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产酸脱硫反应器优势功能菌生态关系

南京理工大学学报 2004年第5期28卷 538-541,556页

作者：任南琪甄卫东李建政王爱杰俞云哈尔滨工业大学环境生物技术研究中心黑龙江哈尔滨150090

研究产酸脱硫反应器的微生物生态关系 ,对分离出来的 2种优势功能菌AB-ZH0 1和SRB -ZH0 7进行单独和配合生态学实验。碳源被SRB -ZH0 7利用去除硫酸盐的去除率顺序为 :乳酸 >丙酸 >丁酸 >乙酸 >葡萄糖 ;AB -ZH0 1对碳源的利用率顺序为 ... 详细信息

研究产酸脱硫反应器的微生物生态关系 ,对分离出来的 2种优势功能菌AB-ZH0 1和SRB -ZH0 7进行单独和配合生态学实验。碳源被SRB -ZH0 7利用去除硫酸盐的去除率顺序为 :乳酸 >丙酸 >丁酸 >乙酸 >葡萄糖 ;AB -ZH0 1对碳源的利用率顺序为 :葡萄糖 >乳酸 >丁酸 >乙酸 >丙酸。SRB和AB之间存在密切的互生关系 ,AB可以促进葡萄糖的降解并为SRB提供底物 ,SRB代谢产生的H2 S对AB有抑制作用。AB -ZH0 1和SRB -ZH0 7的数量比为 0 .5时 ,SO2

关键词：优势功能菌底物利用互生关系

梯棱羊肚菌在不同培养基质上的生理特性及分泌蛋白组比较分析

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梯棱羊肚菌在不同培养基质上的生理特性及分泌蛋白组比较分析

贵阳市东郊不同植被类型下土壤特性对微生物功能的影响

中国菌物学会2023年学术年会

作者：蔡英丽马晓龙张倩倩于富强赵琦黄伟宋佳鑫刘伟

羊肚菌Morchella spp.是一种具有重要经济价值的大型食用菌,可在多种合成或半合成培养基上生长,然而其复杂的营养代谢和需求仍然不明确。本研究基于羊肚菌人工栽培中常用的生物量指标,评估并比较了梯棱羊肚菌***在葡萄糖、稻草、木屑、... 详细信息

羊肚菌Morchella spp.是一种具有重要经济价值的大型食用菌,可在多种合成或半合成培养基上生长,然而其复杂的营养代谢和需求仍然不明确。本研究基于羊肚菌人工栽培中常用的生物量指标,评估并比较了梯棱羊肚菌***在葡萄糖、稻草、木屑、小麦粒和后三者等比例混合物上培养时的生长特性和胞外酶产量。梯棱羊肚菌可以在所有五种供试培养基上生长,但菌丝生长速率、生物量和菌核产量存在显著差异。最适合梯棱羊肚菌的培养基是小麦和含小麦的混合培养基,其次是葡萄糖,而稻草和木屑最不适合。通过液相色谱-串联质谱检测共鉴定出268种分泌蛋白,蛋白质功能分类和无标记比较分析表明,碳水化合物活性酶是梯棱羊肚菌分泌组的主要成分,其次是蛋白酶、肽酶和其他蛋白质。不同培养基的酶组蛋白丰度不同,从葡萄糖培养基的64%到稻草培养基的88%不等。糖苷水解酶和碳水化合物结合模块的酶组在五个分泌体中均显著富集。此外,在混合培养基连续培养梯棱羊肚菌的过程中,检测了内切葡聚糖酶、木质素酶、淀粉酶、木聚糖酶、外切葡聚糖酶和葡萄糖苷酶的酶活性,并通过实时定量PCR检测了相应基因的相对表达。生长潜力、分泌组、胞外酶活性和不同底物上基因表达的综合数据表明,梯棱羊肚菌对木质纤维素的降解能力较弱,但淀粉分解能力强。其将纤维素降解为低聚糖的能力较弱,这可能是梯棱羊肚菌利用纤维素的限速步骤。此外,梯棱羊肚菌具有较强的分解各种半纤维素糖苷键的能力,尤其是分解α-和β-半乳糖苷酶的能力。仅检测到极少数木质素降解相关蛋白,且丰度较低,与梯棱羊肚菌木质素降解能力较弱的表现一致。此外,脂肪酶和几丁质酶的存在表明梯棱羊肚菌能够在体外分解其自身的菌丝体。该研究为进一步了解梯棱羊肚菌复杂的营养代谢提供了关键数据。

