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人宫颈癌组织环加氧酶2mRNA剪接异构体的表达(英文)

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中国临床康复 2005年第42期9卷 188-189页

作者：龚霞万敬员叶笃筠吴萍张力周歧新重庆医科大学解剖学教研室重庆市400016 重庆医科大学药理学教研室重庆市400016 华中科技大学同济医学院病理生理学系湖北省武汉市430030

背景:宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展与环加氧酶2密切相关。目的:探讨人宫颈癌组织中是否存在环加氧酶2选择性剪接异构体的表达及其可能意义。设计:非随机对照实验。单位:重庆医科大学生物化学与分子药理学重点实验室,... 详细信息

背景:宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展与环加氧酶2密切相关。目的:探讨人宫颈癌组织中是否存在环加氧酶2选择性剪接异构体的表达及其可能意义。设计:非随机对照实验。单位:重庆医科大学生物化学与分子药理学重点实验室,重庆医科大学附属第一医院妇产科。对象:选择13例重庆医科大学附属第一医院妇产科2002-03/2002-04宫颈癌住院患者的癌组织及正常组织。方法:设计一对全新引物,并采用反转录聚合酶链反应技术,从宫颈癌组织中分离环加氧酶2mRNA,然后对电泳条带进行克隆、测序和分析。主要观察指标:①观察癌组织与正常组织反转录聚合酶链反应琼脂糖电泳结果。②分析癌组织与正常组织电泳条带测序结果。结果:①正常宫颈组织未发现环加氧酶2目的条带(252bp),而宫颈癌组织则出现两条条带,除环加氧酶2目的条带外,还有一新的电泳带(534bp),经克隆和测序证实,该新条带除目的条带的环加氧酶2DNA的第7、8外显子序列外,还包含第7、8外显子间的内含子序列,即保留的内含子(282bp)。②根据阅读框推测,在保留的内含子第48～50碱基出现终止密码。结论:发现宫颈癌组织中存在环加氧酶2基因的选择性剪接异构体(Genbankaccessionnumber:BU493602),其所编码蛋白可能较已报道的环加氧酶2酶蛋白小。

关键词：宫颈肿瘤剪接体异构酶类

PIN1反义基因转染抑制人骨肉瘤细胞的增殖

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肿瘤 2006年第1期26卷 32-36页

作者：熊文化陈安民郭风劲张衣北黄涛华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科武汉430030

目的观察以pIRES2-EGFP质粒为载体的PIN1反义基因转染对人骨肉瘤细胞增殖的抑制作用。方法不同量(0、20、50、100、200、250μL)的PIN1反义基因以pIRES2-EGFP质粒为载体包装后转染人骨肉瘤MG-63细胞,收集转染前后的培养细胞和上清液,MT... 详细信息

目的观察以pIRES2-EGFP质粒为载体的PIN1反义基因转染对人骨肉瘤细胞增殖的抑制作用。方法不同量(0、20、50、100、200、250μL)的PIN1反义基因以pIRES2-EGFP质粒为载体包装后转染人骨肉瘤MG-63细胞,收集转染前后的培养细胞和上清液,MTT法观测转染前后细胞生长曲线;流式细胞仪观测细胞生长周期变化和细胞凋亡情况;Western blot法检测PIN1蛋白的表达变化;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PIN1mRNA表达变化。结果MTT法和流式细胞仪检测显示反义PIN1基因转染后,MG-63细胞生长受到抑制,且其凋亡被促进;Western blot结果表明转染反义PIN1基因的量越多,其PIN1蛋白表达量越低,测得空白对照组及不同量转染组的光密度比值分别为0.854±0.136、0.866±0.138、0.732±0.154、0.611±0.121、0.547±0.109、0.398±0.113、0.320±0.151,差异有显著性(P<0.05);RT-PCR检测其光密度比值分别为0.983±0.125、0.988±0.127、0.915±0.157、0.786±0.125、0.608±0.124、0.433±0.130、0.410±0.158,差异有显著性(P<0.05)。结论反义PIN1基因可封闭PIN1mRNA,使MG-63细胞表达的PIN1蛋白减少,从而抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖。

