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金黄色葡萄球菌异质性耐药研究进展

畜牧兽医学报 2024年第4期55卷 1432-1445页

作者：和晓兰赵艳坤孟璐刘慧敏高姣姣郑楠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(乌鲁木齐)新疆农产品质量安全实验室乌鲁木齐830091

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)是人类和动物感染的常见病原菌。近年来,金黄色葡萄球菌已经对多种抗菌药物出现耐药性,关于金黄色葡萄球菌异质性耐药的研究也被频繁报道。异质性耐药现象是指存在异质性细菌种群,其中一个亚... 详细信息

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)是人类和动物感染的常见病原菌。近年来,金黄色葡萄球菌已经对多种抗菌药物出现耐药性,关于金黄色葡萄球菌异质性耐药的研究也被频繁报道。异质性耐药现象是指存在异质性细菌种群,其中一个亚群或几个亚群与主要种群相比表现出更高水平的抗菌药物耐药性。该定义反映出异质性耐药现象具有很多特点,包括克隆性、稳定性、不同亚群的耐药水平以及异质性耐药亚群的频率应在10^(-7)及以上。异质性耐药可看成是敏感表型向耐药表型转化的中间阶段,往往导致临床治疗的失败。本文对异质性耐药的定义、检测方法等进行了介绍,并综述了金黄色葡萄球菌对糖肽类、磺胺类、β-内酰胺类和其他抗菌药物异质性耐药的流行情况及异质性耐药机制的研究,旨在加强对金黄色葡萄球菌异质性耐药的认识,以期为学者了解金黄色葡萄球菌异质性耐药流行情况及机制提供参考。

关键词：金黄色葡萄球菌异质性耐药抗菌药物流行情况机制

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奶源异质性耐药大肠杆菌及其耐药亚群特性研究

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畜牧兽医学报 2024年

作者：高姣姣郑楠邵伟陈贺马宪兰赵艳坤新疆农业大学动物科学学院新疆肉乳用草食动物营养实验室新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(乌鲁木齐)新疆农产品质量安全实验室中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室

旨在探究奶源大肠杆菌是否存在异质性耐药现象，对异质性耐药大肠杆菌及其耐药亚群的生物学特性进行研究，探究其可能的异质性耐药机制。本研究采用微量肉汤稀释法测定从生牛乳中分离得到的1株大肠杆菌 D1的最低抑菌浓度（minimuminhibi... 详细信息

旨在探究奶源大肠杆菌是否存在异质性耐药现象，对异质性耐药大肠杆菌及其耐药亚群的生物学特性进行研究，探究其可能的异质性耐药机制。本研究采用微量肉汤稀释法测定从生牛乳中分离得到的1株大肠杆菌 D1的最低抑菌浓度（minimuminhibitoryconcentration，MIC），采用K-B纸片扩散法对大肠杆菌的异质性耐药情况进行初筛，采用菌落谱型分析（populationanalysisprofile，PAP）进行确证，并通过耐药稳定性测试和生物膜试验探究大肠杆菌的异质性耐药特征，最后通过全基因组测序和重测序分析产生异质性耐药的机制。结果发现，该株大肠杆菌对头孢噻吩、利福昔明、磺胺异恶唑耐药，对其余抗生素表现为敏感，K-B纸片扩散法筛出2种大肠杆菌-抗菌药物异质性耐药组合。PAP确证显示，D1-阿莫西林-克拉维酸的MIC/最高非抑菌浓度（Maximumnoninhibitoryconcentration，MNIC）的比值为8，耐药亚群的发生频率为 2.45×10-6，确证为多西环素异质性耐药菌株。传代稳定性表明耐药亚群不能稳定遗传，而生长试验不存在生长滞后现象，耐药亚群的生物膜产量极显著大于亲本菌株。全基因组测序结果发现，耐药亚群与亲本菌株之间存在基因突变，而突变基因 txR 是一种特定的转录调节因子，可能导致大肠杆菌对多西环素产生异质性耐药。（结论）奶源大肠杆菌存在多西环素异质性耐药的现象，提示临床中应合理使用多西环素抗生素，因此在使用多西环素进行临床治疗时应更加注意异质性耐药的发生，需采用有效的检测方法，为临床防控和合理使用抗生素提供指导。

