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弗劳地枸橼酸杆菌的临床分布及其耐药性分析

齐齐哈尔医学院学报 2022年第12期43卷 1109-1113页

作者：朱玉张龙魏取好安徽理工大学附属奉贤医院上海市奉贤区201400 上海市交通大学附属胸科医院上海市奉贤医院检验科

目的了解临床中C.freundii的分布和耐药情况,从而为现阶段少见菌种抗菌药物的使用提供针对性的方案。方法收集97株2016—2021年非重复C.freundii,运用聚合酶链反应(PCR)筛查第1、2、3类整合酶基因(intI1、intI2、intI3),对intI+的C.fr... 详细信息

目的了解临床中C.freundii的分布和耐药情况,从而为现阶段少见菌种抗菌药物的使用提供针对性的方案。方法收集97株2016—2021年非重复C.freundii,运用聚合酶链反应(PCR)筛查第1、2、3类整合酶基因(intI1、intI2、intI3),对intI+的C.freundii采用长片段PCR扩增整合子可变区,通过测序确定可变区基因盒种类。结果 97株C.freundii中,21株第1类整合酶阳性,2株第2类整合酶阳性。扩出的可变区中,有8株是dfrA12-aadA2,其中aac(6’)-II-ereA2-aac3-arr-ereA2和aac(6’)-II-ereA2-tnpA-aac3-arr-ereA2携带的基因盒种类最多。结论 C.freundii菌株整合子携带率低于其他肠杆菌科细菌,其可变区耐药基因盒种类多样,该菌目前临床耐药之所以如此严峻,是与其携带的可变区启动子(Pc)密切相关。碳青霉烯类抗生素(CRE)仍然是对多重耐药菌株具有活性的抗生素,但应限制其使用以避免出现耐药性,而第三代头孢类抗生素依然可作为治疗由C.freundii所引起的感染首选药物。

关键词：弗劳地枸橼酸杆菌耐药性整合子启动子

弗劳地枸橼酸杆菌分离鉴定及其三重PCR 检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2020年第7期42卷 669-674页

作者：张楠驰王利西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室四川成都610041 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室四川成都610041

为鉴定导致鲫鱼嘴部溃烂、肛门红肿、腹部有出血点症状的病原菌,并建立一种快速检测该病原菌的方法,本研究采用形态学、生理生化特性分析及16S rDNA序列分析方法从患病鲫鱼中分离鉴定病原菌株,并进行了动物回归实验。结果显示,从患病鲫... 详细信息

为鉴定导致鲫鱼嘴部溃烂、肛门红肿、腹部有出血点症状的病原菌,并建立一种快速检测该病原菌的方法,本研究采用形态学、生理生化特性分析及16S rDNA序列分析方法从患病鲫鱼中分离鉴定病原菌株,并进行了动物回归实验。结果显示,从患病鲫鱼中分离菌株为弗劳地枸橼酸杆菌(Citrobacter freundii),命名为fsznc-08,该菌对鲫鱼具有致病性。针对该菌GalF基因、petA基因和FliC基因设计了3条特异性引物,通过对反应体系和条件的优化,建立了检测该菌的三重PCR方法,结果显示,三重PCR方法可准确扩增出弗劳地枸橼酸杆菌GalF、petA和FliC 3个目的基因,而其它菌株均未扩增出目的基因,特异性良好;该方法对该菌DNA最低检出限为6.09×101拷贝/μL。利用该方法检测人工感染患病鱼样品的阳性率约为93.33%,与单一PCR方法的检测率一致,但特异性和敏感性均高于单一PCR。本实验建立的弗劳地枸橼酸杆菌三重PCR检测法具有特异性强、敏感性高、操作简单、成本低的优点,为临床弗劳地枸橼酸杆菌的检测提供可行方法。

关键词：弗劳地枸橼酸杆菌快速检测多重PCR 分离鉴定

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弗劳地枸橼酸杆菌眼内炎一例

中华眼科杂志 2007年第1期43卷 68-69页

作者：于滨董晓光山东省眼科研究所青岛眼科医院 266071

弗劳地栒橼酸杆菌是一种机会致病菌，存在于人和动物肠道，由其引起的感染性眼内炎较罕见，且预后极差。2005年6月，我们收治了1例该菌所致的化脓性眼内炎，患者预后良好。