关键词：梯棱羊肚菌分泌蛋白组底物利用营养代谢碳水化合物活性酶

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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土壤 2009年第2期41卷 224-229页

作者：李世朋蔡祖聪杨浩土壤与农业可持续发展国家重点实验室(中国科学院南京土壤研究所) 南京210008

选取贵阳市东郊7种植被下土壤,测定了微生物群落功能(Biolog法)和13种土壤特性,采用主成分分析和回归分析方法,研究了土壤特性对微生物群落功能的影响。结果表明,土壤特性解释了土壤微生物底物利用变异的77.9%和土壤微生物功能多样性的... 详细信息

选取贵阳市东郊7种植被下土壤,测定了微生物群落功能(Biolog法)和13种土壤特性,采用主成分分析和回归分析方法,研究了土壤特性对微生物群落功能的影响。结果表明,土壤特性解释了土壤微生物底物利用变异的77.9%和土壤微生物功能多样性的全部变异,其中,土壤pH、有效P、速效K、有机C、水解N和溶解性有机C分别解释了底物利用的48.4%、15.9%、5.9%、5.7%、1.6%和0.4%;有效P、速效K、有机C和全N分别解释了微生物功能多样性指标(H′)变异的67.4%、27.7%、4.7%和0.2%,表明土壤特性对微生物底物利用和功能多样性有决定性影响。

关键词：植被类型土壤特性微生物功能底物利用

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中老年肥胖男性身体活动水平与能量消耗特征

体育科学 2011年第11期31卷 21-26页

作者：王欢江崇民尚文元上海体育学院运动人体科学学院上海200438 国家体育总局体育科学研究所北京100061

以中老年男性肥胖人群为对象,同正常体重人群相比,研究肥胖人群自由生活下的身体活动水平、静息代谢、特定活动下的能耗代谢率、能源底物利用特征,为肥胖机制研究和干预措施制定提供参考。方法：14名50~60岁肥胖男性者（BMI〉30）和15... 详细信息

以中老年男性肥胖人群为对象,同正常体重人群相比,研究肥胖人群自由生活下的身体活动水平、静息代谢、特定活动下的能耗代谢率、能源底物利用特征,为肥胖机制研究和干预措施制定提供参考。方法：14名50~60岁肥胖男性者（BMI〉30）和15名体重正常者（BMI=23）使用加速度计RT3连续7天测量身体活动。之后使用Cortex MetaMax 3 B进行静息代谢和特定身体活动能耗的测量（坐、站、步行3.2 km/h,4.8 km/h,6.4 km/h）。结果：1）肥胖者的每日总能耗、身体活动能耗、中等强度以上活动能耗、中等以上活动的累计时间都显著大于对照组（P〈0.05）。调整了体重因素后,肥胖者单位体重每日能耗/kg略低于对照组,而单位体重身体活动能耗显著高于对照组。2）肥胖组静息能耗高于体重正常组,若是以单位体重计算,静息代谢率显著低于体重正常组（P〈0.05）。3）在坐、站、走活动中,肥胖组消耗的能量显著高于对照组（P〈0.05）。若以公斤体重计算能耗,肥胖组坐姿和站姿的相对能耗略低于对照组,步行的相对能耗两组无差别。4）相同运动下两组人群安静平卧、坐、站、3.2 km/h和4.8 km/h步行时的呼吸交换率没有差异。6.4 km/h步行时,肥胖组的呼吸交换率显著高于体重正常组（P〈0.05）。5）用回归统计法分析影响肥胖的危险因素,静息代谢率可以作为预测肥胖的因子。结论：肥胖人群的身体活动量和每日消耗能量不低于体重正常组,造成肥胖的原因很可能与能量消耗有关,较低的静息代谢率是肥胖发生的重要因素。此外,运动中脂肪氧化能力下降也可能是肥胖危险因素。

关键词：中老年男性肥胖身体活动能量消耗静息代谢率底物利用

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谷氨酸棒杆菌生产琥珀酸的代谢工程研究进展

微生物学通报 2014年第5期41卷 943-949页

作者：夏慧华尹国民朱年青陈涛天津大学化工学院教育部系统生物工程重点实验室天津300072 烟台只楚药业有限公司山东烟台264002

琥珀酸是一种具有重要应用价值的四碳平台化合物。微生物法发酵生产琥珀酸以其社会、环境和经济优势展现出良好的发展前景。谷氨酸棒杆菌被广泛应用于氨基酸、核苷酸等高附加值化学品的工业化生产,在厌氧条件下细胞处于生长停滞状态,但... 详细信息

