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中国渤海鱼类寄生异尖属线虫幼虫的分子鉴定和遗传多样性分析(线虫纲,蛔总科)(英文)

动物分类学报 2013年第4期38卷 687-694页

作者：史梅青明珠张莉安瑞永张路平河北师范大学生命科学学院石家庄050024 沧州师范学院生物学系沧州061001

2008年5月至2009年5月间对渤海鱼类寄生线虫的幼虫进行了采集。通过形态学观察,从172条(5种)鱼类体内共鉴定出612条异尖属线虫的幼虫。每条幼虫分布提出基因组DNA,利用PCR技术扩增出ITS区,并用限制性内切酶(HinfⅠ,TaqⅠand HhaⅠ)进行... 详细信息

2008年5月至2009年5月间对渤海鱼类寄生线虫的幼虫进行了采集。通过形态学观察,从172条(5种)鱼类体内共鉴定出612条异尖属线虫的幼虫。每条幼虫分布提出基因组DNA,利用PCR技术扩增出ITS区,并用限制性内切酶(HinfⅠ,TaqⅠand HhaⅠ)进行酶切分析。随后选择有代表性的样品进行ITS-1,ITS-2,以及线粒体DNA SSU序列分析。对612个样品进行酶切分析后,发现两种不同的基因型,其中603个样品为派氏异尖线虫Anisakis pegreffii,9个样品为重组基因型。因此渤海鱼类中派氏异尖线虫为优势种,占所检测样品的98.5%。对重组基因型的ITS-1和IT S-2进行序列分析表明有两种不同的重组基因型,重组基因型Ⅰ(RecⅠ)与以前报道的杂交种相同,在ITS-1的280和296部位有C/T的杂合;而重组基因型Ⅱ代表一种新的重组基因型,它只在296部位有C/T的杂合。线粒体DNA SSU序列分析表明两种重组基因型的序列与派氏异尖线虫完全相同。该结果表明重组基因型有可能是一种祖先多态性的保留。

关键词：异尖属分子鉴定转录间隔区限制性片段长度多态性线粒体DNA

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黄海鱼类寄生异尖属线虫幼虫及内弯宫脂线虫的分子鉴定

黄海鱼类寄生异尖属线虫幼虫及内弯宫脂线虫的分子鉴定

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作者：杜春霞河北师范大学

学位级别：硕士

作者对采自2005年5月到2006年10月的黄海鱼类寄生异尖属线虫幼虫及内弯宫脂线虫进行了分子分类学鉴定,在对鱼类寄生线虫进行形态学分类的基础上,从202条隶属于30种鱼体内挑选出785条异尖属线虫幼虫用于PCR-RFLP (聚合酶链反应-限制性片... 详细信息

作者对采自2005年5月到2006年10月的黄海鱼类寄生异尖属线虫幼虫及内弯宫脂线虫进行了分子分类学鉴定,在对鱼类寄生线虫进行形态学分类的基础上,从202条隶属于30种鱼体内挑选出785条异尖属线虫幼虫用于PCR-RFLP (聚合酶链反应-限制性片段长度多态性)分析,并在具代表性的8个不同的鱼类宿主挑选出48条形态上有差别的内弯宫脂线虫进行rDNA ITS区序列测定分析。结果如下:通过对所选异尖属线虫幼虫rDNA的ITS区进行PCR-RFLP分析,主要用内切酶Hinf1进行酶切,依据酶切片段长度的多态性和部分样品的序列测定,得出的实验结果显示黄海鱼类寄生异尖属线虫幼虫共有三个基因型:派氏异尖线虫Anisakis pegrefii,典型异尖线虫Anisakis typica及派氏异尖线虫Anisakis pegrefii与简单异尖线虫A. simplex sensu stricto的杂交体。其中Anisakis pegrefii是优势种,785个异尖属线虫幼虫样品中有770个为Anisakis pegrefii,约占总数的98%,在斑头Agrammus agrammus (Temminck & Schlegel),白姑Argyrosomus argentatus (Houttuyn),舵鲣Auxis thazard(lacépède)等29种所检鱼类体内均有发现。Anisakis typica数量较少,共3条,宿主为舵鲣Auxis thazard(lacépède),绿鳍鱼Chelidonichthys kumu。杂交体共12条,宿主为白姑Argyrosomus argentatus (Houttuyn),舵鲣Auxis thazard(lacépède),高眼鲽Cleisthenes herzenstein,大头鳕Gadus macrocephalus Tilesius,青鳞Harengula zunasi Bleeker,鲈鱼Lateolabrax japonicus (Cuvier & Valenciennes),海鳗Muraenesox cinereus (Forskal),带鱼Trichiurus haumela (Forskal),日本海魴Zeus japonicus Cuvier &Valencienn。其中Anisakis pegrefii与A. simplex sensu stricto的杂交体为国内首次发现。选用内弯宫脂线虫的48个样品是根据其侧翼,胃盲囊和肠盲囊的比值,交合刺的长度,尾尖等形态的不同值所筛选出来的,线虫宿主为鮟鱇 Lophius litulon (Jordan),鳕鱼Gadus macrocephalus Tilesius,高眼鲽Cleisthenes herzensteini (Schmidt),六线鱼Hexagrammos otakii Jordan & Starks,黑鮶 Sebastodes fuscescens (Houttuyn),马鲅Scomberomorus niphonius (Guvie& Valenciennes),鬼鮋 Inimicus japonicus (Cuvier& Valenciennes),绵鳚Zoarces elongatus Kner8种鱼类。经过对内弯宫脂线虫的rDNA ITS-1和ITS-2进行rDNA的ITS区序列测定,结果表明来自不同宿主且形态有所差异的所有内弯宫脂线虫在分子水平上无差异,这些形态上的差异可能是由线虫不同的发育阶段及不同宿主对线虫的影响所造成的。