关键词：弗劳地枸橼酸杆菌感染性眼内炎化脓性眼内炎机会致病菌预后

弗劳地枸橼酸杆菌中质粒介导的KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶基因结构分析

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临床检验杂志 2016年第6期34卷 423-427页

作者：林迪方颍张嵘陈功祥浙江大学医学院附属第二医院检验科杭州310003 解放军第117医院检验科杭州310013 浙江工业大学药学院杭州310014

目的对携带bla_(NDM-1)和bl_(aKPC-2)的弗劳地枸橼酸杆菌的碳青霉烯酶基因结构进行分析。方法收集4株耐碳青霉烯类药物弗劳地枸橼酸杆菌(CF-05、CF-17、CF-35、CF-43),琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析细菌同源性... 详细信息

目的对携带bla_(NDM-1)和bl_(aKPC-2)的弗劳地枸橼酸杆菌的碳青霉烯酶基因结构进行分析。方法收集4株耐碳青霉烯类药物弗劳地枸橼酸杆菌(CF-05、CF-17、CF-35、CF-43),琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析细菌同源性;特异性PCR扩增和序列测定分析碳青霉烯酶耐药基因和ESBLs耐药基因、接合试验、耐药基因周围序列分析对菌株的耐药机制进行分子水平研究。结果 4株细菌仅CF-05对阿米卡星敏感,所有菌株对其他检测药物全部耐药;PFGE结果显示4株细菌不同源;特异性PCR扩增和序列分析显示2株(CF-35、CF-43)同时携带blaNDM-1和blaKPC-2、另2株(CF-05、CF-17)仅携带blaNDM-1,CF-35同时携带bla_(CTX-M-15);其中3株细菌(CF-05、CF-17、CF-43)接合成功,CF-05、CF-17接合子(CF-05-1和CF-17-1)携带bla_(NDM-1),CF-43获得2种接合子(CF-43-1携带bla_(KPC-2)、CF-43-2同时携带bla_(NDM-1)和bla_(KPC-2));分析blaNDM-1和blaKPC-2周围序列发现,4株细菌周围序列分别与国内报道携带bla_(NDM-1)和bla_(KPC-2)的肺炎克雷伯菌质粒pNDM-HN380和PK048周围序列高度相似。结论在4株弗劳地枸橼酸杆菌中检测到NDM-1型碳青霉烯酶,其中2株同时携带KPC-2型碳青霉烯酶,bla_(NDM-1)周围序列和bla_(KPC-2)周围序列与国内已知肺炎克雷伯菌相关耐药基因周围序列高度相似。

关键词：弗劳地枸橼酸杆菌碳青霉烯酶 NDM-1 KPC-2

弗劳地枸橼酸杆菌产KPC-2型碳青霉烯酶的研究

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弗劳地枸橼酸杆菌产KPC-2型碳青霉烯酶的研究

作者：汪安勇安徽医科大学

学位级别：硕士

目的研究弗劳地枸橼酸杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。材料与方法菌株来源收集安徽医科大学第一附属医院2010年1月～2011年10月间住院和门诊送检标本61株（剔除重复株）。标本种类分布：痰液39份、分泌物14份、尿液8份。全部菌株均... 详细信息

目的研究弗劳地枸橼酸杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。材料与方法菌株来源收集安徽医科大学第一附属医院2010年1月～2011年10月间住院和门诊送检标本61株（剔除重复株）。标本种类分布：痰液39份、分泌物14份、尿液8份。全部菌株均使用WalKAway-96细菌鉴定仪鉴定为弗劳地枸橼酸杆菌。质控菌包括大肠埃希菌ATCC25922、K.pneumoniaeATCC BAA-1705、K.pneumoniaeATCCBAA-1706（均为安徽医科大学第一附属医院检验科保存）。利福平耐药的大肠埃希菌EC600用于接合试验的受体菌。方法参照美国临床实验室标准化研究所（CLSI）[28]用琼脂稀释法检测61株弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南以及其他常见药物的最低抑菌浓度（MIC）。改良Hodge试验对61株弗劳地枸橼酸杆菌进行耐药表型检测，等电聚集电泳分析其β-内酰胺酶类型，聚合酶链反应（PCR）和DNA序列分析检测β-内酰胺酶基因型，接合试验分析其耐药质粒传递情况。结果只有一株碳青霉烯类抗生素耐药的弗劳地枸橼酸杆菌改良Hodge试验结果为阳性，该株弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南的MIC均为64μg/ml、对青霉素类、头孢菌素类、头孢西丁、氨曲南和氨基糖甙类均耐药。转移接合试验结果显示弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药性可以通过质粒转移。等点聚焦电泳结果显示弗劳地枸橼酸杆菌具有约pI5.2、6.0、6.7、8.0的4种β-内酰胺酶，接合子有约pI6.7的β-内酰胺酶，PCR检测及序列分析结果显示该菌产生KPC-2基因。结论KPC-2型碳青霉烯酶的产生可能是引起弗劳地枸橼酸杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因，并且该耐药性基因能通过质粒进行转移。