琥珀酸是一种具有重要应用价值的四碳平台化合物。微生物法发酵生产琥珀酸以其社会、环境和经济优势展现出良好的发展前景。谷氨酸棒杆菌被广泛应用于氨基酸、核苷酸等高附加值化学品的工业化生产,在厌氧条件下细胞处于生长停滞状态,但仍能高效利用碳源合成有机酸,通过代谢工程改造的谷氨酸棒杆菌有望成为理想的琥珀酸生产菌株。结合近年来谷氨酸棒杆菌生产琥珀酸取得的最新成果,本文综述了构建高产琥珀酸工程菌株的代谢工程策略、底物的扩展利用,并展望了将来的研究方向。

关键词：谷氨酸棒杆菌琥珀酸代谢工程底物利用

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消化道肿瘤患者手术前后代谢改变研究

上海医学 2006年第8期29卷 530-533页

作者：全应军吴国豪郑烈伟吴肇汉复旦大学附属上海市第五人民医院普外科上海200240 复旦大学附属中山医院普外科

目的评估消化道肿瘤根治术对机体能量和物质代谢的影响,并评价个体化能量供给对消化道肿瘤手术应激患者能量和物质代谢的影响。方法60例行腹部中、大型手术的消化道肿瘤患者随机均分为营养支持组(术后当天按术前测定的能量消耗量开具营... 详细信息

目的评估消化道肿瘤根治术对机体能量和物质代谢的影响,并评价个体化能量供给对消化道肿瘤手术应激患者能量和物质代谢的影响。方法60例行腹部中、大型手术的消化道肿瘤患者随机均分为营养支持组(术后当天按术前测定的能量消耗量开具营养配方)和普通补液组(术后第1天起每天输注5%或10%葡萄糖100～150 g)。肠道功能恢复后,可经口饮食。采用间接能量代谢测定仪测定氧气消耗量(VO_2)、二氧化碳产生量(VCO_2)、呼吸商(RQ)、静息能量消耗(REE)。测量时间分别为术前和术后第1、3、7天。并计算患者手术前、后底物氧化量、能量代谢平衡、氮平衡,监测患者前白蛋白浓度变化。结果与术前相比,营养支持组术后第1、3天的REE显著增加,术后第3天的增幅显著高于普通补液组(P＜0．05)；术后第7天降至术前水平以下。两组术后RQ均下降,营养支持组术后第3天的降幅显著小于普通补液组(P＜0．05)。营养支持组葡萄糖利用、脂肪动员改变等均较普通补液组缓和。术后第7天,营养支持组的氮平衡和能量平衡均由术前负代谢平衡变为正代谢平衡,与普通补液组的差异有显著性(P＜0．01)。术后第7天营养支持组前白蛋白浓度显著高于普通补液组(P＜0．01)。结论不伴并发症的择期消化道肿瘤手术后REE变化较小,术后不必增加能量供给。根治性肿瘤切除后患者REE值有下降趋势；个体化能量供给可在一定程度上减轻术后机体应激程度,改善能量和氮代谢平衡及患者营养状态。

关键词：静息能量消耗间接测热法底物利用手术应激营养支持肿瘤

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hrdB定点突变阿维链霉菌生物特性的研究

hrdB定点突变阿维链霉菌生物特性的研究

作者：潘盛淇浙江工业大学

学位级别：硕士

阿维菌素(avermectin)是阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)次级代谢产生的一种大环内酯类抗生素,是一类具有高效杀线虫、杀螨虫的绿色生物杀虫剂,被广泛应用于农业和畜牧业中。HrdB是链霉菌属共有的一种全局性调控sigma因子,负责链... 详细信息

