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RP-HPLC制备色谱法分离淡豆豉中高纯度异黄酮苷元

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中药材 2005年第12期28卷 1062-1063页

作者：曲丽萍宓鹤鸣范国荣第二军医大学药学院药物分析教研室上海200433

淡豆豉经大孔树脂柱色谱初步分离纯化,采用RP-HPLC制备色谱法,乙腈-水-冰醋酸(35∶65∶1,v/v/v)为流动相,流速3·0ml/min,检测波长260nm。结果表明,在30min内快速分离到大豆素、大豆黄素和染料木素,产物纯度均达到99%以上。

关键词：高效液相制备色谱大孔树脂淡豆豉异黄酮苷元

异黄酮苷元滴丸的制备、质量标准和药代动力学研究

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异黄酮苷元滴丸的制备、质量标准和药代动力学研究

作者：习志刚广东药学院

学位级别：硕士

异黄酮是植物生长过程中形成一类次生代谢产物,富含于大豆,包括9种异黄酮糖苷和3种异黄酮苷元,其中以异黄酮苷元的生物活性最高。现代医学证明,异黄酮苷元具有类雌激素生物活性,在抗老年痴呆症、抗氧化、保护神经、预防心血管疾病、预... 详细信息

异黄酮是植物生长过程中形成一类次生代谢产物,富含于大豆,包括9种异黄酮糖苷和3种异黄酮苷元,其中以异黄酮苷元的生物活性最高。现代医学证明,异黄酮苷元具有类雌激素生物活性,在抗老年痴呆症、抗氧化、保护神经、预防心血管疾病、预防骨质疏松和治疗女性更年期不适症等方面有良好的应用前景,极具研究开发价值。由于异黄酮苷元难溶于水,其生物利用度很低,这对于它的临床应用带来了一定的难度。本研究采用固体分散技术,以异黄酮苷元为原料,制备一种口服有效的异黄酮苷元滴丸,并按照《中国药典》(2005版)要求,完成了质量标准和药代动力学研究。通过选用PEG6000载体、添加增溶剂吐温-80等辅料,增加了药物的润湿性和抑晶性,提高了难溶性药物的溶出速度,并通过优化制剂工艺条件,提高了药物的稳定性和生物利用度,增强了治疗效果,为抗老年痴呆症新药——异黄酮苷元滴丸的进一步研究开发提供了基础。 1.目的提取纯化异黄酮苷元,确定异黄酮苷元滴丸的最佳成型工艺,并对制剂进行质量标准考察、稳定性考察和药代动力学研究,为今后异黄酮苷元滴丸的生产和应用提供科学依据。 2.方法 2.1从豆粕中提取出异黄酮,再利用酸水解法将异黄酮糖苷转化为苷元,采用萃取法进行纯化精制。 2.2用单因素实验法确定制备工艺条件,利用正交设计法优选处方组成。 2.3按照《中国药典》(2005版)要求,对异黄酮苷元滴丸丸重差异、溶散时限和外观质量指标进行考察,并利用HPLC法对滴丸的含量进行考察。 2.4通过高温、强光、高湿和加速实验,对异黄酮苷元滴丸的外观、含量、丸重差异和溶散时限指标进行考察。 2.5通过灌胃给药,考察异黄酮苷元在大鼠体内的血药浓度、半衰期t1/2、达峰时间Tmax、达峰浓度Cmax等动力学参数。 3.结果 3.1异黄酮苷元提取工艺的研究:染料木素、黄豆苷元和黄豆黄素的含量分别为46.59%、21.215%和3.175%,异黄酮苷元总含量为70.98%。 3.2异黄酮苷元滴丸的制备工艺:最佳工艺条件为,冷凝剂二甲基硅油温度10℃,药液温度80℃,滴距6cm,滴口内外径(2.0/3.2mm),滴速15滴/min。最优处方为,药物:PEG6000:吐温-80=2:4:1。 3.3质量标准研究:异黄酮苷元滴丸中染料木素、黄豆苷元和黄豆黄素的含量分别为13.32%、6.00%和0.89%。滴丸的丸重为25.03mg,滴丸的溶散时限为5.0min。 3.4稳定性研究:在高温和强光实验条件下,异黄酮苷元滴丸外观、溶散时限和含量均保持稳定;在高湿实验条件下,异黄酮苷元滴丸较易吸湿,丸重增加,溶散时限减小,含量降低;在加速实验条件下,异黄酮苷元滴丸外观、丸重、溶散时限和含量均保持稳定。 3.5药代动力学研究:大鼠灌胃异黄酮苷元滴丸混悬液后血药浓度上升迅速,在Tmax=18.03min达到吸收峰值Cmax=0.89μg·mL-1,吸收半衰期t1/2α=3.65min,消除半衰期t1/2β=39.69min,血药浓度-时间曲线下面积AUC=46.30μg/mL·min,150min以后基本清除到基底水平。 4.结论 4.1提取制备的异黄酮苷元纯度高,工艺稳定可控。 4.2优选的异黄酮苷元滴丸制备工艺稳定性好、成型率高。 4.3建立的异黄酮苷元滴丸质量标准方法可控性强、专属性好。 4.4异黄酮苷元滴丸的处方稳定,达到制剂的设计目的要求。 4.5制剂中异黄酮苷元在大鼠体内吸收迅速,入血速度快,血药浓度高,吸收程度好。