关键词：弗劳地枸橼酸杆菌碳青霉烯酶改良 Hodge 试验转移接合试验质粒

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弗劳地枸橼酸杆菌的临床分布及耐药特性分析

中国微生态学杂志 2010年第8期22卷 724-725,729页

作者：胡龙华胡雪飞熊建球贾坤如章白苓胡晓彦南昌大学第二附属医院江西南昌330006 南昌大学第一附属医院江西南昌330006

目的了解弗劳地枸橼酸杆菌临床分离株的分布特点,探讨其耐药规律,为临床防治其感染提供帮助。方法常规方法进行菌株分离,VITEK-32型或VITEK-2全自动微生物分析仪进行菌株鉴定,K-B法进行药物敏感性试验,采用WHONET 5.5软件分析数据。结果... 详细信息

目的了解弗劳地枸橼酸杆菌临床分离株的分布特点,探讨其耐药规律,为临床防治其感染提供帮助。方法常规方法进行菌株分离,VITEK-32型或VITEK-2全自动微生物分析仪进行菌株鉴定,K-B法进行药物敏感性试验,采用WHONET 5.5软件分析数据。结果 2007年6月至2009年12月从各种感染性标本中共分离到47株弗劳地枸橼酸杆菌,呼吸道标本占绝大多数,达51.1%(24/47),其次为脓液和尿液,分别为23.4%(11/47)和12.8%(6/47)。该菌种对氨苄西林和头孢唑啉的耐药性最严重,耐药率分别为92.6%和91.9%,其次是氨苄西林/舒巴坦、头孢西丁、头孢噻肟、左氧氟沙星及复方磺胺甲口恶唑,耐药率均>45%,耐药率较低的有亚胺培南和阿米卡星,耐药率分别为8.3%和8.6%。结论弗劳地枸橼酸杆菌可引起患者多部位感染,下呼吸道是其主要感染部位,该菌种耐药性较严重,亚胺培南和阿米卡星对其有较强的抗菌活性。

关键词：弗劳地枸橼酸杆菌临床分布耐药性监测

碳青霉烯类药物耐药的弗劳地枸橼酸杆菌耐药机制研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第12期31卷 1099-1103页

作者：胡丽庆孙定河史煜波史颖娇宁波市第一医院检验科 315000

目的对耐碳青霉烯类弗劳地枸橼酸杆菌进行同源性分析及多种耐药基因的检测.方法用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度（ MIC）值,采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析耐碳青霉烯类弗劳地枸橼酸杆菌的同源性,以聚合酶链反应（PCR）检测β-内酰... 详细信息

目的对耐碳青霉烯类弗劳地枸橼酸杆菌进行同源性分析及多种耐药基因的检测.方法用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度（ MIC）值,采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析耐碳青霉烯类弗劳地枸橼酸杆菌的同源性,以聚合酶链反应（PCR）检测β-内酰胺酶、膜孔蛋白的缺失等多种耐药基因.结果 PFGE显示1、2、4、5号菌株均有19个条带,具有同源性；PCR试验检测结果1、4号菌携带blaCTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）；2、3、5号菌携带携带blaDHA,3号携带bla ACT/MIR型AmpC 基因,1、2、4、5号菌携带bla KPC-2碳青霉烯酶基因；2号、4号菌株缺失膜孔蛋白基因ompF,3号菌株同时缺失ompC和ompF；其中3号菌株的16S rRNA基因定量确定AmpC基因的表达为阴性菌的106.7倍.结论宁波市第一医院碳青霉烯类耐药的弗劳地枸橼酸盐杆菌具有同源性,其耐药机制由KPC酶、AmpC酶、ESBLs、膜孔蛋白缺失等共同作用所形成,多数耐药基因定位在质粒上易引起耐药性的播散,临床应引起高度重视.

