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当归多糖组分的高效液相色谱分析

中国药学杂志 2000年第5期35卷 332-335页

作者：商澎梅其炳曹之宪赵德化第四军医大学药理学教研室西安710032 香港大学医学院药理系

目的 :分析当归多糖AP Ⅰ ,AP Ⅱ ,AP Ⅲ ,AP Ⅳ各组分的重均相对分子质量分布及其电荷特性 ;探讨多糖类生物大分子的组效关系研究方法。方法 :采用高效凝胶过滤色谱法、阴离子交换色谱法、二极管阵列检测器进行检测 ;改良苯酚硫酸法... 详细信息

目的 :分析当归多糖AP Ⅰ ,AP Ⅱ ,AP Ⅲ ,AP Ⅳ各组分的重均相对分子质量分布及其电荷特性 ;探讨多糖类生物大分子的组效关系研究方法。方法 :采用高效凝胶过滤色谱法、阴离子交换色谱法、二极管阵列检测器进行检测 ;改良苯酚硫酸法测定糖分部 ;ServaBlue G染料结合法测定蛋白质分部。结果 :当归多糖AP Ⅰ ,AP Ⅱ ,AP Ⅲ ,AP Ⅳ分别由 4～ 5个具有不同重均相对分子质量分布及电荷特性的多糖组分组成 ;4种多糖中还分别含有一定量的游离或结合蛋白质。结论 :当归多糖AP Ⅰ ,AP Ⅱ ,AP Ⅲ ,AP Ⅳ为组成成分不同的多糖 ;该方法可为多糖组效关系研究提供简便、实用的分析方法。

关键词：当归多糖组效关系高效液相色谱法分子质量电

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当归多糖对M2型巨噬细胞分化和功能的影响

陆军军医大学学报 2024年第22期46卷 2505-2516页

作者：张珂崔昭秦雅含雷凡刘梅芳彭美玉山东第二医科大学基础医学院山东省高等学校免疫微环境与炎症性疾病研究特色实验室山东潍坊261053

目的探讨当归多糖(angelica polysaccharide,APS)对M2型巨噬细胞分化、功能的影响及其分子机制。方法诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM)和M2型巨噬细胞,加入APS处理(0、80、160、320μg/mL);分离小鼠腹... 详细信息

目的探讨当归多糖(angelica polysaccharide,APS)对M2型巨噬细胞分化、功能的影响及其分子机制。方法诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM)和M2型巨噬细胞,加入APS处理(0、80、160、320μg/mL);分离小鼠腹腔巨噬细胞,加入APS处理(0、160μg/mL)。流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测M2型巨噬细胞和腹腔巨噬细胞甘露糖受体(mannose receptor,MR)、CD11b、F4/80、CD163、ARG-1表达水平、凋亡情况以及吞噬能力。根据随机数字法将小鼠分为2组,即APS灌胃组(n=5)和对照组(n=5),FCM检测外周血和脾脏中巨噬细胞MR表达水平。荧光显微镜观察BMDM分化的M2型巨噬细胞形态;RT-qPCR检测M2型巨噬细胞MR、ARG-1的mRNA表达水平;免疫荧光检测M2型巨噬细胞分化和功能的分子机制。结果与0μg/mL APS组相比,在一定浓度(80~320μg/mL APS)范围内,随着APS浓度的升高,M2型巨噬细胞的MR表达水平降低(P<0.01);160μg/mL APS组腹腔巨噬细胞MR表达水平也降低(P<0.01)。与对照组相比,APS灌胃组小鼠外周血和脾脏中巨噬细胞MR的表达水平也明显下降(P<0.05)。与0μg/mL APS组相比,80~320μg/mL APS组巨噬细胞CD11b、F4/80、CD163表达水平升高(P<0.01);巨噬细胞形态发生变化,由大多呈梭形且有伪足变为大多为类圆形或不规则且少数细胞有伪足;APS可诱导M2型巨噬细胞凋亡(P<0.05)。与0μg/mL APS组相比,160μg/mL APS组M2型巨噬细胞吞噬荧光微球的能力升高(P<0.01),但ARG-1的表达水平降低(P<0.01);M2型巨噬细胞MR和ARG-1的mRNA表达降低(P<0.05);160μg/mL APS组M2型巨噬细胞的磷酸化的信号转导子和转录激活子6(phosphate acidified-signal transducers and activators of transcription 6,p-STAT6)阳性信号的平均荧光强度明显减低(P<0.05)。结论APS对M2型巨噬细胞的分化和功能均具有双向调控作用,这可能与APS可下调信号转导子和转录激活子6(signal transducers and activators of transcription 6,STAT6)信号通路相关。