关键词：异黄酮苷元滴丸染料木素正交设计药代动力学

由大豆浓缩蛋白(SPC)乳清制备高纯度异黄酮苷元的研究

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中国粮油学报 2006年第5期21卷 75-80页

作者：张晨杨晓泉孔慧清李雄卢秋雁刘美玲广东省微生物研究所广州510070 华南理工大学轻工与食品学院食物蛋白工程研究中心广州510640 广东天辰生物技术有限公司广州510070

以价格低廉、易污染环境的大豆浓缩蛋白(SPC)乳清为原料,采用等电点结合盐析法沉淀蛋白质、活性炭脱色、离子交换树脂脱盐、HPD-100型非极性大孔树脂吸附纯化、盐酸水解等工艺,制备高纯度的大豆异黄酮苷元产品。经高效液相色谱(HPLC)等... 详细信息

以价格低廉、易污染环境的大豆浓缩蛋白(SPC)乳清为原料,采用等电点结合盐析法沉淀蛋白质、活性炭脱色、离子交换树脂脱盐、HPD-100型非极性大孔树脂吸附纯化、盐酸水解等工艺,制备高纯度的大豆异黄酮苷元产品。经高效液相色谱(HPLC)等方法分析,大豆异黄酮的纯度为(58.4±2.5)%(w/w),总回收率为(78.3±2.6)%;异黄酮苷元的相对含量≥95%(w/w),其中染料木素(Genistein)与大豆甙元(Daid-zein)的含量分别为(23.4±0.8)%和(31.2±0.9)%,而黄豆黄素(G lycitein)的含量极低。产品纯度和附加值高,既能克服当前异黄酮提取工艺中原料成本高、预处理方法繁琐、产品纯度低等缺点,又能实现废物利用,具有良好的推广应用与产业化前景。

关键词：大豆浓缩蛋白乳清制备异黄酮苷元

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大豆异黄酮苷元抗血浆脂蛋白脂质过氧化作用

中国粮油学报 2008年第4期23卷 61-64页

作者：尹学哲许惠仙金花全吉淑延边大学医学院延吉133000

对大豆异黄酮苷元的抗脂蛋白脂质过氧化作用进行了研究。从大豆胚轴提取总糖苷后,采用C18反相柱层析法分离大豆异黄酮糖苷,再将其水解制备成异黄酮苷元。12名健康受试者空腹食用大豆异黄酮苷元前后抽取静脉血制备血浆脂蛋白,观察血浆脂... 详细信息

对大豆异黄酮苷元的抗脂蛋白脂质过氧化作用进行了研究。从大豆胚轴提取总糖苷后,采用C18反相柱层析法分离大豆异黄酮糖苷,再将其水解制备成异黄酮苷元。12名健康受试者空腹食用大豆异黄酮苷元前后抽取静脉血制备血浆脂蛋白,观察血浆脂蛋白过氧化程度及氧化易感性的变化。结果表明,大豆异黄酮苷元食用后受试者血浆VLDL、LDL和HDL过氧化脂质水平明显降低;在体外进行氧化修饰时,LDL氧化延滞时间明显延长,LDL氧化易感性下降。大豆异黄酮苷元可增强血浆抗氧化能力,尤其增强LDL抗氧化修饰能力,因此能够起到防治心血管疾病的积极作用。

关键词：异黄酮苷元血浆脂蛋白脂质过氧化氧化易感性

食品胶对豆浆中活性成分异黄酮苷元热稳定性的影响

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食品工业科技 2009年第12期30卷 311-313,315页

作者：张永军黄惠华华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640

研究了羧甲基纤维素钠(CMC)、海藻酸钠、黄原胶等食品添加剂对豆浆热处理过程中活性成分异黄酮苷元热稳定性的影响。高效液相色谱分析表明,CMC、黄原胶、海藻酸钠都能减少黄豆苷元、大豆黄素、染料木黄酮三种异黄酮苷元的热损失,其中CM... 详细信息