关键词：骨肉瘤异构酶类基因,PIN1 转染寡核苷酸类,反义 MG-63细胞

蛋白质二硫键异构酶在染砷家兔皮肤中的表达变化

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中华疾病控制杂志 2016年第4期20卷 417-421页

作者：郎曼吴军马艳郑玉建新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的观察亚砷酸钠(i As3+)染毒对家兔皮肤蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)的影响,探讨PDI与砷致皮肤损害的关系。方法将30只健康雄性家兔随机平均分到对照组(C)及低(L,0.13mg/千克体重(kg.w))、中(M,0.26mg/kg.w)... 详细信息

目的观察亚砷酸钠(i As3+)染毒对家兔皮肤蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)的影响,探讨PDI与砷致皮肤损害的关系。方法将30只健康雄性家兔随机平均分到对照组(C)及低(L,0.13mg/千克体重(kg.w))、中(M,0.26mg/kg.w)、中高(MH,0.65mg/kg.w)、高(H,1.30mg/kg.w)剂量染毒组。亚砷酸钠饮水染毒3个月后处死,取背部相同位置全厚皮肤样。双向凝胶电泳分离样品中蛋白,Bio-Rad图像系统分析胶图,筛选差异表达蛋白,胶内酶切后采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行鉴定。通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测样品中PDI mRNA的表达。结果染毒3个月后,家兔无死亡,各组家兔体重无明显变化,M、MH、H组可观察到家兔背腹部毛发无光泽、粗糙,H组尤为明显。皮肤中PDI在M、MH组表达量下降,在H组表达量上升。PDI mRNA在MH和H组上调(F=225.83,P<0.001)。结论亚砷酸钠染毒后,随染毒剂量升高,家兔皮肤PDI蛋白表达量先降低后升高,PDI mRNA逐渐增高,同时可观察到家兔毛发粗糙,提示PDI可能在砷致皮肤损伤中发挥作用。

关键词：砷皮肤异构酶类

巨噬细胞移动抑制因子抑制剂对大肠癌细胞增殖的作用

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检验医学与临床 2011年第1期8卷 1-3,5页

作者：杨莉萍陈萌彭侠彪全华斌何兴祥广东药学院附属门诊部检验科广州510224 广州医学院第二附属医院消化科广州510260 广东省中山市人民医院消化科 528403 广东药学院临床医学院内科学教研室广州510310

目的研究选择性巨噬细胞移动抑制因子(MIF)互变异构酶活性抑制剂ISO-1对大肠癌细胞增殖的影响并探讨其可能机制。方法不同浓度的ISO-1(0.01～100μmol/L)作用于人大肠癌细胞Lovo、SW116和鼠大肠癌细胞CT26,对照组以相应浓度的二甲基亚... 详细信息

目的研究选择性巨噬细胞移动抑制因子(MIF)互变异构酶活性抑制剂ISO-1对大肠癌细胞增殖的影响并探讨其可能机制。方法不同浓度的ISO-1(0.01～100μmol/L)作用于人大肠癌细胞Lovo、SW116和鼠大肠癌细胞CT26,对照组以相应浓度的二甲基亚砜处理。采用MTT法观察ISO-1对大肠癌细胞增殖的影响。通过L-多巴色素甲酯测定MIF互变异构酶活性,酶联免疫吸附试验测定ISO-1作用后大肠癌细胞MIF蛋白水平,逆转录聚合酶链反应检测ISO-1作用后大肠癌细胞IL-8mRNA的表达。结果 ISO-1抑制了Lovo细胞的增殖,且呈剂量和时间依赖性;ISO-1同样抑制了SW116(F=800.694,P异构酶活性,并且与抑制大肠癌细胞增殖程度呈正相关性(Lo-vo:r=0.54,P=0.005;SW116:r=0.683,P异构酶活性并下调IL-8的表达。

关键词：肠肿瘤大肠巨噬细胞游走抑制因子异构酶类逆转录聚合酶链反应