关键词：当归多糖甘露糖受体 M2型巨噬细胞信号转导子和转录激活子6

阳极氧化铝纳米结构协同当归多糖对乳腺癌细胞生长的影响规律研究

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稀有金属材料与工程 2023年第11期52卷 3947-3953页

作者：张智颖梁瑞清陈俊霖梅晁源李娟孙润广陕西师范大学物理学与信息技术学院陕西西安710119

系统的研究了不同周期的纳米凹坑和纳米柱孔氧化铝膜表面直接修饰当归多糖(ASP)或通过γ-氨丙基三乙氧基硅烷(KH550)共价连接修饰ASP后,乳腺癌细胞MDA-MB-231在其表面生长的细胞形态和活性规律。结果发现,当归多糖直接修饰纳米凹坑和纳... 详细信息

系统的研究了不同周期的纳米凹坑和纳米柱孔氧化铝膜表面直接修饰当归多糖(ASP)或通过γ-氨丙基三乙氧基硅烷(KH550)共价连接修饰ASP后,乳腺癌细胞MDA-MB-231在其表面生长的细胞形态和活性规律。结果发现,当归多糖直接修饰纳米凹坑和纳米柱孔结构能够有效抑制乳腺癌细胞的活性,对细胞形态影响较小。但纳米凹坑结构的细胞活性抑制效果优于纳米柱孔结构,纳米凹坑在300 nm周期时具有最优的细胞活性抑制效果,抑制率为27.7%。用KH550共价修饰ASP的纳米凹坑和纳米柱孔结构对细胞活性的抑制效果要优于直接修饰ASP时的抑制效果,细胞形态也发生了明显的变化,胞体周围生成大量板状伪足。纳米凹坑结构上的细胞活性抑制效果要优于纳米柱孔结构,纳米凹坑在300 nm周期时抑制效果最佳,抑制率为28.2%。该结果对于药物的设计以及输运具有一定的指导作用。

关键词：阳极氧化铝当归多糖细胞形态细胞活性抗肿瘤

当归多糖对人白血病干细胞体外增殖与体内移植模型的影响

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解剖学报 2021年第1期52卷 41-48页

作者：邓方芳耿珊姜蓉汪子铃肖含先之齐嵘嘉黄彩虹曾娣李赓王璐王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的探讨当归多糖(ASP)对人白血病干细胞(LSCs)增殖及体内移植的影响。方法***对CD34^(+)CD38^(-)人LSCs体外增殖的影响。免疫磁性法分选正常人和髓系白血病患者骨髓中CD34^(+)CD38^(-)细胞,分为正常CD34^(+)CD38^(-)对照组、CD34^(+)CD... 详细信息