关键词：奶源大肠杆菌异质性耐药耐药亚群全基因组

肺炎克雷伯氏菌对氟喹诺酮类抗生素异质性耐药研究

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微生物学杂志 2024年

作者：张梦雅张志清李文茹谢小保广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室/农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室/农业农村部农业微生物组学重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室仲恺农业工程学院轻工食品学院

肺炎克雷伯氏菌的异质性耐药现象可导致临床治疗失败,研究临床分离肺炎克雷伯氏菌对氟喹诺酮类抗生素异质性耐药情况,可为临床感染患者的及时治疗奠定理论基础,为寻求有效靶点提供参考依据。本研究收集了100株临床分离的肺炎克雷伯氏菌... 详细信息

肺炎克雷伯氏菌的异质性耐药现象可导致临床治疗失败,研究临床分离肺炎克雷伯氏菌对氟喹诺酮类抗生素异质性耐药情况,可为临床感染患者的及时治疗奠定理论基础,为寻求有效靶点提供参考依据。本研究收集了100株临床分离的肺炎克雷伯氏菌,采用微量肉汤稀释法、Kirby-Bauer（K-B）药敏实验、菌群谱型分析（population analysis profile,PAP）、耐药稳定性实验以及生长实验,完成肺炎克雷伯氏菌对氟喹诺酮类抗生素的异质性耐药菌株的筛选及特征分析。结果显示,微量肉汤稀释法和K-B药敏实验初筛得到肺炎克雷伯氏菌对环丙沙星、左氧氟沙星的异质性耐药率分别为19%、21%。PAP实验确证后左氧氟沙星异质性耐药菌株有13株,占总菌株的13%,其耐药亚群的发生频率为1×10-6～7×10-5;挑选KS42、KR9菌株的各自3个耐药亚群,并进行了无抗生素条件下的耐药稳定性实验,耐药亚群的耐药水平均稳定遗传;生长实验结果表明,异质性耐药菌株KS42的3个耐药亚群及KR9耐药亚群KR9（3）无适应成本,但KR9耐药亚群KR9（1）、KR9（2）有适应成本。本研究中肺炎克雷伯氏菌对左氧氟沙星异质性耐药率相对较低,但耐药亚群的发生频率和耐药水平较高,且耐药亚群耐药水平均稳定遗传。因此在使用该类抗生素治疗肺炎克雷伯氏菌感染时,应更加注意异质性耐药现象的发生,防止治疗失败。

关键词：肺炎克雷伯氏菌异质性耐药左氧氟沙星适应成本耐药稳定性

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铜绿假单胞菌对环丙沙星异质性耐药的研究

上海交通大学学报（医学版） 2022年第7期42卷 839-845页

作者：李聪聪姚玉峰张传珍上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海200025

目的·探究铜绿假单胞菌对环丙沙星的异质性耐药机制。方法·通过圆盘扩散法对临床分离鉴定的铜绿假单胞菌(n=227)的环丙沙星异质性耐药进行初筛,同时根据抑菌圈直径对这些菌株的耐药性进行划分。通过无抗生素条件下连续传代后测定敏感... 详细信息

