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微小rna-124在急性脊柱创伤所致急性脊髓损伤中的诊断价值

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中国全科医学 2017年第12期20卷 1506-1510页

作者：陈聚伍谢冕任佳孟宇郑州大学第一附属医院急诊医学部河南省郑州市450052

目的探讨微小rna-124(miR-124)对急性脊柱创伤所致急性脊髓损伤的诊断价值。方法选取2014年9月—2015年9月在郑州大学第一附属医院急诊入院的45例急性脊柱创伤患者,并按照脊髓损伤神经学分类国际标准中的美国脊髓损伤协会残损分级(AISA... 详细信息

目的探讨微小rna-124(miR-124)对急性脊柱创伤所致急性脊髓损伤的诊断价值。方法选取2014年9月—2015年9月在郑州大学第一附属医院急诊入院的45例急性脊柱创伤患者,并按照脊髓损伤神经学分类国际标准中的美国脊髓损伤协会残损分级(AISA分级)将患者分为脊髓完全损伤组(AISA分级A级)15例、脊髓不完全损伤组(AISA分级B、C、D级)15例、神经功能正常组(AISA分级E级)15例,另选取同期入院的急性四肢创伤患者15例为对照组。抽取各组患者创伤后24 h内外周静脉血并对其血浆miR-124水平及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平进行测定。结果各组间miR-124、TNF-α水平比较,差异有统计学意义(P124、TNF-α水平均高于神经功能正常组与对照组(P124、TNF-α诊断急性脊髓损伤的受试者工作特征(ROC)曲线下面积分别为0.948[95%CI(0.890,1.000)]、0.770[95%CI(0.641,0.879)]。结论 miR-124诊断急性脊髓损伤的特异度要优于TNF-α,今后可将miR-124作为诊断急性脊柱创伤后急性脊髓损伤的潜在检测标志物。

关键词：脊柱损伤脊髓损伤诊断肿瘤坏死因子-α 微小rna-124 miR - 124

微小rna-124靶向调控丙酮酸激酶同工酶2对喉癌Hep-2细胞增殖与迁移及侵袭的影响

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中国临床药理学杂志 2021年第17期37卷 2270-2273页

作者：谢荣盛陈勇邹佛明梁业江西新钢中心医院肿瘤科江西新余338000

目的观察微小rna-124(miR-124)靶向调控肌肉丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,并探讨其作用机制。方法将Hep-2喉癌细胞分为3组:空白组、mimics组和抑制组。将miR-124类似物(miR-124 mimics)转染到mim... 详细信息

目的观察微小rna-124(miR-124)靶向调控肌肉丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,并探讨其作用机制。方法将Hep-2喉癌细胞分为3组:空白组、mimics组和抑制组。将miR-124类似物(miR-124 mimics)转染到mimics组细胞中,miR-124抑制物转染至抑制组,空白组不做任何干预。其中转染对应DNA均为0.2μg,室温孵育5 min。用双荧光素酶活性检测验证miR-124与PKM2靶向关系;用荧光定量PCR检测细胞miR-124的表达;用蛋白质印迹法检测PKM2蛋白的表达;用CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测细胞增殖水平(OD值)、迁移和侵袭能力(转染细胞穿过基质膜至下室的细胞数目)。结果与野生型PKM2的3’UTR(PKM2-WT)与miR-124-NC共转染的Hep-2细胞比较,PKM2-WT与miR-124 mimics共转染的Hep-2细胞的荧光酶活性分别为0.97±0.01,0.43±0.05。空白组、mimics组和抑制组的miR-124相对表达量为0.20±0.03,0.43±0.05和0.07±0.02;PKM2蛋白的相对表达量为0.44±0.06,0.19±0.04和0.55±0.04;在12 h的增殖水平分别为0.21±0.04,0.18±0.04和0.26±0.04;在24 h的细胞迁移能力分别为0.37±0.04,0.13±0.03和0.44±0.04;侵袭能力分别为(132±5),(98±5)和(154±6)个。上述指标:与PKM2-WT共转染的miR-124-NC与miR-124 mimics比较差异有统计学意义(P124的表达能够影响喉癌Hep-2细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能是miR-124靶向调控PKM2实现。

关键词：微小rna-124 肌肉丙酮酸激酶同工酶2 喉癌Hep-2细胞增殖迁移侵袭

微小rna-124对肾癌细胞的自噬和增强顺铂敏感性的影响

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中国临床药理学杂志 2021年第20期37卷 2766-2769页