阿维菌素(avermectin)是阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)次级代谢产生的一种大环内酯类抗生素,是一类具有高效杀线虫、杀螨虫的绿色生物杀虫剂,被广泛应用于农业和畜牧业中。HrdB是链霉菌属共有的一种全局性调控sigma因子,负责链霉菌生长代谢过程中大部分基因的转录调控。HrdB能够特异性识别阿维菌素合成途径特异性调控基因aveR。通过对hrdB 415、488和1066三个位点进行定点突变。415和488位点位于sigma因子HrdB的1.1区域,具有抑制DNA双链的形成、稳定开放结构、提高转录起始效率的功能,1066位点位于HrdB的2.4区域,负责识别启动子-10区域。构建整合型突变株质粒导入阿维链霉菌亲株Q以及高产菌株CL中,得到 2 个系列 QM1、QM2、QM3、QM4、QM5、QM6、QM7、CM1、CM2、CM3、CM4、CM5、CM6 和 CM7 共 14 个突变株。通过对阿维链霉菌Q系列和CL系列突变株发酵过程中hrdB、aveR、aveA Ⅰ和aveAⅢ实时转录水平的研究,发现hrdB 415A>G 488A>G双位点突变对基因hrdB、aveR、aveA Ⅰ和aveA Ⅲ的转录水平有明显促进作用,其中发酵48h时hrdB转录水平较亲株分别提高35.77%和32.31%,发酵120h时两个系列突变株中aveRR、aveAⅠ和aveAⅢ转录水平分别提高 73.45%和 84.76%;54.27%和 63.39%;35.81%和 41.37%。通过对阿维链霉菌Q系列和CL系列突变株发酵产素的研究,发现hrdB 415A>G 488A>G双位点突变能够有效提高突变株阿维菌素的产量,相对效价分别提高了 62.11%和52.32%。通过对阿维链霉菌Q系列和CL系列突变株发酵终点残糖含量以及使用SF-P2 MicroPlate 96孔板对CL系统突变株底物利用能力的研究,发现hraB 415A>G 488A>G双位点突变株对底物利用能力明显高于其他突变株和亲株。

关键词：阿维菌素全局调控 sigma因子 hrdB 定点突变转录水平底物利用

红树林生境紫色硫细菌的分离鉴定、碳氮硫源物质利用与光合作用关系

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红树林生境紫色硫细菌的分离鉴定、碳氮硫源物质利用与光合作用关...

作者：赵江艳华侨大学

学位级别：硕士

紫色硫细菌大约出现在3.5Ga年前,在生命起源和地球进化、自然界水生生态系统碳氮硫物质循环和能量转化以及维持生态系统平衡中扮演重要角色。近年来,新的氮代谢途径的发现以及新的碳代谢和硫代谢途径和机制的揭示,对于深入理解紫色硫细... 详细信息

紫色硫细菌大约出现在3.5Ga年前,在生命起源和地球进化、自然界水生生态系统碳氮硫物质循环和能量转化以及维持生态系统平衡中扮演重要角色。近年来,新的氮代谢途径的发现以及新的碳代谢和硫代谢途径和机制的揭示,对于深入理解紫色硫细菌在海洋生态系统碳氮硫物质循环中的作用和环境适应性机制研究奠定了基础。但大多紫色硫细菌较难获取纯培养物,保藏的菌种也较难活化和丢失,对其研究远不如紫色非硫细菌广泛和深入,因而挖掘紫色硫细菌资源、开展其理论和应用研究都具有重要意义。红树林独特的生态环境,已引起国内外学者的广泛关注,现成为很多学科研究热点。该系统具有丰富的微生物资源并具有生态多样性,蕴藏着独特的酶资源和基因资源,对于推动红树林生态系统物质循环和能量流动具有重要的作用。本文选择红树林生态环境进行了紫色硫细菌资源挖掘,对其中一株耐酸海洋紫色硫细菌进行了详细研究,主要研究结果如下: 采用选择性培养基和琼脂稀释振荡法,从福建洛阳桥红树林潮间泥水样分离获得14株紫色硫细菌纯培养物。其中菌株YL28是一株轻度耐酸、高含玫红品类胡萝卜素的紫色硫细菌,被鉴定为Marichromatium gracile新菌株。生长条件优化结果表明,优化后生物量为原来的2.69倍。碳源和氮源对光合色素合成量有较显著影响,硫源影响程度较小。该结果可为深入探究紫色硫细菌在海洋光能利用和碳氮硫循环中的生态作用、获得海洋碳氮硫循环机制新认识奠定基础。

关键词：红树林紫色硫细菌分离鉴定底物利用光合作用

代谢工程改造解淀粉芽胞杆菌HZ-12高产伊枯草菌素A

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代谢工程改造解淀粉芽胞杆菌HZ-12高产伊枯草菌素A

作者：许玉享湖北大学

学位级别：硕士

伊枯草菌素A(iturin A)是主要由芽胞杆菌产生的一种脂肽类生物表面活性素,其具有良好的抗菌活性、低毒性、良好的生物降解性和环境相容性等优点,因此在农业生产、药物开发和环境治理等领域具有广泛的应用前景。然而,微生物发酵合成ituri... 详细信息