目的·探究铜绿假单胞菌对环丙沙星的异质性耐药机制。方法·通过圆盘扩散法对临床分离鉴定的铜绿假单胞菌(n=227)的环丙沙星异质性耐药进行初筛,同时根据抑菌圈直径对这些菌株的耐药性进行划分。通过无抗生素条件下连续传代后测定敏感性来判断异质性耐药菌株的稳定性。利用群体谱型分析法(population analysis profiling,PAP)对初筛结果进行验证。通过全基因测序分析异质性耐药的产生机制,最后测定比较不同突变类型的耐药亚群对不同抗生素敏感性的影响。结果·在圆盘扩散法中,227株临床菌株中有142株(62.6%)对环丙沙星表现为敏感,26株(11.5%)表现为中介,59株(26.0%)表现为耐药。该方法筛选得到18株潜在异质性耐药菌株,其中11株经PAP及稳定性检测后确定为稳定异质性耐药菌。随机挑选的18株初筛鉴定为非异质性耐药的菌株中,有3株经PAP鉴定为异质性耐药菌株。通过全基因组测序发现11株耐药亚群中,有8株发生mexS突变,2株发生gyrA突变;除此之外,基因fleQ、PA2632和PAKAF_02255均分别在1株菌株中发生突变。mexS与gyrA这2类突变型均导致莫西沙星耐药,部分mexS突变株同时对氯霉素与亚胺培南耐药。结论·铜绿假单胞菌对环丙沙星的异质性耐药率为4.8%(11/227)。圆盘扩散法作为铜绿假单胞菌异质性耐药筛选方法灵敏度较低,存在一定假阴性率。mexS突变是耐药亚群中最常见的突变类型,该突变可能通过使外排泵MexEF-OprN过表达来介导对环丙沙星在内的多种抗生素耐药。

关键词：铜绿假单胞菌环丙沙星异质性耐药圆盘扩散法群体谱型分析

雷氏普罗威登斯菌对碳青霉烯类耐药与氨基糖苷类异质性耐药研究

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中国抗生素杂志 2023年第7期48卷 826-832页

作者：柳朔怡顾全李会平戚桂杰鲁程绯唐山市妇幼保健院产前诊断遗传病诊断中心唐山063000 唐山市人民医院唐山063000

目的分析雷氏普罗威登斯菌对碳青霉烯类药物耐药机制与氨基糖苷类药物异质性耐药现象的探索。方法对2016—2021年收集的4株多重耐药的雷氏普罗威登斯菌(multidrug resistant Providencia Rettgeri,MRPRE)临床分离株的耐药性和携带的耐... 详细信息

目的分析雷氏普罗威登斯菌对碳青霉烯类药物耐药机制与氨基糖苷类药物异质性耐药现象的探索。方法对2016—2021年收集的4株多重耐药的雷氏普罗威登斯菌(multidrug resistant Providencia Rettgeri,MRPRE)临床分离株的耐药性和携带的耐药基因进行分析。采用异质性耐药菌谱分析与亚抑菌浓度抗生素诱导实验探索庆大霉素异质性耐药菌株对氨基糖苷类和碳青霉烯类抗生素的适应性耐药。结果本研究共收集4株MRPRE,其中3株检出bla_(NDM-1)基因,对碳青霉烯类高度耐药,同时对第一、二、三代头孢菌素、氨曲南、复方磺胺甲恶唑、喹诺酮类药物耐药。1株未检出碳青霉烯酶基因,但对氨基糖苷类抗生素异质性耐药,在亚抑菌浓度庆大霉素诱导下,庆大霉素MIC值由8μg/mL上升至64μg/mL,亚胺培南MIC值由2μg/mL上升至8μg/mL,出现适应性耐药。结论雷氏普罗威登斯菌可携带bla_(NDM-1)对碳青霉烯类抗生素高度耐药,同时表现对多种抗生素的多重耐药。异质性耐药菌株在亚抑菌浓度庆大霉素诱导下可出现庆大霉素与亚胺培南的适应性耐药。

关键词：雷氏普罗威登斯菌碳青霉烯酶新德里金属酶异质性耐药

金黄色葡萄球菌异质性耐药机制及实验室检测技术

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中国感染控制杂志 2022年第12期21卷 1249-1256页

作者：韩塔拉王俊瑞内蒙古医科大学第一临床医学院内蒙古呼和浩特010050 内蒙古医科大学附属医院检验科内蒙古呼和浩特010050 内蒙古自治区临床病原微生物重点实验室内蒙古呼和浩特010050