作者：江典存李晓治倪良诚黄玉钿谢辉任新福州市第一医院泌尿外科福建福州350009 福州市第一医院病理科福建福州350009

目的探讨微小rna-124(miR-124)在肾癌细胞自噬和顺铂耐药中可能的作用靶点。方法以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测34例肾癌组织和癌旁组织,人肾小管上皮细胞HK-2以及4种人肾癌细胞A498、SN12C、RXF393、769P中miR-124... 详细信息

目的探讨微小rna-124(miR-124)在肾癌细胞自噬和顺铂耐药中可能的作用靶点。方法以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测34例肾癌组织和癌旁组织,人肾小管上皮细胞HK-2以及4种人肾癌细胞A498、SN12C、RXF393、769P中miR-124表达。以蛋白质印迹法检测用30μg·mL^(-1)顺铂处理对肾癌细胞A498自噬相关蛋白LC3表达的影响。将A498肾癌细胞分为4组:对照组、顺铂组、第1转染组(DMSO+miR-124)、第2转染组(顺铂+miR-124组),在转染组细胞中添加miR-124 mimics。以细胞计数试剂盒8(CCK8)检测过表达miR-124对顺铂半数致死量(IC50)的影响。以荧光素酶报告实验和蛋白质印迹法验证miR-124对组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)的靶向调控作用。结果肾癌组织和癌旁组织miR-124表达分别为0.48±0.21和1.56±0.46,差异有统计学意义(P124表达分别为1.09±0.23,0.38±0.08,0.46±0.10,0.58±0.09,0.44±0.12,差异有统计学意义(P124的靶基因,荧光素酶报告实验显示,miR-124过表达可以降低野生型HDAC43'UTR荧光强度(P0.05)。对照组、顺铂组、第1转染组、第2转染组HDAC4蛋白表达分别为0.48±0.08,0.96±0.11,0.22±0.07,0.21±0.08,第1转染组、第2转染组分别与顺铂组比较,差异均有统计学意义(均P124表达降低,顺铂化疗可以诱导肾癌细胞自噬,而过表达miR-124可以降低肾癌细胞自噬,增强顺铂敏感性,其作用的靶标可能为HDAC4。

关键词：微小rna-124 组蛋白去乙酰化酶4 肾癌自噬顺铂

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微小rna-124及其相关疾病研究进展

国际药学研究杂志 2013年第5期40卷 541-544,549页

作者：陈焱汪军复旦大学基础医学院中西医结合系针刺原理研究所上海200032

微小rna(microrna,mirna)是内源性单链非编码rna,通过与靶基因互补结合产生转录后沉默的作用。近年来,mirna-124(miR-124)作为中枢神经系统中含量最丰富的mirna受到普遍关注。miR-124的作用复杂,合成过程中受多种因子的调控,成熟的miR-... 详细信息

微小rna(microrna,mirna)是内源性单链非编码rna,通过与靶基因互补结合产生转录后沉默的作用。近年来,mirna-124(miR-124)作为中枢神经系统中含量最丰富的mirna受到普遍关注。miR-124的作用复杂,合成过程中受多种因子的调控,成熟的miR-124可调节数百种靶基因的表达,对神经元的发育、小胶质细胞的激活都有着重要作用。也有研究表明,多种肿瘤的发生与miR-124表达的异常有关。本文介绍了miR-124的研究现状,主要包括其合成、靶基因、生物学作用及在疾病发生中的作用。

关键词：微小rna-124 中枢神经系统肿瘤神经系统疾病

微小rna-124调控靶基因IQ结构域三磷酸鸟苷合酶-激活蛋白1的表达抑制甲状腺乳头状癌细胞生长、侵袭、转移的研究

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中华实验外科杂志 2016年第1期33卷 79-83页

作者：王卓路夏发达冯铁诚彭瑶李新营湖南省妇幼保健院乳腺外科长沙410008 中南大学湘雅医院普外肝脏甲状腺外科长沙410008

目的检测微小rna（mirna，miR）-124在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中的表达，探讨miR-124在PTC发生发展、侵袭转移中的相关功能机制，验证IQ结构域三磷酸鸟苷合酶-激活蛋白1（IQGAP1）为miR-124的靶基因。方法收集手术切除并经病理检查... 详细信息