关键词：弗劳地枸橼酸杆菌碳青霉烯酶耐药基因同源性

碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌中质粒介导blaNDM-1基因的研究

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中国感染与化疗杂志 2018年第6期18卷 604-607页

作者：杜娜林云刘淑敏牛敏李亚波施雄飞周芳尧静张孟爽杜艳云南省中医医院检验科昆明650021 昆明医科大学第一附属医院检验科云南省实验诊断研究所云南省检验医学重点实验室

目的研究碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌中bla_(NDM-1)基因的传播特征。方法收集昆明医科大学第一附属医院2012年6月-2014年10月产NDM-1酶弗劳地枸橼酸杆菌18株,采用VITEK 2全自动鉴定药敏仪进行菌种鉴定和药敏试验;通过接合试验、脉... 详细信息

目的研究碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌中bla_(NDM-1)基因的传播特征。方法收集昆明医科大学第一附属医院2012年6月-2014年10月产NDM-1酶弗劳地枸橼酸杆菌18株,采用VITEK 2全自动鉴定药敏仪进行菌种鉴定和药敏试验;通过接合试验、脉冲场凝胶电泳(PFGE)及Southern印迹杂交试验对bla_(NDM-1)基因的水平传播机制进行研究。结果 18株细菌对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类抗生素的耐药率为100%,对其他抗生素也呈现不同程度的耐药;13株细菌接合试验成功,接合子对碳青霉烯类抗生素耐药;PFGE及Southern印迹杂交试验表明16株细菌中bla_(NDM-1)基因均位于约33.3kb大小的质粒上,剩余2株细菌的bla_(NDM-1)基因位于33.3～54.7kb大小的质粒上。结论质粒介导碳青霉烯类耐药弗劳地枸橼酸杆菌中bla_(NDM-1)基因水平转移。

关键词： blaNDM-1基因质粒弗劳地枸橼酸杆菌传播机制

肺结核继发肺部弗劳地枸橼酸杆菌感染的临床特点与耐药性分析

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中国消毒学杂志 2016年第4期33卷 386-388页

作者：吴朝霞方寅飞陈建飞金华市中心医院浙江金华321000 浙江金华广福医院

目的分析金华广福医院肺结核患者弗劳地枸橼酸杆菌肺部感染的临床特点和耐药特征,为临床治疗和预防弗劳地枸橼酸杆菌肺部感染提供依据。方法收集金华广福医院2011年1月-2014年12月肺结核患者的下呼吸道标本,常规分离培养细菌,K-B纸片法... 详细信息

目的分析金华广福医院肺结核患者弗劳地枸橼酸杆菌肺部感染的临床特点和耐药特征,为临床治疗和预防弗劳地枸橼酸杆菌肺部感染提供依据。方法收集金华广福医院2011年1月-2014年12月肺结核患者的下呼吸道标本,常规分离培养细菌,K-B纸片法进行药敏试验,利用WHONET 5.6软件分析处理试验数据。结果从肺结核患者分离出的弗劳地枸橼酸杆菌以痰液为主,占64.4%,产ESBLs菌株分离率达35.6%;该菌对亚胺培南、美罗培南、呋喃妥因、卡那霉素、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦都较敏感,耐药率分别为3.8%、4.5%、8.3%、9.1%、17.4%、18.1%和22.7%,其余抗菌药物的耐药率均>25.0%。结论弗劳地枸橼酸杆菌引发的肺结核患者肺部感染日益严重,痰液是其主要标本类型,该菌对临床常用的头孢类、喹诺酮类、氨基糖苷类及多种β-内酰胺类抗生素呈高度耐药,临床应加强耐药性监测,以减少耐药菌株的产生和医院内扩散。

关键词：肺结核弗劳地枸橼酸杆菌肺部感染耐药性