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双标多测法测定补骨脂中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素的含量

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药物分析杂志 2020年第10期40卷 1799-1807页

作者：刘军玲张亚中程世云孙磊魏锋马双成安徽省食品药品检验研究院合肥230051 中国食品药品检定研究院北京100050

目的:建立双标多测(TRSDMC)法同时测定补骨脂中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素的含量,在节约对照品同时,更好地控制该品种质量。方法:采用HPLC法测定,使用C18柱,流动相为0.4%磷酸溶液-甲醇(44∶56),流速1 mL·min-1,柱温35... 详细信息

目的:建立双标多测(TRSDMC)法同时测定补骨脂中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素的含量,在节约对照品同时,更好地控制该品种质量。方法:采用HPLC法测定,使用C18柱,流动相为0.4%磷酸溶液-甲醇(44∶56),流速1 mL·min-1,柱温35℃,检测波长285 nm,进样量5μL;以补骨脂苷和补骨脂素为对照,使用DRS origin软件进行双标线性校正预测特征峰的保留时间,并通过替代对照品法获得相对校正因子,计算所得结果与外标法进行比较。结果:通过DRS origin软件拟合的标准曲线预测待测化合物准确,并结合校正因子计算所得含量与外标法测定结果比较,绝对偏差均95.0%。20批样品中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素含量范围分别为5.0~22.6、16.3~3.0、4.6~13.6、1.8~8.1 mg·g-1。结论:双标线性校正预测保留时间与相对保留时间法相比,前者保留时间预测结果准确度高,色谱柱的适用范围广,方法简便、准确且经济实用,为补骨脂多指标含量测定提供了新的思路和方法。

关键词：补骨脂香豆素类成分补骨脂苷异补骨脂苷补骨脂素异补骨脂素双标多测法(TRSDMC) 替代对照品法 DRS origin软件高效液相色谱

补骨脂苷和异补骨脂苷与牛血清白蛋白相互作用研究

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天津中医药 2018年第6期35卷 460-465页

作者：郭家鼎郝佳李梦荣王誉程刘二伟天津中医药大学中医药研究院天津300193 天津市中药化学与分析重点实验室天津300193

[目的]研究补骨脂苷(PO)和异补骨脂苷(IPO)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。[方法]通过紫外吸收光谱法、荧光淬灭光谱法、同步荧光光谱法、三维荧光光谱法分析PO和IPO对牛血清白蛋白的淬灭机制、结合常数、结合位点数及构象影响。[结果... 详细信息

[目的]研究补骨脂苷(PO)和异补骨脂苷(IPO)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。[方法]通过紫外吸收光谱法、荧光淬灭光谱法、同步荧光光谱法、三维荧光光谱法分析PO和IPO对牛血清白蛋白的淬灭机制、结合常数、结合位点数及构象影响。[结果]PO和IPO对牛血清白蛋白产生了静态淬灭作用,两种药物与BSA有较弱的结合,在BSA上的结合位点均为位点Ⅱ,并且对BSA上色氨酸氨基酸残(Trp)基微环境产生了微弱的影响。[结论]借助光谱法揭示了PO和IPO与BSA相互作用的机制。

关键词：补骨脂苷异补骨脂苷紫外吸收光谱法荧光光谱法

制备高效液相色谱法分离补骨脂中的补骨脂苷和异补骨脂苷

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天津中医药大学学报 2009年第3期28卷 136-137页

作者：郭锦明刘亚男王跃飞戚爱棣韩立峰天津中医药大学 300193 天津中医药大学中医药研究院现代中药发现与制剂技术教育部工程研究中心300193

[目的]建立制备高效液相色谱法(HPLC)分离纯化补骨脂中补骨脂苷和异补骨脂苷的方法。[方法]补骨脂药材用乙酸乙酯提取后再经甲醇提取,浓缩甲醇提取液成浸膏,水混悬浸膏,过AB-8大孔树脂,收集水洗脱部分,处理后进行高效液相分离制备。采... 详细信息

[目的]建立制备高效液相色谱法(HPLC)分离纯化补骨脂中补骨脂苷和异补骨脂苷的方法。[方法]补骨脂药材用乙酸乙酯提取后再经甲醇提取,浓缩甲醇提取液成浸膏,水混悬浸膏,过AB-8大孔树脂,收集水洗脱部分,处理后进行高效液相分离制备。采用汉邦C18制备柱(20mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%甲酸水(15:85);体积流量:8.0mL/min;检测波长:246nm;柱温:室温。[结果]从补骨脂中分离得到了补骨脂苷和异补骨脂苷两个化合物。[结论]该方法简便、快速,分离得到的化合物采用HPLC归一化法定量,质量分数大于96%,可用做补骨脂苷和异补骨脂苷的制备。