目的检测微小rna（mirna，miR）-124在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中的表达，探讨miR-124在PTC发生发展、侵袭转移中的相关功能机制，验证IQ结构域三磷酸鸟苷合酶-激活蛋白1（IQGAP1）为miR-124的靶基因。方法收集手术切除并经病理检查确诊的不同病理学背景的甲状腺组织。检测miR-124在上述组织中的表达。选取3个PTC细胞株及正常甲状腺细胞株检测miR-124的表达差异。将人类miR-124模拟物（Has—miR-124 mimics）转染入K1细胞，检测转染后miR-124的表达。同时检测下游靶基因IQGPAl的表达；噻唑蓝（MTr）法、划痕实验、Transwell法、流式细胞学检测细胞生物学活性变化。运用生物信息学预测IQGAPl为miR-124的可能的下游靶基因并用双荧光素酶报告基因系统验证。结果有转移PTC淋巴结转移灶中miR-124的相对表达量为1．120±0．104，低于转移PTC原发灶、无转移PTC、正常甲状腺组织中miR-124的表达量（P〈0．05）。PTC细胞株中miR-124的表达也较正常甲状腺细胞株明显降低（P〈0．05）。miR-124 mimics转染K1后检测证实miR-124被成功增强。K1细胞中miR-124表达增强后24～72h后活细胞数目明显少于对照组（P〈0．05）。迁徙能力为对照组的50％，侵袭能力为对照组的40％（P〈0．05）。细胞增殖指数降低，凋亡增加（P〈0．05）。用生物信息学方法预测IQGAPl为miR-124的可能靶基因。证实miR．124增强后IQGAP]的表达量有不同程度地降低。证实了IQGAPl为miR-124的下游靶基因。结论miR-124在PTC及PTC细胞株中低表达。miR-124表达增强后，K1细胞的迁徙侵袭、增殖能力降低，凋亡增加。生物信息学预测，IQGAP1为miR-124的靶基因。miR-124表达增强后，K1细胞中的IQGAP1表达降低。

关键词：甲状腺癌微小rna-124 IQ结构域三磷酸鸟苷合酶-激活蛋白1 双荧光素酶报告基因

微小rna-124促进氧糖剥夺/复糖复氧后脑微血管内皮细胞血管新生的研究

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中华老年心脑血管病杂志 2023年第12期25卷 1369-1373页

作者：彭影朱延梅朱雨岚哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科 150086 哈尔滨医科大学附属第二医院神经内科

目的探讨微小rna(miR)-124对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)后脑微血管内皮细胞(BMEC)血管新生的作用及相关机制。方法将小鼠BMEC随机分为6组,正常对照组(con组),OGD/R组,OGD/R+过表达对照组(OGD/R+ov-con组),OGD/R+miR-124过表达组(OGD/R+ov-miR-124组),OGD/R+沉默对照组(OGD/R+si-con组),OGD/R+miR-124沉默组(OGD/R+si-miR-124组)。比较各组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平、15脂氧化酶(15-LOX)mrna及蛋白表达水平。结果与con组比较,OGD/R组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量及miR-124水平降低(Prna及蛋白表达水平较con组显著升高(3.29±0.24vs1.00±0.00,4.31±0.39vs1.00±0.00,P124组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平明显升高,15-LOXmrna及蛋白表达水平降低(P124组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平降低,15-LOXmrna及蛋白表达水平升高(P124可能通过调控15-LOX水平促进OGD/R后BMEC血管新生,为缺血性脑卒中提供潜在治疗靶点。

关键词：循环微rna 内皮细胞微小rna-124 氧糖剥夺/复糖复氧

微小rna-124靶向信号传导与转录激活因子3抑制乳腺癌增殖和侵袭的机制

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中华实验外科杂志 2017年第12期34卷 2105-2108页

作者：张建祥李建华王芳谷元廷郑州大学第一附属医院普通外科 450052

目的观察微小rna（mirna，miR）-124及信号传导与转录激活因子3（STAT3）在乳腺癌组织的表达，探讨miR-124靶向STAT3抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测乳腺癌组织及癌旁组织miR-... 详细信息