伊枯草菌素A(iturin A)是主要由芽胞杆菌产生的一种脂肽类生物表面活性素,其具有良好的抗菌活性、低毒性、良好的生物降解性和环境相容性等优点,因此在农业生产、药物开发和环境治理等领域具有广泛的应用前景。然而,微生物发酵合成iturin A能力处于较低水平,限制了其工业化生产和应用。本研究解淀粉芽胞杆菌HZ-12Pbac A(以下简称Pbac A,本实验室保藏)为研究对象,通过增强底物淀粉利用能力、强化脂肽前体物(脯氨酸和脂肪酸)合成途径、阻断代谢副产物聚糖合成途径、调控脂肽合成转录因子以及强化脂肽转运蛋白表达等五个方面的策略,构建iturin A高产解淀粉芽胞杆菌工程菌株,提高iturin A合成能力。通过研究得到以下结果;1.通过敲除1-脱氧野尻霉素合成关键基因gab T,构建工程菌株Pbac AΔgab T;通过强化表达麦芽糖利用相关转录因子Mal R,构建工程菌株Pbac A/p HY-mal R和Pbac A-Pbac A(mal R)),以提高底物(玉米淀粉)利用能力。发酵72 h后测定iturin A产量,结果表明,菌株Pbac AΔgab T、Pbac A/p HY-mal R和Pbac A-Pbac A(mal R))的iturin A产量分别为2.58 g/L、2.45 g/L和2.27 g/L。菌株Pbac AΔgab T和Pbac A-Pbac A(mal R))与对照菌Pbac A(1.98 g/L)比较,分别提高了30.30%、14.65%;菌株Pbac A/p HY-mal R与对照菌株Pbac A/p HY-300(2.01 g/L)相比,提高了21.89%。2.通过前体氨基酸添加实验,证实了外源添加脯氨酸可以提高iturin A的产量。通过构建pro A(5-半醛脱氢酶基因)、pro B(谷氨酸5-激酶基因)、pro C(吡咯啉-5-羧酸还原酶基因)、oc D(鸟氨酸环脱氨酶基因)强化表达菌株,以提高前体脯氨酸供给。发酵72 h后测定iturin A产量,结果表明:oc D强化表达后,与对照菌Pbac A/p HY-300比较,iturin A合成量提升30.35%;而强化表达pro A、pro B及pro C后,iturin A合成量与对照菌相比无明显变化。随后,在菌株Pbac AΔgab T的基础上,构建了oc D整合菌株Pbac AΔgab T::oc D,iturin A产量为2.98 g/L,较出发菌株Pbac A提高了50.51%。同时,通过构建丙二酰羧化酶强化菌株Pbac AΔgab T/p HY-yng H、Pbac AΔgab T/p HY-acc A和Pbac AΔgab T/p HY-acc C。发酵72 h后测定iturin A产量,结果表明:强化丙二酰羧化酶强化,iturin A产量分别为2.87 g/L、2.93 g/L和2.83 g/L,与对照菌株Pbac AΔgab T/p HY-300(2.55g/L)比较分别提高了12.55%、14.90%和10.98%。3.通过构建聚糖合成相关基因缺失工程菌Pbac AΔsip W、Pbac AΔsac B和Pbac AΔeps AB。发酵72 h后测定iturin A产量,结果表明:菌株Pbac AΔsip W、Pbac AΔsac B和Pbac AΔeps AB的iturin A产量分别为2.45 g/L、2.54 g/L和2.38g/L,与对照菌株Pbac A相比,分别提高了21.89%、26.37%和18.41%。同时构建了脂肽合成相关基因缺失工程菌Pbac AΔfen C、Pbac AΔlic A和Pbac AΔbac A,发酵后iturin A产量分别只有0.52 g/L、2.07 g/L和2.03 g/L。工程菌Pbac AΔfen C的iturin A产量明显降低;而工程菌Pbac AΔlic A和Pbac AΔbac A的iturin A产量无明显变化。4.通过构建转录因子Sig A强化表达菌株Pbac A/p HY-sig A及转录因子Ccp C缺失菌株Pbac AΔccp C。发酵72 h后测定iturin A产量,结果表明:菌株Pbac A/p HY-sig A和Pbac AΔccp C产量为2.48 g/L和2.37 g/L,与菌株Pbac A/p HY-300(2.01g/L)和Pbac A(1.98 g/L)比较,iturin A产量分别提高了23.38%和19.69%。5.通过构建脂肽转运蛋白Swr C、Ycx A强化表达菌株Pbac A/p HY-swr C和Pbac A/p HY-ycx A。发酵72 h后测定iturin A产量,结果表明:菌株Pbac A/p HY-swr C和Pb

关键词：伊枯草菌素A 解淀粉芽胞杆菌底物利用前体物供给脂肽转运蛋白