肾损伤的损伤肾组织较正常组织中的表达无明显变化,而在经hucMSC-exosomes修复后的肾组织中表达明显上调(P146b的变化反向一致。Western blot显示了与qRT-PCR同样的结果。免疫组化染色结果显示损伤组NF-κb抑制蛋白αIKbα(IKbα)、磷酸化NF-κb抑制蛋白α(pIKbα)、NF-κb蛋白p65和p-p65(磷酸化NF-κb蛋白p65)一致表达升高,修复时IKbcα表达进一步升高而pIKbα、p65和p-p65表达有所回降。qRT-PCR结果表明TNF-α和IL-1p的mrna表达水平在损伤组表达显著升高而在修复组有所下降但仍高于假手术组(P

关键词：微小rna-146b 脓毒症相关急性肾损伤人脐带间充质干细胞来源的外泌体盲肠结扎穿刺术模型实时荧光定量聚合酶链式反应 NF-κb通路

miR-146b和Her-1在胃癌组织中的表达及临床意义

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miR-146b和Her-1在胃癌组织中的表达及临床意义

作者：陶嘉楠青海大学

学位级别：硕士

目的:研究微小rna-146b(micro rna-146b,miR-146b)和人表皮生长因子受体-1(human epidermal growth factor receptor-1,Her-1)在胃癌组织中的表达水平及两者表达水平的相关性,并分别研究两者表达水平与临床病理特征之间的关系,为探究胃... 详细信息

目的:研究微小rna-146b(micro rna-146b,miR-146b)和人表皮生长因子受体-1(human epidermal growth factor receptor-1,Her-1)在胃癌组织中的表达水平及两者表达水平的相关性,并分别研究两者表达水平与临床病理特征之间的关系,为探究胃癌的发生机制与分子靶向治疗提供一些依据。方法:收集胃镜及病理活检后首次确诊为胃癌,并且病例资料完整的患者40例,取胃癌组织及配对癌旁组织。采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)技术测定胃癌组织及配对癌旁组织中的miR-146b相对表达量,采用免疫组织化学(IHC)技术测定胃癌及癌旁组织中Her-1的表达水平。最后总结实验数据,采用统计学方法分别研究这两者表达水平与临床病理特征的联系,以及胃癌组织中二者表达水平的相关性。结果:***-146b在胃癌组织中的相对表达量明显低于配对癌旁组织(P146b在胃癌组织中的相对表达量存在组内差异(P146b在胃癌组织中的相对表达量无组内差异(P>0.05);2.胃癌组织中Her-1的表达水平明显高于配对癌旁组织(P0.05);***秩相关分析表明,在胃癌组织中miR-146b相对表达量与Her-1表达水平存在负相关,相关系数(r)为-0.348,差异有统计学意义(P146b和Her-1在胃癌组织中的表达水平分别发生了下调和上调,且它们的表达水平和某些临床病理特征相关,提示两者可能参与了胃癌的发生发展;***-146b在胃癌中可能起着抑癌基因的作用,抑制胃癌的发生发展,Her-1在胃癌中可能促进胃癌的发生发展,这可能会对胃癌的诊断与分子靶向治疗提供一定临床依据;3.在胃癌组织中miR-146b和Her-1的表达呈负相关性,虽然暂时还不能确定两者相互作用的确切机制,但对研究胃癌的发生机制和靶向治疗具有一定意义。

关键词：微小rna-146b 人表皮生长因子受体-1 胃癌临床病理特征

血清miR-146b、ICAM-1与急性呼吸窘迫综合征患者疾病严重程度、预后的关系

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广西医学 2023年第10期45卷 1137-1142,1152页

作者：郦文捷潘永良黄晓敏顾俊南通大学附属医院呼吸与危重症医学科、南通大学医学院江苏省南通市226001 南通大学附属丹阳医院老年科江苏省丹阳市212300

目的探讨血清miR-146b、细胞间黏附分子1(ICAM-1)与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者疾病严重程度、预后的关系。方法收集186例ARDS患者的基线资料、生化指标[氧合指数、血管外肺水指数(EVLWI)、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、白细胞介... 详细信息

