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基于cAMP/PKA通路研究当归芍药散提取液对阿霉素诱导IMCD3细胞损伤的保护作用

中国药理学通报 2019年第12期35卷 1765-1770页

作者：欧美凤刘浩坤杨沫王运来许钒安徽中医药大学药学院中药复方安徽省重点实验室

目的观察当归芍药散(Danggui-Shaoyao-San,DSS)提取液对阿霉素(adramycin,ADR)诱导损伤的内髓集合管(inner medullary collecting duct cell,IMCD3)细胞Na^+,K^+-ATP酶、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)及水通道蛋白-2(aquaporin 2,AQP2)的影响,从水液平衡的角度探讨其相关的保护机制。方法以IMCD3细胞为研究对象,MTT法观察不同浓度ADR对IMCD3细胞增殖的影响;将细胞分为正常组、模型组、DSS提取液低、中、高剂量组(0.8、1.6、3.2 g·L^-1)、H-89抑制剂组;ELISA法检测细胞cAMP含量;试剂盒检测Na^+,K^+-ATP酶活性变化;Real-time PCR法检测PKA、CREB、水通道蛋白2(AQP2)mRNA表达;Western blot法检测Na^+,K^+-ATP酶、PKA、CREB、AQP2蛋白表达。结果ADR对IMCD3细胞的损伤最适浓度为1×10^-8 mol·L^-1;不同浓度的DSS提取液均可有效抑制ADR诱导IMCD3细胞损伤,提高Na^+,K^+-ATP酶活性及细胞上清cAMP含量(P提取液对ADR诱导IMCD3细胞损伤模型具有一定的保护作用,与提高Na+,K+-ATP酶活性、激活cAMP-PKA-CREB通路有关。

关键词：当归芍药散提取液 Na^+,K^+-ATP酶环磷酸腺苷蛋白激酶A 水通道蛋白2 IMCD3细胞

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