目的观察微小rna（mirna，miR）-124及信号传导与转录激活因子3（STAT3）在乳腺癌组织的表达，探讨miR-124靶向STAT3抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测乳腺癌组织及癌旁组织miR-124的表达，并采用免疫组织化学法检测新鲜乳腺癌组织及癌旁组织中STAT3的表达，分析STAT3与miR-124表达的关系。分别采用miR-124类似物和anti-miR-124转染MDA-MB-231乳腺癌细胞，通过噻唑蓝（MTT）和Transwell侵袭实验检测乳腺癌细胞增殖、侵袭转移能力，采用Western blot法检测STAT3蛋白表达水平。结果乳腺癌组织和癌旁组织中STAT3表达阳性率和miR-124相对表达量分别为65.12%和1.26±0.28、12.79%和2.84±0.42，两组STAT3表达阳性率和miR-124相对表达量差异均有统计学意义（χ2＝49.510，P＝0.000；t＝29.027，P＝0.000）。转染anti-miR-124的MDA-MB-231细胞36 h时后的570 nm处吸光度（A570）值显著提高，转染miR-124类似物的MDA-MB-231细胞36 h时后的A570显著降低。未转染MDA-MB-231细胞、仅采用脂质体2000转染MDA-MB-231细胞、anti-miR-124转染细胞和miR-124类似物转染细胞侵袭细胞数分别为46、45、87、32个。miR-124类似物转染MDA-MB-231细胞后STAT3蛋白的表达水平低于未转染MDA-MB-231细胞和anti-miR-124转染MDA-MB-231细胞。结论miR-124能够靶向抑制STAT3进而调控乳腺癌细胞的增殖和侵袭。

关键词：乳腺癌微小rna-124 信号传导与转录激活因子3 增殖侵袭

微小rna-124在急性创伤性脊髓损伤诊治中的应用研究

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微小RNA-124在急性创伤性脊髓损伤诊治中的应用研究

作者：谢冕郑州大学

学位级别：硕士

背景脊髓损伤(英文全称为spinal cord injury,一般简写作SCI)是一类由各种致病因素导致脊髓组织受损,主要以躯体损伤平面以的下感觉、运动有限或全部功能障碍等为其临床表现,并且多伴随大小便失禁。它属于中枢神经系统损伤的范畴。构成... 详细信息