目的探讨当归多糖(ASP)对人白血病干细胞(LSCs)增殖及体内移植的影响。方法***对CD34^(+)CD38^(-)人LSCs体外增殖的影响。免疫磁性法分选正常人和髓系白血病患者骨髓中CD34^(+)CD38^(-)细胞,分为正常CD34^(+)CD38^(-)对照组、CD34^(+)CD38^(-)LSCs对照组、正常CD34^(+)CD38^(-)ASP组和CD34^(+)CD38^(-)LSCs ASP组,后两组在常规培养基础上加入ASP(终浓度40 mg/L)。流式细胞术检测CD34^(+)CD38^(-)细胞纯度;锥虫蓝染色检测细胞存活率;细胞计数试剂盒8(CCK-8)和混合集落形成单位(CFU-Mix)检测CD34^(+)CD38^(-)LSCs增殖分化能力;RT-PCR检测衰老相关基因表达水平。***对人LSCs移植小鼠模型的影响。体内移植LSCs建立CD34^(+)CD38^(-)LSCs小鼠移植模型,随机分为ASP移植模型组[腹腔注射ASP,200 mg/kg,(1次/d)×14 d]和移植模型组(注射等时、等量生理盐水)。药物注射完成第2天,计数白细胞总数和分类计数,观察血细胞形态;免疫荧光细胞化学法检测受体鼠骨髓中CD34^(+)CD38^(-)LSCs;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测染色阳性骨髓单核细胞(BMMCs)百分率;流式细胞术检测BMMCs细胞周期分布;CFU-Mix培养检测BMMCs集落形成能力。结果分选后CD34^(+)CD38^(-)细胞纯度达到(91.14±1.02)%,细胞存活率为(95.42±3.5)%;CD34^(+)CD38^(-)LSCs对照组细胞增殖与集落形成能力显著高于正常CD34^(+)CD38^(-)对照组;CD34^(+)CD38^(-)LSCs ASP组细胞增殖能力与集落形成能力明显低于CD34^(+)CD38^(-)LSCs对照组;CD34^(+)CD38^(-)LSCs ASP组细胞高表达p16^(INK4a)、p19^(Arf)、p53、p21^(Cip1/Waf1)基因。移植CD34^(+)CD38^(-)LSCs后小鼠骨髓中存在人源性LSCs。移植模型组小鼠白细胞总数增加,中性粒细胞比例升高,淋巴细胞比例降低;注射ASP可明显降低白细胞总数和中性粒细胞比例,淋巴细胞比例有所升高;处于G0/G1期中的BMMCs数量增加,S期细胞数量减少;SA-β-Gal染色阳性细胞百分率明显提高;CFU-Mix集落形成数显著减少。结论ASP在体内与体外均能抑制CD34^(+)CD38^(-)LSCs增殖,推测其可能机制与ASP调节细胞衰老相关基因表达密切相关。

关键词：当归多糖人白血病干细胞增殖抑制体内移植细胞衰老流式细胞术小鼠

当归多糖促进骨髓移植小鼠造血功能重建及其机制研究

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陆军军医大学学报 2022年第16期44卷 1621-1628页

作者：牛雪芳廖奎汪子铃侯吉颖曾娣肖含先之杜坤航王璐王亚平重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院放射治疗室重庆400016

目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对接受供体骨髓细胞移植后受体小鼠的造血功能重建及其初步机制。方法取10只20~25 g雄性C57BL/6J小鼠作为供体小鼠,提取其骨髓细胞;将30只8~10周龄同系受体雌性小鼠经8.0 Gy的... 详细信息