研究了羧甲基纤维素钠(CMC)、海藻酸钠、黄原胶等食品添加剂对豆浆热处理过程中活性成分异黄酮苷元热稳定性的影响。高效液相色谱分析表明,CMC、黄原胶、海藻酸钠都能减少黄豆苷元、大豆黄素、染料木黄酮三种异黄酮苷元的热损失,其中CMC效果最理想,海藻酸钠次之,黄原胶最差。食品胶的复配能够减少豆浆中异黄酮苷元热损失。CMC/海藻酸钠组合明显好于CMC/黄原胶和黄原胶/海藻酸钠两种组合,当CMC/海藻酸钠=3∶2时,在热处理条件为95℃,10min条件下,各异黄酮苷元热损失最少,黄豆苷元含量提高9·83%,大豆黄素12·67%,染料木黄酮18·63%。在三种食品胶共同复配组合中,CMC/黄原胶/海藻酸钠(4∶3∶3)组合的效果最好,黄豆苷元含量提高9·3%,大豆黄素10·13%,染料木黄酮18·26%。

关键词：食品胶高效液相色谱法异黄酮苷元热稳定性

C_(18)柱层析法提取大豆胚轴中异黄酮苷元

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食品科学 2004年第4期25卷 136-138页

作者：全吉淑尹学哲工藤重光延边大学医学院生物化学教研室延吉133000 延边大学医学院附属医院延吉133000 日本东北食效科学研究所

从大豆胚轴提取总糖苷后,采用C18反相柱层析法分离大豆异黄酮糖苷,再将其水解制备成异黄酮苷元。产品经薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)分析异黄酮苷元纯度和含量。

关键词： C18柱层析法大豆胚轴异黄酮苷元提取分离纯度高效液相色谱法

反相高效液相色谱法测定酱油制品中两种异黄酮苷元的含量

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中药材 2008年第1期31卷 154-156页

作者：马方励唐青涛杨宜婷南方李锦记有限公司广东广州510665

建立了反相高效液相色谱测定酱油制品中异黄酮苷元的方法。结果表明,该方法适用于酱油制品及其它大豆制品中异黄酮苷元的测定。

关键词：反相高效液相色谱梯度洗脱异黄酮苷元

SFE-CO2技术萃取分离蛋白乳清废液中异黄酮苷元的研究

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河南工业大学学报（自然科学版） 2009年第3期30卷 7-11页

作者：毛璞肖咏梅孟冬谷克仁刘宁宇河南工业大学化学化工学院河南郑州450001 河南天方药业股份有限公司河南驻马店463000

以分离蛋白乳清废液为原料进行水解,用超临界CO2技术提取水解混合物中的异黄酮苷元.结果表明:乙醇为夹带剂、夹带剂添加比例8%,乙醇/水的体积比70%,萃取压力30MPa,萃取温度60℃,萃取时间120 min,异黄酮的提取率为79.2%.以ESI/MS确定了... 详细信息

以分离蛋白乳清废液为原料进行水解,用超临界CO2技术提取水解混合物中的异黄酮苷元.结果表明:乙醇为夹带剂、夹带剂添加比例8%,乙醇/水的体积比70%,萃取压力30MPa,萃取温度60℃,萃取时间120 min,异黄酮的提取率为79.2%.以ESI/MS确定了主要提取的异黄酮苷元为大豆苷元和染料木素.

关键词：超临界二氧化碳萃取分离蛋白乳清废液异黄酮苷元

大豆异黄酮苷元的提取及其抗血浆脂蛋白氧化作用

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食品科技 2008年第1期33卷 126-128页

作者：全吉淑沈明花柳明洙尹学哲延边大学医学院延边大学医学院延吉133000

从大豆胚轴提取总糖苷后,采用C18反相柱层析法分离大豆异黄酮糖苷,再将其水解制备成异黄酮苷元,并对大豆异黄酮苷元的抗脂蛋白氧化作用进行了实验研究。12名健康受试者空腹食用大豆异黄酮苷元前后抽取静脉血制备血浆脂蛋白,观察血浆脂... 详细信息

从大豆胚轴提取总糖苷后,采用C18反相柱层析法分离大豆异黄酮糖苷,再将其水解制备成异黄酮苷元,并对大豆异黄酮苷元的抗脂蛋白氧化作用进行了实验研究。12名健康受试者空腹食用大豆异黄酮苷元前后抽取静脉血制备血浆脂蛋白,观察血浆脂蛋白过氧化程度及氧化易感性的变化。结果表明,大豆异黄酮苷元食用后受试者血浆VLDL、LDL和HDL过氧化脂质水平明显降低;在体外进行氧化修饰时,LDL氧化延滞时间明显延长,LDL氧化易感性下降。大豆异黄酮苷元可增强血浆抗氧化能力,尤其增强LDL抗氧化修饰能力,因此能够起到防治心血管疾病的积极作用。

关键词：异黄酮苷元过氧化脂质氧化易感性血浆脂蛋白