背景脊髓损伤(英文全称为spinal cord injury,一般简写作SCI)是一类由各种致病因素导致脊髓组织受损,主要以躯体损伤平面以的下感觉、运动有限或全部功能障碍等为其临床表现,并且多伴随大小便失禁。它属于中枢神经系统损伤的范畴。构成脊髓损伤的原因多种多样:临床上主要有相关病毒的感染,侵及脊髓的脓毒症,脊髓组织的良恶性占位性病变,机体其他的系统性病变导致的脊髓组织缺血缺氧或内环境紊乱等。但是临床上最多见的还是由于各种外力所导致的脊髓组织急性损伤。从解剖学上讲,脊髓组织位于坚固的骨性脊柱组织和坚韧且紧密联结的结缔组织层层包绕之中,而且处于躯干的中轴部位,平素难以受到外力的直接作用。唯有较高能量的外界暴力,通过破坏脊髓组织周围的骨性结构或者坚韧的韧带组织,才可能对脊髓组织本身造成有效的打击。近年来,随着交通运输事业的高速发展,以及以房地产业为首的建筑行业的长足进步,再加上安全驾驶、安全生产等安全意识淡薄,这些经济社会的深刻变化为急性创伤性脊髓损伤患者的增长提供了温床。过去一般认为无论何种原因造成的脊髓损伤,其过程都是不可逆的,也就是说脊髓组织很难恢复到损伤前的状态,这就造成了脊髓损伤患者极为痛苦的预后。其兼具直接的致残性和间接的致死性,缺乏最基础的生活质量,而且要极大的拖累患者的家庭,造成家庭成员生活质量的同步下降,相对于其他的创伤,将成倍的消耗社会资源。诚然,经过了现代医学一百余年的发展,针对脊髓损伤,尤其是创伤性脊髓损伤已经出现了各种各样的诊疗技术,但是其干预手段总是滞后的,在临床实践中,对于脊髓损伤的诊断,除主观性较强的体格检查外,要极端的依赖影像学,尤其是磁共振,神经电生理等的应用,人类第一次可以在术前了解到患者脊髓组织的损伤情况。古人云:尺有所短,寸有所长,磁共振及神经电生理检查本身具有很大的局限性,费时长,费用高,需要患者有较高的配合性,在中心性医院才能开展此项检查,大多机构并非24小时应诊,不能有效客观的识别脊髓组织的损伤程度,仅能进行范围性的概览等等。而现代比较成熟的治疗手段要求我们要进行早期的内外科干预。这就要求我们有一种获取便捷而准确的实验室客观指标,用于急性创伤性脊髓损伤的鉴别。脊髓组织的再生研究一直是创伤外科研究的前沿。在脊髓再生的研究中,对于脊髓损伤及修复的分子机制研究较多,尤其是对于脊髓的二次损伤,相关转导路径的研究如火如荼。微小rna(英文全称为Micro-ribonucleic-acid,一般简称为Micro rna或mirna)是一类大约由21-25个核苷酸组成的内源性表达的单链非编码小rna,它通过抑制靶信使rna(英文全称为Messenger-ribonucleic-acid,一般简称为m rna)翻译或促使其降解的方式对基因表达起调控作用。众多的相关分子中,micro rna-124在中枢神经组织中表达的特异性,大量的动物实验指向其作为阐释脊髓损伤及其修复过程的关键一环。目的本研究旨在通过收集急性创伤性脊髓损伤患者的相关临床数据及外周血中的相关分子检测,探讨微小rna-124在急性创伤性脊髓损伤诊治中的应用。方法选择2014年9月至2015年9月在郑州大学第一附属医院急诊入院且资料完整的急性脊柱骨折的患者45例,按照脊髓损伤神经学分类国际标准中的美国脊髓损伤协会残损分级(AIS分级)将患者分为脊髓完全性损伤组(AIS分级A级)15例,脊髓不完全性损伤组(AIS分级B、C、D级)15例,神经功能正常组(AIS分级E级)15例,另选取同期入院的急性四肢骨折患者15例为对照组。抽取各组患者伤后24小时外周血并对其血浆mirna-124水平及血清TNF-ɑ水平进行测定。统计学采用SPSS 21.0软件分析数据,连续性变量均进行正态性检验。符合正态分布的计量资料用均数±标准差(`x±s)表示,定性资料的多组间比较采用χ2检验;定量资料的多组间比较采用单因素方差分析。按照有无神经损伤重新分组(完全损伤组+不完全损伤组vs神经功能正常组+四肢骨折组),对外周血miR-124及TNF-ɑ两指标绘制受试者工作特征曲线(ROC),并计算曲线下面积(AUC);以P0.05)。2各组外周血miR-124的表达水平完全损伤组、不完全损伤组、神经功能正常组、四肢骨折组患者外周血miR-124表达水平分别为(0.48±0.06)、(0.47±0.07)、(0.39±0.07)、(0.34±0.04),各组间差异有统计学意义(F=27.28,P0.05)。完全损伤组、不完全损伤组的miR-124

关键词：脊柱骨折脊髓损伤微小rna-124 肿瘤坏死因子-ɑ

微小rna-124过表达促Tau病理变化对阿尔茨海默病的影响

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中国医师进修杂志 2020年第11期43卷 1021-1025页

作者：屠世欢梅刚谢威陈燕梅白树存青海省第三人民医院精神科西宁810007 南京脑科医院老年精神科 210029 江西省赣州市第三人民医院精神科 341000

目的:探讨微小rna(miR)-124表达促Tau病理变化对阿尔茨海默病(AD)的影响,以期为老年AD早发现早治疗提供新的靶点。方法:抽取2017年6月至2018年6月青海省第三人民医院50例AD患者的血清作为研究组样本和50例健康者的血清作为对照组样本,... 详细信息

目的:探讨微小rna(miR)-124表达促Tau病理变化对阿尔茨海默病(AD)的影响,以期为老年AD早发现早治疗提供新的靶点。方法:抽取2017年6月至2018年6月青海省第三人民医院50例AD患者的血清作为研究组样本和50例健康者的血清作为对照组样本,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)试验测定血清中miR-124 mrna表达;采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测Tau蛋白和磷酸化Tau(PTau)蛋白(S396、T181和T231)的表达水平;采用正电子发射断层显像检测Tau蛋白的病理改变。结果:研究组血清miR-124 mrna表达相较对照组极显著上调(6.91±0.41比5.11±0.37)(P124过表达和PTau(S396)高表达、PTau(T181)高表达及总Tau高表达指标呈正相关,且是其独立影响因素。结论:miR-124过表达可以促进总Tau蛋白表达和PTau蛋白表达,临床上表现为AD患者脑部Tau蛋白沉积,有望作为AD的前期生物分子诊断标志物。

关键词：阿尔茨海默症血清微小rna-124 Tau 病理变化