目的探讨血清miR-146b、细胞间黏附分子1(ICAM-1)与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者疾病严重程度、预后的关系。方法收集186例ARDS患者的基线资料、生化指标[氧合指数、血管外肺水指数(EVLWI)、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、白细胞介素(IL)-6水平、IL-10水平]和血清miR-146b、ICAM-1水平。根据疾病严重程度将患者分为轻度组(n=45)、中度组(n=58)、重度组(n=83),并根据治疗28 d后的预后情况将患者分为死亡组(n=52)和存活组(n=134)。比较不同分组患者的上述指标。采用Pearson相关分析法分析186例ARDS患者血清miR-146b、ICAM-1水平与氧合指数和炎症因子水平的相关性。采用多因素Logistic回归模型分析ARDS患者预后不良的影响因素。利用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-146b、ICAM-1水平对ARDS患者预后不良的预测价值。结果轻度组、中度组、重度组患者的血清miR-146b、IL-10水平依次降低,血清ICAM-1、TNF-α、IL-6水平依次升高(均P146b水平与氧合指数、血清IL-10水平呈正相关,与血清ICAM-1、TNF-α、IL-6水平呈负相关(均P146b、IL-10水平降低,EVLWI和血清TNF-α、IL-6、ICAM-1水平升高(均P146b水平升高是其独立保护因素(均P146b、ICAM-1水平预测ARDS患者预后不良的曲线下面积分别为0.802、0.811。结论miR-146b、ICAM-1可能通过调控炎症反应参与ARDS的发生和发展,与ARDS患者的疾病严重程度和预后有关,可作为患者预后不良的预测指标。

关键词：急性呼吸窘迫综合征微小rna-146b 细胞间黏附分子1 预后预测

MiR-146b通过靶向TRAF6减轻狼疮性肾炎肾小球系膜细胞的损伤

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临床与病理杂志 2022年第7期42卷 1513-1519页

作者：林梅宋丹黄月桂中国科学院大学深圳医院(光明)肾内科广东深圳518000

目的:研究微rna-146b(microrna-146b,miR-146b)对狼疮性肾炎小鼠肾小球系膜细胞增殖、炎症因子分泌以及细胞周期的影响及其潜在机制。方法:采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-146b和肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor r... 详细信息

目的:研究微rna-146b(microrna-146b,miR-146b)对狼疮性肾炎小鼠肾小球系膜细胞增殖、炎症因子分泌以及细胞周期的影响及其潜在机制。方法:采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-146b和肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的靶向关系;实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测TRAF6蛋白的表达水平;将肾小球系膜细胞分为miR-control组(转染miR-146b模拟物阴性对照)、miR-146b mimic组(转染miR-146b模拟物)、miR-146b mimic+NC组(共转染miR-146b模拟物和空载质粒pcDNA-NC)和miR-146b mimic+TRAF6组(共转染miR-146b模拟物和TRAF6过表达质粒);采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和免疫荧光染色法检测细胞增殖;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中炎症因子的水平;流式细胞术分析细胞周期。结果:MiR-146b靶向结合TRAF6并负调控TRAF6的表达。与miR-control组比较,miR-146b mimic组细胞的增殖能力显著减弱,细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平降低,细胞发生G_(0)/G_(1)期阻滞;过表达TRAF6显著逆转了miR-146b对肾小球系膜细胞增殖和炎症因子分泌的抑制作用,减少G_(0)/G_(1)期细胞占比,促使细胞进入S期。结论:MiR-146b可能通过靶向TRAF6减轻狼疮性肾炎肾系膜细胞的炎性损伤。

关键词：狼疮性肾炎肾小球系膜细胞微小rna-146b 肿瘤坏死因子受体相关因子6

Micro146b在甲状腺乳头状癌中的表达及其对甲状腺乳头状癌侵袭迁移的影响

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临床与病理杂志 2019年第11期39卷 2380-2386页

作者：龚麒麟叶钦刘辉福建省肿瘤医院福建医科大学附属肿瘤医院头颈外科

目的:探讨miR-146b在甲状腺乳头状癌中的表达及其对甲状腺乳头状癌侵袭转移的影响。方法:体外培养人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞并转染miR-146b,分为4组:miR-146b抑制组及抑制对照组、miR-146b转染组及转染对照组。分别通过qRT-PCR检测miR-... 详细信息

目的:探讨miR-146b在甲状腺乳头状癌中的表达及其对甲状腺乳头状癌侵袭转移的影响。方法:体外培养人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞并转染miR-146b,分为4组:miR-146b抑制组及抑制对照组、miR-146b转染组及转染对照组。分别通过qRT-PCR检测miR-146b的表达,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭能力,划痕法检测细胞的迁移能力。结果:MiR-146b在甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中高表达(P146b抑制组TPC-1细胞活力与抑制对照组相比显著降低(P146b转染组细胞活力与转染对照组相比显著提高(P146b后细胞的穿膜数明显减少(P146b后细胞的穿膜数明显增加(P146b抑制组的迁移距离与抑制对照组比显著扩大(P146b转染组的迁移距离与对照组比显著缩小(P146b的高表达。miR-146b的高表达可促进TPC-1细胞的增殖、侵袭及迁移。

关键词：微小rna-146b 甲状腺乳头状癌侵袭迁移