关键词：黄海线虫异尖属内弯宫脂线虫核糖体DNA 内转录间隔区聚合酶链反应限制性片段长度多态性

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渤海鱼类寄生异尖属线虫的分子鉴定和群体遗传结构分析

渤海鱼类寄生异尖属线虫的分子鉴定和群体遗传结构分析

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作者：史梅青河北师范大学

学位级别：硕士

利用rDNA ITS区的PCR-RFLP(DNA扩增片段长度多态性)结合序列分析,首次对我国渤海6种鱼体内寄生的612条异尖属线虫幼虫进行分类鉴定。内切酶HinfⅠ的酶切电泳图包括两种酶切条带,分别对应于派氏异尖线虫(603条)和Abollo等(2003)所发现的... 详细信息

利用rDNA ITS区的PCR-RFLP(DNA扩增片段长度多态性)结合序列分析,首次对我国渤海6种鱼体内寄生的612条异尖属线虫幼虫进行分类鉴定。内切酶HinfⅠ的酶切电泳图包括两种酶切条带,分别对应于派氏异尖线虫(603条)和Abollo等(2003)所发现的重组基因型(9条)。选择3个派氏异尖线虫和全部的重组基因型样品进行ITS-1和ITS-2序列分析,结果表明酶切结果显示为派氏异尖线虫的样品与Genbank上已登录的派氏异尖线虫的ITS-1和ITS-2区的序列完全相同,再次证明其为派氏异尖线虫,而9条重组基因型在ITS-1区出现了2种序列,一种在280bp和296bp处各存在一个C/T双重叠峰(重组基因型Ⅰ,Rec1),该序列与Abollo等(2003)的结果相一致;另一种只在296bp处存在一个C/T双重叠峰(重组基因型Ⅱ,Rec2),该重组基因型为首次报道。两种重组基因型mtDNA SSU基因的序列分析显示Rec1的SSU序列与派氏异尖线虫的完全一致,而Rec2的SSU序列与派氏异尖线虫仅有1个碱基差异,推测本研究所发现的两种重组基因型有可能是派氏异尖线虫种内变异的结果。首次采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)结合序列分析方法对我国渤海鱼类寄生派氏异尖线虫(603条线虫)mtDNA cox1和nad1基因的部分序列进行群体遗传结构研究,结果显示mtDNA cox1基因经DGGE产生了10种不同的带型,定义了10种单倍型(Haplotype1-10,Hap1-10),10种单倍型cox1基因序列之间存在10个多态性位点,nad1序列之间存在9个多态性位点,单倍型Hap3、Hap8和Hap10 nad1基因的序列完全一致。根据鱼类宿主划分派氏异尖线虫种群,分为6个种群,分别是鲐鱼种群(Pn),马鮫种群(Sc),鳙鱼种群(Ar),梅童棘头鱼种群(Co),吉氏黄鲫种群(Se)和鲬鱼种群(Pl)。分子方差分析(AMOVA)表明派氏异尖线虫种群内存在很高的遗传变异,占总变异的99.89%,种群间的遗传变异很小,仅占总变异的0.11%,说明渤海鱼类寄生派氏异尖线虫的遗传分化主要发生在种群内,种群间无明显分化。梅童棘头鱼种群与其余5个种群的遗传分化系数(Fst)在0.00836-0.04482之间,说明梅童棘头鱼种群与其余5个种群之间存在较弱的遗传分化;其余5个群体之间的Fst为负值,说明这5个种群无遗传分化。梅童棘头鱼种群和鳙鱼种群或马鮫种群之间遗传分化系数Fst值的P检验均出现显著差异(P异尖线虫6个种群间的遗传分化很弱,说明派氏异尖线虫无宿主特异性。

