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遗传 2004年第3期26卷 409-413页

作者：田云卢向阳易克唐勇军陈惠明湖南农业大学生化与发酵工程实验室长沙410128

tmRNA是一类具有类似tRNA分子和mRNA分子双重功能的小分子RNA,它在一种特殊的翻译模式——反式翻译模式过程中发挥重要作用。最近又发现它与基因的表达调控及细胞周期的调控等生命过程密切相关。因此,关于tmRNA的研究已经引起了研究者... 详细信息

tmRNA是一类具有类似tRNA分子和mRNA分子双重功能的小分子RNA,它在一种特殊的翻译模式——反式翻译模式过程中发挥重要作用。最近又发现它与基因的表达调控及细胞周期的调控等生命过程密切相关。因此,关于tmRNA的研究已经引起了研究者的高度重视,它将是RNA组学研究的一个重要内容。文章主要论述了近年来关于tmRNA结构和功能方面的一些研究进展。

关键词： tmRNA 反式翻译 SmpB蛋白延伸因子-tu 核蛋白S1

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感染诱导猪肺炎支原体168株差异表达蛋白的筛选及鉴定

感染诱导猪肺炎支原体168株差异表达蛋白的筛选及鉴定

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作者：王宏恩山西农业大学

学位级别：硕士

[目的]猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae, Mhp)是引起猪支原体肺炎Mycoplasma pneumoniae of Swine, MPS)的主要病原。毒力相关因子在支原体的感染与致病中起着十分重要的作用,但目前对毒力相关因子了解甚少。因此,本研究通过对... 详细信息

[目的]猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae, Mhp)是引起猪支原体肺炎Mycoplasma pneumoniae of Swine, MPS)的主要病原。毒力相关因子在支原体的感染与致病中起着十分重要的作用,但目前对毒力相关因子了解甚少。因此,本研究通过对感染猪气管上皮细胞(STEC)诱导前后猪肺炎支原体168强、弱毒株进行差异蛋白质组学分析,试图筛选到一些可能的毒力相关因子。[方法]本试验利用Mhp168强、弱毒株体外感染猪气管上皮细胞(STEC),根据上清支原体含量来筛选出适宜的感染条件。将感染STEC细胞前后的Mhp168强、弱毒株蛋白分别进行双向电泳分离,利用PDQuest V 8.0软件对扫描所得的双向电泳图进行分析(T检验法,差异>1.5倍),筛选出差异蛋白。并将筛选出的差异蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶进行Western-blot验证及延伸因子tu进行了原核表达。[结果]1.根据Mhp168强、弱毒株感染STEC细胞上清支原体量筛选出的感染条件为：感染剂量为1×108CCU,感染时间为48h。2.从感染诱导前后的Mhp168强毒株蛋白双向电泳图谱中筛选出了7个差异的支原体蛋白,其中3个只出现在感染组中,4个在感染后表达上调;从感染诱导前后的Mhp168弱毒株蛋白双向电泳图谱中筛选出了6个差异的支原体蛋白,其中1个只出现在感染组中,4个在感染后表达上调。将筛选出的差异蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶进行Western-blot验证,结果显示该蛋白在感染诱导后表达上调(ptu进行了原核表达,并将表达蛋白进行了Western-blot验证,结果表明表达蛋白能够与抗Mhp阳性血清发生反应,显示具有良好的反应原性。

关键词：猪肺炎支原体168株双向电泳差异蛋白蛋白免疫印迹延伸因子-tu

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奶牛乳房炎主要病原菌EF-tu蛋白同源性及T、B细胞抗原表位分析

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黑龙江八一农垦大学学报 2022年第3期34卷 55-61页

作者：范钊玮陈晶杨思宇刘慧婷王蓝悦王然马骏王欣冯振月于永忠崔玉东黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院大庆163319

奶牛乳腺炎是由病原菌感染引起的急性或慢性乳腺疾病,严重危害奶牛健康和影响奶业发展。随着病原菌耐药性不断增强,抗生素治疗奶牛乳腺炎的效果越来越不佳。因此,研究和使用疫苗预防奶牛乳腺炎越来越受到重视。引起奶牛乳腺炎的病原菌... 详细信息

奶牛乳腺炎是由病原菌感染引起的急性或慢性乳腺疾病,严重危害奶牛健康和影响奶业发展。随着病原菌耐药性不断增强,抗生素治疗奶牛乳腺炎的效果越来越不佳。因此,研究和使用疫苗预防奶牛乳腺炎越来越受到重视。引起奶牛乳腺炎的病原菌主要为无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、金黄色葡萄球菌和埃希氏大肠杆菌等。能否从这些病原菌中寻找高度保守的共同蛋白质分子作为疫苗候选抗原是值得研究的课题。延伸因子-tu(Elongation factor tu,EF-tu)是存在于真核细胞和细菌细胞内参与RNA翻译的常见功能蛋白。研究表明,多种病原菌的EF-tu作为抗原均能够诱导良好免疫保护作用。因此,研究对分离得到的无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、金黄色葡萄球菌和埃希氏大肠杆菌EF-tu基因进行了Sanger法测序,然后对其编码蛋白的理化性质、结构、同源性、T细胞和B细胞表位等进行分析比较。结果显示,无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌EF-tu由398个氨基酸组成;金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌EF-tu分别由394、409个氨基酸组成,相对分子质量均为44 kda左右,且无规则卷曲占比较高;EF-tu蛋白是一种无信号肽、无跨膜结构域的亲水性分泌蛋白,对其核苷酸和氨基酸序列进行同源性分析显示,三种链球菌EF-tu氨基酸序列同源性高于91%,与金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌的同源性超过68%;对EF-tu的T细胞表位和B细胞表位进行预测,得到11个IC50值小于50 nM的共同T细胞表位和7个阈值大于0.5的B细胞表位,说明具有交叉免疫原性,为进一步开展EF-tu叉免疫原性研究提供参考。

关键词：奶牛乳腺炎无乳链球菌停乳链球菌乳房链球菌金黄色葡萄球菌埃希氏大肠杆菌延伸因子-tu 生物信息学分析

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