目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对接受供体骨髓细胞移植后受体小鼠的造血功能重建及其初步机制。方法取10只20~25 g雄性C57BL/6J小鼠作为供体小鼠,提取其骨髓细胞;将30只8~10周龄同系受体雌性小鼠经8.0 Gy的X射线(一次性致死剂量)全身辐射后,将供体小鼠的骨髓细胞通过尾静脉输入受体小鼠体内来构建小鼠骨髓移植模型,随后采用简单随机化法将受体小鼠分为3组,每组10只。对照组(Ctrl组):受体小鼠辐射后不移植骨髓细胞;骨髓移植组(BMT组):受体小鼠辐射后移植骨髓细胞(5×10^(6)个/只);骨髓移植+当归多糖组(TASP组):辐射剂量与移植骨髓细胞数同骨髓移植组,同时给受体小鼠腹腔注ASP(100 mg/kg×9 d)。期间动态测量受体小鼠体质量变化。移植骨髓细胞后第9天,PCR方法鉴定受体鼠脾集落细胞和骨髓细胞的Y染色体基因。采集受体小鼠眼眶血,检测白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)数量。取受体小鼠股骨,计数每只股骨有核细胞数,流式细胞术检测骨髓细胞周期。培养受体鼠骨髓基质细胞,观察基质细胞贴壁情况,EDU法检测骨髓基质细胞增殖能力,并计数成纤维细胞集落生成单位(CFU-F)。ELISA法检测受体鼠血清和骨髓基质细胞培养上清液中相关造血因子含量。结果对照组小鼠7 d内全部死亡,BMT组与TASP组小鼠全部存活。两个移植组的小鼠体质量5~6 d降至最低后开始恢复,TASP组恢复更快(P<0.05)。在雌性受体小鼠脾集落细胞和骨髓造血细胞中检测到Y染色体基因。TASP组小鼠外周血WBC、RBC、HGB数量与每只股骨有核细胞数均显著高于BMT组(P<0.05;P<0.01),且骨髓细胞G_(0)/G_(1)期细胞比例下降,S期和G_(2)/M期细胞比例增高(P<0.05)。TASP组受体小鼠的骨髓基质细胞贴壁数量、增殖能力和形成CFU-F集落数量也明显高于BMT组(P<0.05),且小鼠血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素3(IL-3)以及骨髓基质细胞培养上清液中GM-CSF和干细胞因子(SCF)含量显著增高(P<0.05)。结论ASP可促进移植骨髓细胞在受体小鼠体内造血功能的重建,其初步机制可能与改善造血微环境和促进造血因子分泌有关。

关键词：当归多糖骨髓移植造血功能重建造血微环境造血因子

当归多糖对D-半乳糖致衰老小鼠睾丸的保护作用

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解剖学报 2019年第4期50卷 506-511页

作者：邱竹姜蓉汪子铃陈粼波陈雄斌王璐黄国宁王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室/组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆市妇幼保健院生殖与遗传研究所重庆400013

目的探讨当归多糖(ASP)对D-半乳糖(D-Gal)所致衰老小鼠睾丸的保护作用与机制。方法C57BL/6 J雄性小鼠40只,随机分为对照组、ASP对照组、衰老模型组ASP衰老模型组,每组10只。衰老模型组:小鼠颈背部皮下注射D-Gal(120 mg/kg,qd×42);对照... 详细信息

目的探讨当归多糖(ASP)对D-半乳糖(D-Gal)所致衰老小鼠睾丸的保护作用与机制。方法C57BL/6 J雄性小鼠40只,随机分为对照组、ASP对照组、衰老模型组ASP衰老模型组,每组10只。衰老模型组:小鼠颈背部皮下注射D-Gal(120 mg/kg,qd×42);对照组小鼠皮下注射等时与等量生理盐水;ASP对照组小鼠皮下注射等量生理盐水15 d,第16天开始腹腔注射ASP(140 mg/kg,qd×27);ASP衰老模型组小鼠建立方法同衰老模型组小鼠,第16天开始腹腔注射ASP(同ASP对照组)。模型复制完成第2天,采集各组小鼠内眦静脉血测定血清睾酮水平;取睾丸测定脏器指数;石蜡切片,HE染色观察睾丸组织学形态;做冷冻睾丸组织切片,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察睾丸组织细胞衰老情况;制备睾丸组织匀浆上清液,酶学法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法检测总抗氧化能力(T-AOC),硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量;Western blotting检测衰老相关蛋白P53、P21表达水平。结果各组间睾丸湿重及睾丸器官指数无明显差异,但衰老模型组小鼠睾丸组织结构损伤明显,生精小管的细胞层数减少,生精细胞出现退变,睾丸间质细胞明显减少;血清睾酮水平显著降低;SA-β-Gal染色阳性细胞密度显著增加;睾丸组织匀浆中SOD活性及T-AOC显著降低,MDA含量显著升高;P53、P21蛋白表达显著升高。与衰老模型组比较,注射ASP干预衰老过程,睾丸组织学结构损伤明显减轻,生精细胞退变与睾丸间质细胞减少均不明显;血清睾酮水平降低不明显;SA-β-Gal染色阳性细胞密度减少;SOD活性和T-AOC增高,MDA含量降低;P53、P21蛋白表达显著降低。结论 ASP具有拮抗致衰剂Dgal对睾丸的损伤作用,其机制可能与ASP抑制氧化应激损伤及抑制衰老相关基因表达有关。