异质性耐药是一种特殊的细菌耐药类型,常表现为同一克隆来源的不同细菌亚群对某种抗菌药物表现出不一致的耐药特征,大多数亚群对某种抗菌药物敏感,而少部分亚群对其耐药或高度耐药。异质性耐药分离株常会导致特定抗菌药物抗感染治疗失... 详细信息

异质性耐药是一种特殊的细菌耐药类型,常表现为同一克隆来源的不同细菌亚群对某种抗菌药物表现出不一致的耐药特征,大多数亚群对某种抗菌药物敏感,而少部分亚群对其耐药或高度耐药。异质性耐药分离株常会导致特定抗菌药物抗感染治疗失败。针对异质性耐药菌较为深入的研究主要集中于革兰阴性菌,革兰阳性球菌的相关报道较少。近年有研究报道万古霉素、利奈唑胺、苯唑西林等多种类型抗菌药物异质性耐药金黄色葡萄球菌分离株出现,但其实际临床意义尚待进一步评估。此文对金黄色葡萄球菌异质性耐药机制和检测技术最新进展进行综述,为细菌异质性耐药机制研究和新型检测技术研发提供新的思路。

关键词：葡萄球菌金黄色葡萄球菌异质性耐药耐药机制检测技术

碳青霉烯类异质性耐药铜绿假单胞菌的耐药机制研究

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中国抗生素杂志 2022年第9期47卷 933-938页

作者：乔涵胡辛欣聂彤颖杨信怡游雪甫李聪然中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所抗感染药物研究北京市重点实验室北京100050 中国食品药品检定研究院北京102629

目的筛选铜绿假单胞菌临床分离株的碳青霉烯类异质性耐药菌株,并分析相关机制。方法采用E-test纸条法、群体分析法(PAP)法对30株铜绿假单胞菌临床分离株进行亚胺培南异质性耐药的初筛和复筛、肉汤微量稀释法测定异质性耐药菌株对亚胺培... 详细信息

目的筛选铜绿假单胞菌临床分离株的碳青霉烯类异质性耐药菌株,并分析相关机制。方法采用E-test纸条法、群体分析法(PAP)法对30株铜绿假单胞菌临床分离株进行亚胺培南异质性耐药的初筛和复筛、肉汤微量稀释法测定异质性耐药菌株对亚胺培南及其他药物的MIC值、全基因组测序分析碳青霉烯类异质性耐药菌株的可能耐药机制。结果通过E-test纸条法和PAP法鉴别筛选出8株亚胺培南异质性耐药铜绿假单胞菌,检测发现异质性耐药菌株对多黏菌素B、头孢他啶、美罗培南耐药率较高,对环丙沙星等更敏感。全基因组测序分析发现碳青霉烯类异质性耐药铜绿假单胞菌无可确证的基因突变,但可能与延伸因子P基因有关。

关键词：异质性耐药铜绿假单胞菌亚胺培南碳青霉烯类耐药机制

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大肠埃希菌异质性耐药的研究进展

生物技术通报 2022年第9期38卷 59-71页

作者：赵艳坤刘慧敏孟璐王成王加启郑楠新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(乌鲁木齐)新疆农产品质量安全实验室乌鲁木齐830091 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

大肠埃希菌(Escherichia coli)是人类和动物中常见细菌病原体,***已对多种抗菌药物产生耐药,且由于抗菌药物选择压力越来越大,致使菌株的适应性和致病性更强,耐药的传播更快、定植率更高,给全球流行病学和临床治疗带来极大的挑战。近年... 详细信息