关键词：补骨脂苷异补骨脂苷制备高效液相色谱

补骨脂的质量特征解析及其在减毒工艺中的应用

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中草药 2024年第8期55卷 2784-2791页

作者：张潇予王丹妮柴欣于卉娟崔英王跃飞天津中医药大学中医药研究院现代中药创制全国重点实验室组分中药国家重点实验室天津市中药化学与分析重点实验室天津301617 现代中医药海河实验室天津301617

补骨脂Psoraleae Fructus为临床常用中药,是补益类中成药或方剂中的重要组成药味。近年来,补骨脂的肝毒性对其临床用药安全构成威胁,阻碍了含补骨脂方剂的中药新药开发,限制了补骨脂及其中成药的临床应用。通过对补骨脂的化学成分及药... 详细信息

补骨脂Psoraleae Fructus为临床常用中药,是补益类中成药或方剂中的重要组成药味。近年来,补骨脂的肝毒性对其临床用药安全构成威胁,阻碍了含补骨脂方剂的中药新药开发,限制了补骨脂及其中成药的临床应用。通过对补骨脂的化学成分及药理活性,果皮和种子中的化学成分分布特征,在生长、贮藏、加工炮制过程中补骨脂香豆素类成分转化特征,香豆素类成分体内代谢转化特征及潜在的肝毒性成分等质量特征及其在补骨脂减毒工艺中的应用分析,为补骨脂及含补骨脂中成药的提取工艺、质量标准研究提供参考。

关键词：补骨脂药理活性肝毒性减毒工艺补骨脂素异补骨脂素补骨脂苷异补骨脂苷

基于斑马鱼多模态评价杜仲配伍补骨脂对其香豆素成分的代谢及毒/效影响

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中草药 2023年第5期54卷 1449-1460页

作者：高一波李佳妍石子琪宁青韦英杰南京中医药大学附属中西医结合医院江苏南京210028 江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028 南京中医药大学第三临床医学院江苏南京210028 烟台毓璜顶医院药学部山东烟台264000

目的用斑马鱼多模态评价杜仲配伍补骨脂对其香豆素糖苷的代谢及毒/效影响。方法用受精后1~6 d(day after fertilization,dpf)的斑马鱼评价杜仲提取物(lignan extract of Eucommiae Cortex,LEEC)配伍补骨脂香豆素提取物(coumarin extract... 详细信息

目的用斑马鱼多模态评价杜仲配伍补骨脂对其香豆素糖苷的代谢及毒/效影响。方法用受精后1~6 d(day after fertilization,dpf)的斑马鱼评价杜仲提取物(lignan extract of Eucommiae Cortex,LEEC)配伍补骨脂香豆素提取物(coumarin extract of Psoraleae Fructus,CEPF)以及代表成分松脂醇二葡萄糖苷(pinoresinol diglucoside,PDG)配伍补骨脂苷(psoralenoside,PSS)和异补骨脂苷(isopsoralenoside,IPSS)的安全性,观察斑马鱼胚胎发育情况,包括胚胎致畸、致死情况,并计算斑马鱼半数死亡浓度(half lethal concentration,LC50);用1~6 dpf斑马鱼暴露于上述配伍组合物,分析PSS和/或IPSS及其代谢物补骨脂素(psoralen,PS)和/或异补骨脂素(isopsoralen,IPS)的动态变化;用25μmol/L泼尼松龙诱导斑马鱼骨质疏松模型,采用茜素红对培养至8 dpf的各给药组斑马鱼幼鱼骨骼染色,进行显微观察、数码成像,并用图像软件定量分析骨骼染色区域来评价上述配伍组合抗骨质疏松活性。结果LEEC配伍CEPF及PDG分别配伍PSS和IPSS,可改善斑马鱼心包、卵黄囊等形态畸变,减少鱼死亡率,提高鱼致畸或致死浓度;能明显减慢PSS和IPSS脱糖基转化为潜在肝损伤代谢产物PS和IPS的速率,减慢毒性代谢物的产生是杜仲配伍补骨脂减毒的重要因素;LEEC配伍CEPF以及PDG分别配伍PSS和IPSS可显著增加斑马鱼头骨累积光密度值,提示具一定增效作用。结论采用斑马鱼多模态高效评价了杜仲配伍对CEPF及补骨脂香豆素代表成分的代谢与毒/效作用的影响,为杜仲配伍补骨脂的减毒、增效作用研究提供高效的方法与思路。

