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透析与人工器官 2010年第4期21卷 16-21页

作者：梁广铁刘大渔王秋平雷秀霞周小棉广州市第一人民医院广州510180

振荡流pcr结合了静态pcr与连续流动式pcr的优点,包括表面抑制效应降低、热循环数灵活设定以及便于实现实时和高通量检测。此外,由于使用毛细管作为pcr反应器,可以有效降低分析成本。聚四氟乙烯毛细管具有化学性质稳定、耐高温和透明性... 详细信息

振荡流pcr结合了静态pcr与连续流动式pcr的优点,包括表面抑制效应降低、热循环数灵活设定以及便于实现实时和高通量检测。此外,由于使用毛细管作为pcr反应器,可以有效降低分析成本。聚四氟乙烯毛细管具有化学性质稳定、耐高温和透明性的特点,是理想的振荡流pcr反应载体。本实验搭建了一种毛细管振荡流pcr装置,利用聚四氟乙烯毛细管的疏水特性发展了振荡流液滴pcr方法。通过形成油包水液滴,不仅有效解决了反应中样品蒸发问题,同时也实现了对液滴运动的精确控制。通过优化液滴运动速度和反应组份可以在9min内完成114bp片段的扩增,其扩增产量与传统台式pcr仪相当。这种毛细管振荡流pcr系统具有快速、高效和低成本的特点和优势,有望以微全核酸分析系统的形式用于现场检测。

关键词：微流控微型化pcr 振荡流液滴

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毛细管液滴中的乙型肝炎病毒DNA提取与扩增

毛细管液滴中的乙型肝炎病毒DNA提取与扩增

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第四届广东省分析化学研讨会

作者：刘大渔梁广铁雷秀霞周小棉广州医学院附属广州市第一人民医院临床化学技术研究室

该文建立了一种基于液滴技术的毛细管DNA提取与扩增方法,利用聚四氟乙烯毛细管的疏水特性,向毛细管中先后引入油相和水相溶液,在表面张力作用下形成油包水液滴。顺序向毛细管中引入含有不同试样的液滴,完成进样、DNA结合、洗涤、洗脱以... 详细信息

该文建立了一种基于液滴技术的毛细管DNA提取与扩增方法,利用聚四氟乙烯毛细管的疏水特性,向毛细管中先后引入油相和水相溶液,在表面张力作用下形成油包水液滴。顺序向毛细管中引入含有不同试样的液滴,完成进样、DNA结合、洗涤、洗脱以及扩增等过程。微液滴不仅有效解决了样品的蒸发和扩散问题,同时在操作中起到微阀和微混合器的功能。利用上述毛细管液滴方法分析了乙型肝炎病毒的血清样品,通过优化DNA提取和扩增条件,毛细管液滴方法能在较短时间内高效纯化并扩增DNA。该法具有简便快速和低成本的优势,有望发展成一种有力的微全核酸分析系统。

关键词：微全核酸分析系统 DNA提取微型化pcr 液滴毛细管

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