大肠埃希菌(Escherichia coli)是人类和动物中常见细菌病原体,***已对多种抗菌药物产生耐药,且由于抗菌药物选择压力越来越大,致使菌株的适应性和致病性更强,耐药的传播更快、定植率更高,给全球流行病学和临床治疗带来极大的挑战。近年来,***的异质性耐药(heteroresistance,HR)相关研究相继被报道,异质性耐药是指细菌中的同源亚群对某种抗菌药物表现出不同的敏感性,是敏感菌进化为耐药菌的中间阶段,不同于完全耐药,异质性耐药在临床上不易及时检出,常导致临床抗菌药物治疗失败。因此,为有效防控***感染及耐药的演变,深入剖析***异质性耐药的流行特征及可能的机制尤为重要,本文就***的异质性耐药研究进行了梳理,并对异质性耐药从表型特征、检测方法和可能的机制等方面进行了概述。旨在加强对***异质性耐药的认识和研究,以期为全面了解***耐药过程及发生机制、优化抗菌药物使用策略、减缓完全耐药菌种的出现提供参考。

关键词：大肠埃希菌抗菌药物异质性耐药机制

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铜绿假单胞菌对头孢他啶的异质性耐药研究

铜绿假单胞菌对头孢他啶的异质性耐药研究

作者：李金玲浙江海洋大学

学位级别：硕士

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种革兰氏阴性条件致病菌,是引起慢性感染的常见病原菌之一。异质性耐药(Heteroresistance)是细菌中的不同细胞亚群对抗生素的敏感性不同,是细菌由敏感菌株发展成耐药菌株的中间阶段。铜绿... 详细信息

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种革兰氏阴性条件致病菌,是引起慢性感染的常见病原菌之一。异质性耐药(Heteroresistance)是细菌中的不同细胞亚群对抗生素的敏感性不同,是细菌由敏感菌株发展成耐药菌株的中间阶段。铜绿假单胞菌异质性耐药在临床上不易检出,影响选择合适的抗生素实现成功治疗,导致临床应用抗生素的失效,对病人健康带来威胁。本研究以临床分离的50株铜绿假单胞菌为实验菌株,以头孢他啶为实验材料,采用微生物学、转录组学及生理生化在内的多种技术手段,研究了铜绿假单胞菌对头孢他啶异质性耐药的表型特征及作用机制。论文主要取得了以下研究结果:1.研究发现临床分离铜绿假单胞菌对头孢他啶存在异质性耐药现象。50株铜绿假单胞菌经头孢他啶药敏测定表现为37株敏感,占比74%(37/50);1株表现为中介,占比2%(1/50);12株耐药,占比24%(12/50)。经K-B及PAP实验综合分析确证,4株铜绿假单胞菌对头孢他啶异质性耐药,占比8%(4/50),异质性耐药亚群的发生频率为1×10-1.2×10。2.头孢他啶异质性耐药铜绿假单胞菌耐药表型可稳定遗传。通过分离异质性耐药亚群并测定其生长速率,同时在无抗生素条件下进行传代培养并测定其最小抑菌浓度(MIC),发现耐药亚群无生长适应成本,耐药表型能稳定遗传。3.头孢他啶异质性耐药铜绿假单胞菌的异质性耐药机制复杂。通过对典型头孢他啶异质性耐药菌株PAS56进行转录组学分析,发现其异质性耐药涉及到孔蛋白Orp D相关基因的表达下调,外排泵系统Mex XY-Orp M、Mex AB-Orp M的相关基因表达上调,β-内酰胺酶Amp C编码基因的表达上调,青霉素结合蛋白PBP2相关基因表达上调,生物被膜合成相关基因表达上调及脂多糖生物合成相关基因的表达上调。综上,临床分离的铜绿假单胞菌对头孢他啶异质性耐药菌株占比高达8%,耐药亚群的发生频率为1×10-1.2×10,无生长适应成本,耐药表型能稳定遗传。典型异质性耐药菌株PAS56的异质性耐药机制涉及到孔蛋白的表达下调、外排泵系统、β-内酰胺水解酶、青霉素结合蛋白、生物被膜及脂多糖的表达上调。

关键词：铜绿假单胞菌头孢他啶异质性耐药