关键词：渤海鱼类线虫异尖属分子鉴定派氏异尖线虫群体遗传结构

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异尖属线虫的地理分布研究进展

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海洋科学前沿 2014年第1期1卷 15-20页

作者：杜晓洁董娜张路平河北师范大学生命科学学院石家庄

异尖线虫幼虫广泛分布于世界各地的海洋鱼类体内,其幼虫可感染人类引起异尖线虫病。因此,国内外学者对异尖线虫的分类和地理分布进行了大量研究。本文对近十几年来有关异尖线虫的研究结果进行了总结,以便对异尖线虫的种类和地理分布有... 详细信息

异尖线虫幼虫广泛分布于世界各地的海洋鱼类体内,其幼虫可感染人类引起异尖线虫病。因此,国内外学者对异尖线虫的分类和地理分布进行了大量研究。本文对近十几年来有关异尖线虫的研究结果进行了总结,以便对异尖线虫的种类和地理分布有较为详尽的了解,从而为异尖线虫病的防治和进出口检验提供科学依据。

关键词：异尖属异尖科线虫地理分布宿主

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舟山渔场鱼类异尖线虫感染现况及其理化耐受研究

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中华预防医学杂志 2010年第11期44卷 1037-1042页

作者：张均和林启张乾通何伟贤李科峰徐徐浙江省舟山市疾病预防控制中心慢性病防制科 316021

目的掌握舟山渔场鱼类异尖线虫感染情况，了解异尖线虫Ⅲ期幼虫（L3）理化生物学特性。方法对29种444尾海鱼进行实验室解剖，分离体内异尖线虫幼虫，镜下虫种鉴定；观察异尖线虫L3在不同介质、温度条件下生存耐受情况。结果共发现21种21... 详细信息

目的掌握舟山渔场鱼类异尖线虫感染情况，了解异尖线虫Ⅲ期幼虫（L3）理化生物学特性。方法对29种444尾海鱼进行实验室解剖，分离体内异尖线虫幼虫，镜下虫种鉴定；观察异尖线虫L3在不同介质、温度条件下生存耐受情况。结果共发现21种218尾海鱼有异尖科线虫L3感染，总感染率为49．10％（218／444），感染率高的鱼种有带鱼、鲐鱼、鱿鱼、白姑鱼和海鳗等，平均感染强度为15．28条／尾，218尾海鱼体内共检出异尖科线虫幼虫3332条，异尖线虫L3占99．46％（3314／3332），伪新地线虫L1只占0．54％（18／3332）。异尖线虫k对常用的调味品有较强的耐受力，高度白酒杀虫效果[存活（42．6±14．77）min]优于低度白酒[存活（127．1±63．40）min]；t=4．105，P〈0．05。低浓度复方甲苯咪唑（6．25g／L）杀虫效果[存活（28．10±4．95）h]优于高浓度[12．50、18．75g／L；存活（98．20±25．69）h、（113．60±26．35）h；F=45．198，P〈0．01]的，也优于其他药物[阿苯达唑、甲苯咪唑；分别存活（65．80±17．03）h、（94．20±39．77）h；F=17．393，P〈0．01]；异尖线虫L3在-20℃、-10℃时最长分别可存活9、12h，而在50℃、60℃时分别于〈11s、〈1s即死。结论舟山渔场鱼类异尖线虫幼虫感染率较高；异尖线虫幼虫耐低温而不耐高温。

关键词：鱼类异尖属幼虫线虫感染感染控制

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