关键词：斑马鱼补骨脂杜仲毒性代谢骨质疏松补骨脂素异补骨脂素补骨脂苷异补骨脂苷松脂醇二葡萄糖苷

补骨脂炮制前后水煎液致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤作用比较

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中草药 2022年第5期53卷 1434-1441页

作者：符映均吴育梅春梅华政颖李伟东南京中医药大学南通附属医院药剂科江苏南通226000 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

目的探讨补骨脂炮制前后致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤的差异。方法采用高效液相色谱仪检测补骨脂炮制前后化学成分含量变化。雌性ICR小鼠连续30 d ig生、盐补骨脂水煎液,末次给药24 h后,取血清,采用全自动生化仪检测肝损伤相关指标丙... 详细信息

目的探讨补骨脂炮制前后致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤的差异。方法采用高效液相色谱仪检测补骨脂炮制前后化学成分含量变化。雌性ICR小鼠连续30 d ig生、盐补骨脂水煎液,末次给药24 h后,取血清,采用全自动生化仪检测肝损伤相关指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平;取肝脏、脾脏和肾脏,称定质量并计算脏器指数,采用苏木素-伊红(HE)染色法进行肝脏病理组织学检查;采用ELISA法检测血清中雌二醇(estradiol,E2)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肝脏中法尼醇受体(farnesoid X receptor,FXR)、雌激素硫酸转移酶1E1(sulfotransferase 1E1,SULT1E1)和E2含量。结果补骨脂经盐炙后补骨脂苷、异补骨脂苷、新补骨脂异黄酮含量下降,其余8种成分含量均升高,其中补骨脂素、异补骨脂素、corylifol A升高较为明显。雌性小鼠ig生、盐补骨脂水煎液30 d后出现生殖器损伤,小鼠阴道口红肿,有水样浸润。与对照组比较,生、盐补骨脂组小鼠血清ALT、AST、ALP活性及DBIL、TBIL、TBA水平均显著升高(P补骨脂致肝损伤较生品更严重;肝脏FXR、SULT1E1含量显著降低(P补骨脂与生补骨脂比较,IL-6升高更明显,FXR、SULT1E1下降更明显。结论补骨脂素、异补骨脂素和Corylifol A可能是补骨脂药效成分同时也可能是其主要毒性成分,盐补骨脂较生补骨脂更易造成肝损伤。

关键词：补骨脂盐炙胆汁瘀积性肝损伤雌激素样作用补骨脂素异补骨脂素 corylifol A 补骨脂苷异补骨脂苷新补骨脂异黄酮

UHPLC法分析补肺活血胶囊中12种指标成分

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中草药 2022年第13期53卷 3991-3996页

作者：李全任慧郭盛王恒斌耿婉丽钱大玮段金廒雷允上药业集团有限公司江苏苏州215003 南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京210023 广东雷允上药业有限公司广东云浮527300

目的建立超高效液相色谱法(UHPLC)同时测定补肺活血胶囊(Bufei Huoxue Capsules,BHC)中12种指标成分没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、补骨脂苷、芍药苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、补骨脂素、异补骨脂素、苯... 详细信息

目的建立超高效液相色谱法(UHPLC)同时测定补肺活血胶囊(Bufei Huoxue Capsules,BHC)中12种指标成分没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、补骨脂苷、芍药苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、补骨脂素、异补骨脂素、苯甲酰芍药苷的含量。方法采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min,柱温35℃,进样量4μL,检测波长246 nm。结果BHC中12种指标成分在18min内色谱峰分离良好,没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、补骨脂苷、芍药苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、补骨脂素、异补骨脂素和苯甲酰芍药苷分别在0.38~195.20(r=0.9999)、0.17~21.44(r=0.9996)、0.85~433.80(r=0.9999)、0.68~345.60(r=0.9999)、1.11~566.60(r=0.9998)、0.47~241.40(r=0.9999)、0.08~39.36(r=0.9998)、0.05~26.16(r=0.9999)、0.03~16.42(r=0.9999)、0.25~129.10(r=0.9998)、0.26~133.10(r=0.9997)、0.09~47.28μg/mL(r=0.9999)线性关系良好;精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合分析要求。11批补肺活血胶囊中没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、补骨脂苷、芍药苷、异补骨脂苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、补骨脂素、异补骨脂素和苯甲酰芍药苷平均质量分数分别为2.6242、0.2224、16.4099、7.4595、18.9742、7.8875、0.5057、0.1099、0.1707、1.3647、1.1700、0.2036 mg/g。结论所建立的方法分析速度快、准确度高、重复性好,为BHC质量标准提升提供了方法支撑。