关键词：当归多糖 D-半乳糖睾丸保护氧化应激免疫印迹法衰老小鼠

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当归多糖拮抗D-半乳糖致大鼠脑衰老的作用

第三军医大学学报 2021年第19期43卷 1839-1845页

作者：汪兰张梦思王顺和汪子铃侯吉颖肖含先之黄彩虹曾娣张进牛雪芳牛依琳王璐王亚平重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide,ASP)拮抗氧化致衰剂D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致大鼠脑衰老的作用。方法将SD大鼠分为对照组、ASP组、衰老模型组、ASP衰老模型组。采用水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力;衰老... 详细信息

目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide,ASP)拮抗氧化致衰剂D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致大鼠脑衰老的作用。方法将SD大鼠分为对照组、ASP组、衰老模型组、ASP衰老模型组。采用水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力;衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测脑组织细胞衰老;色谱法测量海马匀浆SOD、MDA和GSH的含量;ELISA法检测海马组织匀浆中IL-1β,IL-6的含量;Southern blot检测海马细胞端粒长度,TRAP-PCR检测端粒酶活性。从SD胎鼠脑组织中分离、培养、鉴定神经干细胞(neural stem cells,NSCs)。将培养第3代NSCs分为对照组、ASP组、衰老模型组、ASP衰老模型组。色谱法测定细胞内MDA含量;流式细胞仪测定细胞内ROS水平;RT-PCR检测衰老相关基因的p19、p21、p53 mRNA的表达。结果与衰老模型组相比,ASP衰老模型组大鼠空间学习记忆能力明显改善;脑组织中SA-β-Gal染色阳性的细胞数减少(P<0.05);海马区SOD、GSH含量增高,MDA含量降低(P<0.05);IL-1β,IL-6的分泌水平降低(P<0.05);端粒长度和端粒酶活性增加。成功分离并鉴定出NSCs;与NSCs衰老组相比,ASP衰老组NSCs中MDA含量和ROS水平显著降低(P<0.05);衰老相关基因p19、p21、p53 mRNA表达降低(P<0.05)。结论ASP可能通过调控细胞端粒长度和端粒酶活性,下调衰老相关基因表达,降低炎症因子表达,提高细胞抗氧化能力,进而拮抗D-gal对NSCs和海马细胞的致衰作用。

关键词：当归多糖 D-半乳糖脑衰老神经干细胞抗衰老

当归多糖拮抗致衰剂对大鼠胸腺结构与功能的保护作用

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解剖学报 2016年第2期47卷 254-260页

作者：姜蓉张梦思贾道勇张岩岩夏婕妤邹婷叶剑文王璐王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程学研究室组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的探讨当归多糖(ASP)拮抗致衰剂对大鼠胸腺结构与功能的保护作用及相关机制。方法 SD大鼠随机分为4组,每组10只。衰老模型组,每天1次皮下注射D-半乳糖(120mg/kg),共42d;ASP衰老模型组,每天1次注射D-半乳糖剂量与时间同衰老模型组,第1... 详细信息

目的探讨当归多糖(ASP)拮抗致衰剂对大鼠胸腺结构与功能的保护作用及相关机制。方法 SD大鼠随机分为4组,每组10只。衰老模型组,每天1次皮下注射D-半乳糖(120mg/kg),共42d;ASP衰老模型组,每天1次注射D-半乳糖剂量与时间同衰老模型组,第15天起腹腔注射ASP(100 mg/kg),至第42天;正常对照组,每天皮下注射等量生理盐水42d;ASP对照组,注射等量生理盐水14d,第15天起腹腔注射ASP 28d(同ASP衰老模型组)。药物注射完成后第2天,取各组胸腺,测定胸腺指数,观察胸腺组织形态学,检测胸腺细胞衰老;制备各组胸腺细胞,体外培养细胞检测其增殖、细胞周期分布,测定细胞因子分泌量、细胞产生活性氧(ROS)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果 D-半乳糖复制的衰老模型大鼠胸腺结构与功能损伤明显。与衰老模型组大鼠比较,ASP衰老模型组大鼠胸腺指数升高,胸腺皮质与髓质面积比例增加,胸腺细胞的增殖能力提高,处于G1期胸腺细胞比例减少,G2及S期细胞比例增加,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)阳性胸腺细胞百分率下降,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素(IL)-2、IL-6的分泌能力明显提高,SOD活性明显提升,ROS含量下降。结论当归多糖对致衰剂D-半乳糖所致的胸腺损伤有明确的拮抗作用,其机制可能与抑制氧化损伤有关。

关键词：当归多糖衰老模型胸腺酶联免疫吸附测定大鼠

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当归多糖抑制氧化损伤延缓造血干细胞衰老

中国中药杂志 2013年第3期38卷 407-412页

作者：张先平王乾兴陈斌魏强徐春燕姜蓉王建伟王亚平重庆医科大学干细胞与组织工程研究室组织胚胎学教研室重庆400016 遵义医学院细胞生物学教研室贵州遵义563003 山东省枣庄市台儿庄区中医院急诊科山东枣庄277400

目的:观察当归多糖(ASP)对小鼠造血干细胞(HSCs)活性氧(ROS)、总抗氧化能力(T-AOC)及p16 mRNA表达的影响,探讨ASP延缓HSCs衰老的可能机制。方法:C57BL/6J小鼠随机分为正常组、衰老组,并分别予ASP干预;衰老组采用X线3.0 Gy/8 F全身均匀照... 详细信息

目的:观察当归多糖(ASP)对小鼠造血干细胞(HSCs)活性氧(ROS)、总抗氧化能力(T-AOC)及p16 mRNA表达的影响,探讨ASP延缓HSCs衰老的可能机制。方法:C57BL/6J小鼠随机分为正常组、衰老组,并分别予ASP干预;衰老组采用X线3.0 Gy/8 F全身均匀照射,建立小鼠HSCs衰老模型;正常、衰老ASP干预组在建模期间均予ASP灌胃;而正常组、衰老组予等体积NS灌胃。免疫磁珠分离HSCs,通过β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、细胞周期分析和混合集落培养观察HSCs生物学特性变化;流式细胞术与免疫荧光检测ROS产量;比色法检测T-AOC;荧光定量PCR检测p16 mRNA表达。结果:与正常组比较,3.0 Gy/8 F的X线能显著增加衰老组HSCs SA-β-Gal染色阳性率和G1期比例;增加ROS产量,上调p16 mRNA表达;混合集落形成能力和T-AOC下降。与衰老组比较,ASP能显著降低衰老组HSCs的SA-β-Gal染色阳性率和G1期比例,减少ROS产量,下调p16 mRNA;增加混合集落形成能力和T-AOC。结论:3.0 Gy/8 F的X线能诱导小鼠HSCs衰老;ASP则能通过抑制氧化损伤及下调p16 mRNA表达延缓小鼠HSCs衰老。

关键词：当归多糖造血干细胞细胞衰老氧化应激