关键词：补肺活血胶囊超高效液相色谱法黄芪赤芍补骨脂没食子酸氧化芍药苷芍药内酯苷补骨脂苷芍药苷异补骨脂苷毛蕊异黄酮苷芒柄花苷毛蕊异黄酮补骨脂素异补骨脂素苯甲酰芍药苷

补骨脂的质量特征解析及其在减毒工艺中的应用

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中草药 2023年

作者：张潇予王丹妮柴欣于卉娟崔英王跃飞天津中医药大学中医药研究院现代中药创制全国重点实验室组分中药国家重点实验室天津市中药化学与分析重点实验室现代中医药海河实验室

补骨脂为临床常用中药，是补益类中成药或方剂中的重要组成药味。近年来，补骨脂的肝毒性对其临床用药安全构成威胁，阻碍了含补骨脂方剂的中药新药开发，限制了补骨脂及其中成药的临床应用。通过对补骨脂的化学成分及药理活性，果皮和... 详细信息

补骨脂为临床常用中药，是补益类中成药或方剂中的重要组成药味。近年来，补骨脂的肝毒性对其临床用药安全构成威胁，阻碍了含补骨脂方剂的中药新药开发，限制了补骨脂及其中成药的临床应用。通过对补骨脂的化学成分及药理活性，果皮和种子中的化学成分分布特征，在生长、贮藏、加工炮制过程中补骨脂香豆素类成分转化特征，香豆素类成分体内代谢转化特征及潜在的肝毒性成分等质量特征，及其在补骨脂减毒工艺中的应用，，为补骨脂及含补骨脂中成药的提取工艺、质量标准研究提供参考。

关键词：补骨脂药理活性肝毒性减毒工艺补骨脂素异补骨脂素补骨脂苷异补骨脂苷

参仙升脉口服液HPLC指纹图谱研究及多指标成分定量分析

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药物评价研究 2024年第2期47卷 353-359页

作者：宗时宇张红李晔孙婷婷陈衍斌刘峰刘洋陕西省中医药研究院陕西西安710003 陕西步长制药有限公司陕西西安710075

目的建立参仙升脉口服液的特征指纹图谱及多指标成分定量测定方法。方法采用Ultimate LP-C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈和0.2%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长为270nm(0~16min,24~38min)、210 nm(16~24 min,38~100mi... 详细信息

目的建立参仙升脉口服液的特征指纹图谱及多指标成分定量测定方法。方法采用Ultimate LP-C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈和0.2%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长为270nm(0~16min,24~38min)、210 nm(16~24 min,38~100min),体积流量为1.0mL·min^(-1),柱温为30°C,进样量为10μL。应用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)对10批参仙升脉口服液进行分析,建立HPLC指纹图谱,并测定10个指标成分的含量。结果建立的指纹图谱确定共有峰28个,指认了其中12个,10批样品间相似度均在0.934以上。定量分析的10个成分分别为丹参素、盐酸伪麻黄碱、补骨脂苷、异补骨脂苷、迷迭香酸、丹酚酸B、补骨脂素、异补骨脂素、朝藿定C和淫羊藿苷,质量浓度分别为1.218~2.781、 0.333~0.702、 2.391~4.120、 2.083~3.486、 0.151~0.203、 0.158~1.046、 0.189~0.286、0.196~0.305、0.231~0.403和0.323~0.512 mg·mL^(-1)。结论所建立的指纹图谱与多指标成分定量方法准确可靠,可用于参仙升脉口服液较全面的质量控制。

关键词：参仙升脉口服液高效液相色谱法指纹图谱含量测定质量控制丹参素盐酸伪麻黄碱补骨脂苷异补骨脂苷迷迭香酸丹酚酸B 补骨脂素异补骨脂素朝藿定C 淫羊藿苷